抗氧化片中α－硫辛酸含量测定方法研究

翁　捷　郭建平

【摘要】 目的 建立一种准确、简便测定抗氧化片中α-硫辛酸含量的分析方法。方法 用高效液相色谱仪对抗氧化片供试液中的α-硫辛酸进行含量测定。结果 该方法线性范围：3.568 ~107.04 μg；重现性为RSD=2.3%；加样回收率：98.65% (RSD=0.46%)。结论 用HPLC法测定抗氧化片中α-硫辛酸平均含量为4.77%。方法简便，重复性好。

【关键词】 抗氧化片；α-硫辛酸；HPLC 法

α-硫辛酸是一种内源性抗氧化剂，可以去除机体自由基，既溶于水又溶于脂肪，有良好的配伍性，能促进机体利用葡萄糖合成维生素C，并且促进合成谷胱甘肽，能有效祛除黑色素，还可协助辅酶进行有利于机体免疫力的生理代谢^[1]。α-硫辛酸还具有抗炎作用，可抑制激酶、转化因子、d一肿瘤坏死因子和胶原酶的活性，有抗衰老功效。国外科学家的最近研究还发现，从临床角度看，α-硫辛酸对于阿尔茨海默痛有抑制效果。并且α-硫辛酸能保存和再生其他抗氧化剂。人体的保健作用来自机体产生和外源补给两部分。由于人体自然生成量受体质体能限制，因此外源补给为主要途径^[2]。目前α-硫辛酸针剂和软胶囊已进入临床试验。本研究是以α-硫辛酸为主要成分的口服片剂，现对其质量标准研究内容进行阐述。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters2487-717高效液相色谱系统； Milli-Q纯水器；Mettler电子天平。

1.2 试药 甲醇（江苏汉邦科技有限公司）；醋酸（中国医药集团上海化学试剂公司）超纯水（自制）；抗氧化片（自制）；α-硫辛酸对照品（江苏同和药业有限公司）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 Alltima C₁₈柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为甲醇-0.1％醋酸水（54：46）；流速为1.0 ml/min；柱温为35℃ ；波长为332 nm。在此条件下对照品与样品的HPLC图谱见图1。

2.2 对照品溶液的制备精密称取干燥的α-硫辛酸对照品35.68 mg，用醋酸乙酯溶解并定容至10 ml。

2.3 供试品溶液的制备 取抗氧化片1 g，精密称定，加醋酸乙酯20 ml，称重，超声提取20 min，用醋酸乙酯补充损失的溶剂。过0.45μm滤膜，进样10 μl。由于醋酸乙酯易挥发，进样器温度应控制在15℃以下，以免影响测定结果。

2.4 标准曲线绘制 取2.2项下浓度为3.568 mg/ml的硫辛酸对照品溶液，分别进样1、3、6、10、20、3μl。折算成统一进样体积（10μl）浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，回归成良好的线性，方程为：Y=404 343.5X-144 752.3， r2=0.998，α-硫辛酸进样量在3.568 ~107.04 μg间有良好的线性。

2.5 精密度试验 取浓度为3.568 mg/ml的α-硫辛酸对照品溶液，进样10 μl，连续进6针。RSD=1.3 %。

2.6 稳定型试验 按2.3项下制得的供试液，每隔2 h测一次，测定12 h。RSD为0.7%。

2.7 重复性试验 按2.3项下制备供试液5份，进样10 μl。α-硫辛酸的平均含量为4.97%，RSD=2.3 %。

2.8 加样回收率实验 取0.5 g抗氧化片 6份，加入α-硫辛酸对照品25 mg，按2.3项下制备供试液，进样10 μl。平均回收率为98.65%。RSD=0.46%。结果见表1。

2.9 样品测定结果 按2.3项下处理，测定，结果见表2。

3 讨论

抗氧化片由α-硫辛酸、葡萄籽提取物等组方而成，具有清除自由基和活性氧作用。作为处方中的以α-硫辛酸作为质量控制指标最合理。以不同比例的甲醇、水为流动相时，α-硫辛酸在C18柱上均不保留，改为0.1％醋酸水和甲醇不同比例洗脱时，α-硫辛酸出峰时间为16.649 min。以甲醇为提取溶剂时，α-硫辛酸色谱峰分离度较差，且用大孔树脂及聚酰氨柱均不能改善，选用醋酸乙酯为提取溶媒时，色谱峰分离度好，测定结果准确。

参考文献

［1］ 刘俊栋，刘海霞，李建基，等. 生物抗氧化剂- 硫辛酸的研究.饲料工业，2005：26（2）：14-17.

［2］ 刘红林，牛勃，常冰梅，等. 硫辛酸与维生素C和维生素E的抗氧化作用比较.中国药物与临床,2005，1(5):37.