高中生物显微镜实验专题归纳

陈建喜

高中生物必修与选修中所涉及的有关显微镜的内容有：1、脂肪的鉴定。2、高倍显微镜的使用和观察叶绿体。3、观察细胞质的流动。4、观察植物细胞的有丝分裂。5、观察植物细胞的质壁分离和复原。6、观察c3植物和c4植物叶片的结构。7、测细菌的细胞数目。

一、显微镜的使用及知识拓展

1使用

(1)取镜与安放

右手握镜臂，左手托镜座，把显微镜放在实验台的前方稍偏左。

(2)对光

转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。较大的光圈对准通光孔，左眼注视目镜，转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内，通过目镜可以看到白亮的视野。一

(3)低倍镜观察

把所要观察的标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心；转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近标本为止(此时实验者的眼睛应当看物镜头与标本之间，以免物镜与标本相撞)；左眼看目镜内，同时反向缓缓转动粗准焦螺旋，使镜筒上升，直到看到物像为止，再稍稍转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

(4)高倍镜观察

移动装片，在低倍镜下使需要放大观察的部分移动到视野中央；转动转换器，移走低倍物镜，换上高倍物镜；缓缓调节细准焦螺旋，使物像清晰；调节光圈，使视野亮度适宜。

2知识拓展

(1)显微镜总的放大倍数=目镜放大数×物镜放大数，该放大倍数指的是长度或宽度，而不是面积和体积。

(2)视野的大小与放大倍数成反比，放大倍数越大视野越小，看到的范围越小，视野越暗；所以在用高倍镜时，必须移动标本才能看清其他部位，并使用凹面反光镜、大光圈或增强光源，以改善视野亮度，从而使物像明亮清晰。

(3)观察任何标本先用低倍镜观察。

(4)物镜镜头长度与放大倍数成正比，目镜镜头长度与放大倍数成反比。

(5)视野中某观察对象位于左下方如何移动到中央，应将装片或切片向左下方移动，也就是同向移动。

二、细胞质的流动(整个过程均为活体)

1细胞质流动是一种生命现象，随着细胞质基质的运动，悬浮在细胞质基质中的叶绿体等细胞器也会运动。细胞质的流动受细胞的代谢状况和外界环境因素的影响。增强细胞代谢作用的因素，如适宜的光照、温度、PH、生长素等，都可以促进细胞质的流动。反之，不利的环境变化和某些化学药品，如麻醉剂等，则可抑制细胞质的流动。2实验材料最好用黑藻幼嫩的叶片。注意必须选活体材料，且要典型的，不同的植物细胞质流动速度是不同的，而实验时间有限，加之人眼在观察显微镜时也会疲劳，因此必须选细胞质流动速度较快的植物，并且在观察前，最好寻找靠近叶脉部位的细胞进行观察，因为此处水份供应充足，容易观察。3为了提高细胞质的流动性可以在阳光或灯光下放置15-20分钟、提高水温(20-25℃)，切伤一小部分叶片。4观察的材料要始终浸在载玻片上的水滴中，水分过少时要及时添加。5细胞质可朝一个方向流动，也可朝不同的方向流动。6细胞质流动与新陈代谢有密切关系，呼吸越旺盛，细胞质流动越快，反之，则越慢。

三、观察植物细胞的有丝分裂(先活后死)

1材料用洋葱根尖。2步骤：取材——解离——漂洗——染色——压片。3取材时应取根尖2-3mm，现做时不用固定，反之需固定，用一份冰醋酸与三份体积分数为95％的酒精配制固定液。4解离是为了让细胞相互分离，时间过短，细胞不易压散，时间过长，细胞容易被压碎，影响染色。5漂洗时用清水就可，约用10分钟，目的是洗去材料中的盐酸，以利于染色。6染色主要是使染色体着色，用0.02g／mL的碱性染料龙胆紫溶液或醋酸洋红液染色3-5分钟。7压片的目的是使细胞分散开，容易在显微镜下观察，一般压片压到使标本呈显云雾状效果最好。8观察时，先在低倍镜下找到排列紧密的正方形细胞(分生区)，再注意找正分裂的细胞，移到视野中央，然后换高倍镜。9观察到的间期数最多，中期最少，因为间期时间最长，中期时间最短。

四、观察植物细胞的质壁分离与复原(整个过程均为活体)

1最常用的实验材料是紫色洋葱鳞片叶的外表皮细胞，细胞液中有紫色的花青素。2一般用的分离液为30％的蔗糖溶液，若用甘油或硝酸钾溶液，细胞质壁分离后会自动复原。3试剂浓度影响质壁分离的速度，浓度越高，速度越快，但若过高，细胞因过度失水而死亡，无法复原。蔗糖溶液随浓度从5％-30％递增，分离所需时间渐短，当浓度为60％以上，一般不能发生复原。4显微镜下观察到细胞首先从角部出现分离，最后原生质层缩成圆球，这与细胞膜的表面张力有关。