柴胡对小鼠免疫系统影响的研究进展

张 彤 赵喜红

摘要: 近年来的研究表明,柴胡可使小鼠淋巴细胞增殖,促进IL-2与TNF的分泌,增强巨噬细胞的吞噬能力,提高红细胞免疫粘附功能,具有显著的抗炎作用和抗过敏作用。综述了柴胡对免疫系统的影响,为进一步开展柴胡对免疫系统作用的研究提供理论依据。

关键词:柴胡;小鼠免疫系统;影响

中图分类号:Q41文献标识码:A文章编号: 1007-5739(2009)20-0319-02

柴胡是一种具有疏肝化郁和升阳作用的中草药,全世界有柴胡属植物 200 种,我国已报道的有42 种,17 变种及7变形,主要包括北柴胡和南柴胡。北柴胡又称硬柴胡,是伞形科植物北柴胡(Bupleurum chinese DC);南柴胡又叫软柴胡,是伞形科植物狭叶柴胡(Bupleurum Scorzonerifolium Willd),临床应用以北柴胡为主[1]。北柴胡主产于辽宁、甘肃、河北、河南、山东等地,南柴胡主产于湖北、四川、江苏、安徽等地。柴胡属植物中的绝大多数种类,在产地均作为柴胡药用。柴胡的使用,在北方主要为根,在西南地区为全草,而华东和华南地区则根和地上部分分别使用。柴胡的化学成分相当复杂,迄今为止已报道含有苷、黄酮、挥发油、甾醇、香豆素、有机酸、糖类、木脂素、生物碱及多炔类成分等[2]。柴胡加工炮制方法有醋柴胡、鳖血柴胡、酒柴胡、蜜炙柴胡,现代有柴胡注射液、柴胡灌肠剂、柴胡片、柴胡滴丸、柴胡口服液剂型[3]。大量研究表明,柴胡具有镇静、止痛、降温、镇咳、抗炎、抗菌、保肝利胆、降血压、抗病毒、抗肿瘤等生理活性[4],其中柴胡对免疫系统的作用研究一直是人们关注的焦点。该文综述了胡对小鼠免疫系统的影响,为柴胡的进一步开发及新药的研制提供理论依据。

1对特异性免疫的影响

体液免疫和细胞免疫是机体特异性免疫的重要组成部分。研究显示柴胡对机体体液免疫和细胞免疫均有增强作用,具体包括增殖淋巴细胞,提高IL-2、TNF-α和TNF-β的分泌水平等。刘晓斌等[5]用北柴胡的不同提取组分(乙醇提取、Ba(OH)2提取和水提取),对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌IL-2与TNF-β的作用进行了研究,测定结果表明一定浓度的北柴胡水提取组分和500mL/L乙醇提取组分,对ConA诱导的小鼠脾细胞的增殖反应、IL-2与TNF-β的分泌水平均有较明显地增强作用;而北柴胡的Ba(OH)2提取组分只对ConA诱导的小鼠脾细胞分泌IL-2的水平具有增强作用。陈韶等[6]研究发现柴胡水溶部分及药渣水煎剂对小鼠T、B淋巴细胞均有刺激增生作用,40%醇提物能促进B淋巴细胞的增殖,正丁醇提取物则对T淋巴细胞增殖有增强效应;研究还发现药渣水煎剂能刺激活化的T细胞分泌IL-2,该结果可能是柴胡促进细胞免疫、抗肿瘤效应的机理之一。杨错等[7]分别用溶血素测定法和2,4-二硝基氯苯诱导DTH反应法测定柴胡乳剂对正常小鼠环磷酰胺免疫功能低下小鼠体液免疫、细胞免疫的影响,结果与正常对照组比,柴胡乳剂能明显提高环磷酰胺免疫功能低下小鼠血清溶血素含量,抑制DTH反应小鼠的耳肿胀度,证明柴胡乳剂可以增强正常小鼠及Cy所致免疫功能低下小鼠的特异性免疫功能。巩涛等[8]研究发现柴胡有利于人类T细胞免疫功能的恢复。

南柴胡对特异性免疫也有增强作用。刘晓斌等[9]用小鼠脾细胞培养,研究南柴胡的正丁醇与水提取物对经Con A刺激后的T淋巴细胞增殖反应、IL-2和TNF-α分泌水平的影响,结果发现南柴胡的水提取物对小鼠T淋巴细胞增殖反应、IL-2和TNF-α分泌水平均有增强作用,而南柴胡的正丁醇提取物只对IL-2分泌水平有增强作用。马春玲等[10]研究发现南柴胡提取组分对小鼠的脾淋巴细胞的转化能力及IL-2诱生水平均有上调作用,且有量效相关性。柴胡提高特异性免疫的成分是柴胡多糖。柴胡多糖(bupleuran 2Ilc)通过诱导FIX的磷酸化,PLC和PKC的启动,膜转移,促进各细胞周期调节蛋白及激酶的产生,从而诱导B细胞增殖和成熟[11],进而增强IL-2的分泌量。

