平板凝集反应预防新生骡驹溶血病的临床应用

徐定群,夏桂林,张胜贵,谭建春

(1.云南省永胜县三川镇畜牧兽医站,云南 永胜 674207;2.云南省永胜县动物疫病预防控制中心,云南 永胜 674200;3.云南省永胜县动物卫生监督所,云南 永胜 674200)

新生骡驹溶血病是由公驴和母马杂交所产幼驹,吮食高效价抗体初乳后引发的一种急性、免疫性、溶血性疾病。临床上以贫血、黄疸、血红蛋白尿为主要特征。新生骡驹溶血病时有发生,给饲养户造成一定的经济损失。发病后目前多以停喂母马初乳、输血、补充造血物质为主的治疗方法,但治愈率不高。2005年以来,笔者采用凝集反应测定初乳和血清抗体效价,根据测定结果提示母马初乳和骡驹血液的抗体效价,凝集价在1∶16以上者,7 d内不能让其吃母乳;1∶8以上者,4 d内不能吃母乳;1∶4以下者可以吃母乳。应用这种预防性诊断方法,经临床上94例新生骡驹的应用,效果良好,报告如下。

1 临床症状

骡驹出生后几小时内正常,吃初乳后不久开始发病,最急性的出生后8～36 h出现严重的血尿,尿液呈酱油色,并出现排尿困难,黏膜有轻度黄染。急性的出生后2～4 d发病,黄疸明显,并出现血尿。慢性的出生后约4～5 d发病,症状较轻,并有时能自愈。全身症状表现为:体温一般在37.5℃,骡驹精神沉郁,一旁呆立,呻吟,头下垂,四肢无力,衰弱,不愿吸乳,长时间卧地,肌肉震颤,心跳加快,呼吸急促,后期出现神经症状,多因无法抢救而死亡。

2 凝集反应操作方法

2.1 试验材料 青霉素药剂空瓶6个及15×20 cm玻璃板1块。空瓶用生理盐水洗净沥干后分别贴上“1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、2%红细胞、初乳”字样的标签以防混乱。同时准备好注射器、滴管、消毒药棉等。

站立保定骡驹,颈静脉沟中部剪毛常规消毒后,用注射器静脉采血2mL;母马站立保定,用清洁水洗净乳头并擦干后,挤弃少许初乳后收取2mL乳汁于小瓶中备用。

2.2 初乳稀释液与2%红细胞悬液的制备 将青霉素小瓶按“1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、2%红细胞”标记从左到右排好,然后用吸管由左向右在前4瓶中依次分别加入生理盐水1.5mL、1.0mL、1.0mL、1.0mL;在第5个安瓶中加人生理盐水2.0mL。用吸管吸取初乳0.5mL加入“1∶4”的小瓶中,混匀即成为1∶4稀释倍数的初乳稀释液。再用吸管吸取1∶4的初乳稀释液1.0mL加入“1∶8”的小瓶中,混匀即成为1∶8稀释倍数的初乳稀释液。以此用2倍递增稀释法即制成1∶4、1∶8、1∶16、1∶32的初乳稀释液。取骡驹血液2～3滴加入“2%红细胞”的小瓶中,混匀好成为2%红细胞悬液。

凝集反应操作方法:将玻璃平板置于垫有白纸的桌面上,用吸管分别吸取上述初乳稀释液各1滴等距离加入玻璃板上为诊断列;同样,用生理盐水也加入一列为对照列。然后用吸管吸取2%红细胞悬液等量分别加入初乳稀释液与生理盐水中,用火柴棒或牙签逐一混匀,并轻轻摇动玻板,在室温条件下静置30 min后即可判定结果。

2.3 结果判定 自然光下肉眼仔细观察诊断列,凡是在“1∶16”或“1∶32”处出现液体内澄清,并有颗粒状凝集物出现者,诊断检查结果判定为阳性,记为(+);凡是“1∶16”处没出现凝集物,而是液体呈淡红色混浊,诊断检查结果判定为阴性,记为(一);凡是在“1∶16”处液体凝集反应结果不明显者,诊断检查结果判定为可疑,记为(±)。

应用前述方法在临床上对94例新生骡驹出生后进行了初乳-血液凝集反应诊断检查。凝集价在1∶4,1∶8,1∶16,1∶32的马匹依次为 18,32,23,21,检查结果阳性39例,占总例数的41.5%,可疑5例,占总例数5.3%,其余50例为阴性,占总例数的53.2%。

3 预防措施

对诊断检查结果为阴性的新生骡驹,准许喂母马初乳,并进行常规出生护理。对阳性和可疑的44例骡驹禁止吃初乳,喂给代乳品7 d后再吃常乳,同时加强饲养管理,做到保温、通风、防止骡驹舔食马粪、胎衣、泥石等异物。加强兽医临床监护,及时注意骡驹的精神、食欲、粪尿、体温、呼吸等。结果除发生胃肠道感染和脓毒败血症死亡3例外,其余全部成活,存活率93.2%。

4 讨论与小结

4.1 新生骡驹溶血病,主要是骡驹吮食初乳中的抗体进入血液循环,与骡驹自身血液中的特异抗原结合,呈现出破坏红细胞的毒性作用而引起溶血,导致发病。据临床统计显示,该病多发生于2～3胎骡驹,且发病率随母马的生产次数的增加而上升。

4.2 初乳中抗体成分对骡驹的抗病力十分重要,分泌型免疫球蛋白有抗肠道感染的作用,所以在喂人工乳而尚未得到母马初乳抗体的免疫保护时,应注重骡驹肠道感染的防治。

4.3 应用平板凝集反应测定母马初乳和骡驹血液的抗体效价,根据抗体效价提示,采取相应措施,能有效预防新生骡驹溶血病的发生,本方法简便易行,可应用于基层兽医站。

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