2对非特异性免疫的影响

单核巨噬细胞的吞噬能力是衡量机体非特异性免疫功能的标志之一,测定血流中碳粒的消失速度可反映吞噬细胞吞噬异物的能力。柴胡能增加Kupfer细胞吞噬功能,增强巨噬细胞、NK细胞活性。碳粒廓清法测正常小鼠单核巨噬细胞吞噬功能结果表明,柴胡乳剂可提高正常小鼠碳粒廓清指数和校正廓清指数α,增强小鼠非特异性免疫功能[6]。与正常对照组相比,柴胡乳剂8g/kg剂量组可提高小鼠碳粒廓清指数κ(P<0.01),柴胡乳剂810g/kg、410g/kg、210g/kg组均可显著提高小鼠校正廓清指数α(P<0.01),说明柴胡乳剂可增强正常小鼠中性粒细胞吞噬能力。

柴胡增强非特异性免疫的有效成分是柴胡皂苷和柴胡多糖。皂苷能引起腹膜巨噬细胞显著聚集,激活巨噬细胞吞噬。柴胡果胶多糖具有使巨噬细胞的FoR增加,促进清除IC的活性。

3抗炎作用

柴胡具有显著的抗炎作用,其抗炎的有效成分为柴胡皂苷。其中以柴胡皂苷d(SSd)的抗炎作用最强,它对多种炎症过程包括炎性渗出、毛细血管通透性升高、炎症介质释放、白细胞游走、结缔组织增生和多种变态反应炎症均有显著抑制作用[12]。何丽媛等[13]分别采用小鼠二甲苯耳肿胀模型、大鼠蛋清性足肿胀模型及小鼠角叉菜胶足肿胀模型,研究柴胡静脉乳剂对炎症的影响,结果柴胡静脉乳剂能显著抑制小鼠二甲苯性耳肿胀、大鼠蛋清性足肿胀及小鼠角叉菜胶性足肿胀程度,说明柴胡静脉乳剂具有抑制炎症反应的作用。胡继鹰等[14]以保康北柴胡水煎剂灌服小白鼠7d后,结果柴胡水煎剂对小白鼠耳廓肿胀、肉芽肿以及镇痛有非常显著的抑制作用(P<0.01)。说明保康北柴胡药效作用良好,其含有稳定的药物活性成份。Navarro等[15]从圆叶柴胡(Bupleurum rotundif-olium L.)中提取出柴胡皂苷单体1-7,其中柴胡皂苷单体l,2,3,4和6可以有效抑制对酞酸(TPA)引起的急性鼠耳水肿,其抑制率分别是65%,82%,76%,84%和67%,单体皂苷3和6还可以抑制TPA引起的皮肤慢性炎症。柴胡皂苷对小鼠二甲苯所引起的耳壳炎症也有一定程度的抑制作用[16]。

柴胡皂苷抗炎作用的原理众说不一。杜景红等[17]认为SS抗炎的药理作用在于它的皂苷元部分,皂苷元基本母核中环氧齐墩果烯骨架及4位碳原子上的侧链-CH2OH在SS抗炎功效上起着重要作用,柴胡中的主要活性成分柴胡皂苷d在肠道被代谢为柴胡皂苷元D而被吸收。鸟庭靖文[18]认为柴胡皂苷元D的药效非常重要,对于介导钙离子载体生成的PGE2,柴胡皂苷元D呈浓度依赖性抑制作用。并且该作用不是影响环氧化酶活性和花生四烯酸游离,而是通过细胞色素P450环氧化酶(CYP2J3)作用,促进花生四烯酸生成环氧化物类,并且以RT-PCR法分析确认了C6细胞CYP2J3 mRNA的表达;进一步探讨柴胡皂苷元D对CYP2J3的花生四烯酸代谢系的影响,结果柴胡皂苷元D抑制花生四烯酸生成的作用可被环氧化酶抑制药SKF525A消除,并且环氧化酶代谢物具有与柴胡皂苷元D同等程度的PGE2抑制作用,由此表明,柴胡皂苷元D促进环氧化酶代谢物生成,其代谢物可抑制PGE2生成。

4抗过敏作用

肥大细胞是速发型过敏反应的主要效应细胞,许多带正电荷的化合物可诱导其脱颗粒[19]。compound48/80通过作用于胞膜上相应的受体,改变肥大细胞膜的通透性或其他机制诱导组胺等过敏介质的释放[20,21],因此常用于研究肥大细胞介导的非特异性过敏反应的机制或筛选抗过敏药物。柴胡有明显的抗过敏作用。夏玉凤等[22]以compound48/80在体外诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺,研究狭叶柴胡的抗过敏活性,并通过活性追踪分离,探讨其有效部位及有效成分。结果狭叶柴胡醇提取物、乙酸乙酯部分、正丁醇及水部分均显著减少组胺释放,以乙酸乙酯部分的作用最强。狭叶柴胡挥发油对组胺释放呈现一定的促进作用。从狭叶柴胡的乙酸乙酯部分分离得到异鼠李素和槲皮素2种黄酮类化合物,均显著抑制肥大细胞中组胺的释放,表明黄酮为狭叶柴胡抗过敏作用的有效成分[22]。此外,正柴胡饮颗粒能对抗组胺引起离体豚鼠回肠收缩,还能对抗组胺引起的豚鼠皮肤红晕[23]。

柴胡是一味传统中药,具有多种生理活性,中医多配以不同中药广泛应用于调理机体免疫功能及治疗各种炎症。近年来随着分离、提取工艺的改进,柴胡被国内外诸多药业公司制成单味制剂,同样获得了满意的治疗效果。为满足人们对柴胡不断增长的药用及科研需求,对其进行更精细的加工及提高其产量和品质成为了中医药发展中急需解决的问题。

5参考文献

[1] 江苏植物研究所.新华本草纲要[M].上海:上海科技技术出版社,1988.

[2] 刘永喜.丛培臣柴胡的化学成分及药理作用研究概况[J].黑龙江医药,2006,3(19):216-218.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)(2000版)[M].北京:化学工业出版社,2000.

[4] 史青,聂淑琴,黄璐琦.柴胡属植物化学成分及药理研究新进展[J].中国实验方剂学杂志,2002,5(24):55-58.

[5] 刘晓斌,高燕,刘永仙,等.北柴胡提取组分对小鼠淋巴细胞活性的影响[J].细胞与分子免疫学杂志,2002,18(6):600-601.

[6] 陈韶,陈锋,张文仁,等.四种北柴胡提取物在小鼠体内外的免疫效应[J].温州医学院学报,1997,2(2):4-7.

[7] 杨错,邢立国,刘玉兰.柴胡乳剂对小鼠免疫功能的影响[J].沈阳医科大学学报,2006,23(3):169-171.

[8] 巩涛,曹月敏,庄百溪,等.大柴胡加味对梗阻性黄疸T细胞亚群免疫调节观察[J].河北医科大学学报,1999,1(8):21-23.

[9] 刘晓斌,刘永仙,符兆英,等.南柴胡提取物对小鼠脾细胞体外增殖和淋巴因子分泌水平的影响[J].中国中医药信息杂志,2001,8(7):38-39.

[10] 马春玲,张西强,王法权,等.南柴胡对小鼠免疫功能影响的实验研究[J].临沂医学专科学校学报,1999,1(5):11-13.

[11] 郭颖杰,王本祥,山田阳城,等.柴胡多糖诱导B细胞成熟的机理研究中国药理学会通讯,2001,18(4):15.

[12] 阴健,郭力弓.现代中药研究与临床应用(第1版)[M].北京:学苑出版社,1993.

[13] 何丽媛,赵丽清,曲晓梅.柴胡静脉乳剂抗炎作用的实验研究[J].实用药物与临床,2006,9(4):217-218.

[14] 胡继鹰,潘克英,许湘,等.保康北柴胡抗炎、镇痛作用的实验研究[J].中医研究,2005,3(7):14-16.

[15] NAVARRO P,GINER R M,RETIE M C,et al.In vivo antiin-flammatory activity of saponins from Bupleurum rotundifolium[J].Life Sci,2001,68(10):1199-1206.

[16] 刘伟.柴胡不同炮制方法对其抗炎作用的影响[J].河南中医药学刊,1998,13(4):10-12.

[17] 杜景红,左廷兵,李凤兰,等.柴胡属植物研究进展[J].东北农业大学学报,2003,34(3):352-359.

[18] 鸟庭靖文(日).柴胡皂苷元D的新抗炎机制[J].国际中医中药杂志,2006,28(3):170-171.

[19] LAGUNOFF D M,ARTIN T W,READ G. Agents that release histamine from mast cells[J].Annu Rev Pharmacol Toxicol,1983,23(1):331.

[20] SHIN T Y,PARK J H,KIM H M. Effect of Cryptotympana atrata extract on compound induced anaphylactic reactions[J].Ethnopharmacol, 1999,66(10):319.

[21] TASAKA K M,OKAMOTO M. Inteacellular calcium release induced by histamine releasers and its inhibition by some antiallergic drugs[J].Ann Allergy,1986,56(4):64.

[22] 夏玉凤,戴岳,王强.狭叶柴胡的抗过敏活性及其有效成分[J].中国野生植物资源,2003,12(6):50-52.

[23] 何美珊,孙小玉,蔡莹.正柴胡饮颗粒的解热及抗过敏作用[J].中草药,2000,04(24):46-48.