60%唑醚◦代森联水分散粒剂中吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的残留分析＊

李瑞娟 于建垒 宋国春 马 惠

(1 山东省农业科学院植保所,济南,250100;2 山东省农业科学院棉花研究中心,济南,250100)

作为新型广谱杀菌剂,国外对吡唑醚菌酯在水果、蔬菜及粮食作物中的残留分析已有大量报道[1—6],Abdel-Baky等[2]的前处理方法主要是使用甲醇和水提取,C18柱及中性硅胶柱净化,高效液相色谱或液相色谱-质谱检测,这些方法操作较为复杂.国内尚未见有关吡唑醚菌酯残留测定的报道.

本研究建立了一种前处理更加简便的高效液相色谱检测葡萄和土壤中吡唑醚菌酯含量的方法,并对其在葡萄和土壤中的残留动态和最终残留进行了研究.

1 实验方法

1.1 小区试验

农药为60%唑醚◦代森联水分散粒剂(5%吡唑醚菌酯+55%代森联,巴斯夫欧洲公司),推荐使用为600mg(a.i.)◦kg-1,试验设空白对照区、低浓度试验区、高浓度试验区和消解动态试验区.

消解试验 分别于 2007年 5月 27日山东省济南市,2007年 5月 25日浙江省杭州市进行试验.采用一次施药多次采样的方法.在供试的葡萄园中,设 3个施药处理区和 1个不施药的对照区,小区面积10m2.葡萄长到成熟个体一半大小时,用1200 mg(a.i.)◦kg-1的唑醚◦代森联水分散粒剂对植株均匀喷雾,喷药后 2h、1、3、5、7、14、21、28、42d取样,经缩分后,-20℃保存,待测.

最终残留试验 分别于 2007年 5月 27日山东省济南市,2007年 5月 25日浙江省杭州市进行试验.60%唑醚◦代森联水分散粒剂600、900mg(a.i.)◦kg-1,分3、4次喷药,加空白对照,5个处理,3次重复,共 15个小区,小区面积 30m2.于葡萄膨大期开始喷药,每隔7d施药一次,共施药3—4次.对植株均匀喷雾.距最后一次施药7d、14d、21d各取样一次,经缩分后,-20℃保存,待测.

1.2 分析方法

称取切碎的葡萄(土)样品20g于250m l碘瓶中,加80ml二氯甲烷,超声提取15m in,将提取液经无水硫酸钠过滤,滤渣加 60ml二氯甲烷超声提取 2次,每次15min,合并滤液,用旋转蒸发器(30℃)减压浓缩至近干,吹干.过SPE C18柱,用乙腈∶水=70∶30(V/V)定容至10m l,HPLC分析.

高效液相色谱条件：LC-20AT液相色谱仪;检测器：SPD-20A紫外吸收检测器,n=278nm;柱温：室温;进样量：20μl;色谱柱：VP-ODSC18柱,250mm×4.6mm不锈钢柱;流动相：乙腈∶水= 70∶30(V/V);流速：0.8ml◦min-1.

2 结果与讨论

2.1 实验方法的精密度、准确度和相关性

以甲醇为溶剂,配制吡唑醚菌酯标准系列溶度,浓度分别为 0.01、0.02、0.1、0.2、1、2、5 μg◦m l-1,各进样20μl.测定结果显示,液相色谱峰面积Y与吡唑醚菌酯浓度X呈线性正相关(p＜0.001),其校准曲线方程为Y=5953.7X-9406.9,相关系数为0.9986.

在不含吡唑醚菌酯的葡萄及土壤中分别添加0.01、1和2mg◦kg-1的吡唑醚菌酯,每个加标量平行测定5次,计算加标回收率和变异系数(表1).表1显示,试样中的添加量为0.01—2mg◦kg-1,葡萄及土壤中的加标回收率分别为80.4%—94.1%和81.8%—98.4%,变异系数为1.8%—3.8%和2.6%—3.0%.表明本方法的准确性、再现性可以满足痕量吡唑醚菌酯检测的要求.

表1结果显示,当葡萄中吡唑醚菌酯添加量为0.01μg◦ml-1,加标回收率为83.5%,变异系数为3.8%,因此,吡唑醚菌酯在葡萄中的最低检测浓度为0.01mg◦kg-1.我国尚未规定吡唑醚菌酯在葡萄中最高残留限量(MRL值),食品法典委员会规定MRL值为2.0mg◦kg-1,本方法能满足要求.

表1 空白葡萄、土壤添加吡唑醚菌酯的回收率和精密度Table 1 Recoveries and precision of pyraclostrobin in blank samp les of grape and soil

吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的色谱图见图 1,目标峰与杂质峰很好地分离.在上述色谱条件下,当吡唑醚菌酯浓度低至0.01μg◦m l-1,信噪比﹥3,吡唑醚菌酯的最小检出量为2×10-10g.

图1 吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的色谱图Fig.1 Chromatogram of pyraclostrobin in grape and soil sample

2.2 60%唑醚◦代森联水分散性粒剂中吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的消解动态

吡唑醚菌酯在葡萄中的消解动态试验结果如表 2所示.由表 2可见,吡唑醚菌酯在葡萄中于 0—7d消解较快,随后逐渐趋缓.在葡萄中的消解率于 14d均达到了91.8%以上,其在葡萄中的消解动态方程分别为：C=0.1908e-0.1895t,r=-0.9975,t1/2=3.7d(山东省);C=0.1919e-0.1845t, r=-0.9940,t1/2=3.8d(浙江省).吡唑醚菌酯在土壤中于0—14d消解较快,随后逐渐趋缓.在土壤中的消解率于42d均达到了 92.2%以上,其在土壤中的消解动态方程分别为：C=0.7757e-0.0801t, r=-0.9715,t1/2=8.7d(山东省);C=0.1908e-0.1895t,r=-0.9872,t1/2=10.2d(浙江省).

表2 60%唑醚◦代森联水分散粒剂中吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的消解动态试验结果Tab le 2 Degradation dynam ics of pyraclostrobin in grape and soil

2.3 60%唑醚◦代森联水分散性粒剂中吡唑醚菌酯在葡萄中的最终残留量

在葡萄膨大期,60%唑醚◦代森联水分散粒剂按600mg(a.i.)◦kg-1和900mg(a.i.)◦kg-1兑水喷雾,施药次数最多4次,每次间隔 7d,最后一次施药后 7、14、21d采摘葡萄.试验结果见表3.

表3 60%唑醚◦代森联水分散粒剂中吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中最终残留试验Tab le 3 The final residues of pyraclostrobin in grape and soil

表 3可见,吡唑醚菌酯在葡萄和土壤中的最终残留量,随不同剂量、不同施药次数和距收期而异.吡唑醚菌酯在土壤中的残留量为0.0206—0.6935mg◦kg-1(山东省)和0.0142—0.7245 mg◦kg-1(浙江省).低剂量处理中 3次药后吡唑醚菌酯在葡萄中的残留量均未检出;4次药后 7d残留量吡唑醚菌酯为0.0168—0.0241mg◦kg-1,药后14d、21d未检出.高剂量处理中3次药后7d、14d吡唑醚菌酯在葡萄中残留量为0.0142—0.1165mg◦kg-1,药后21d未检出;4次药后7d、14d、21d吡唑醚菌酯残留量为0.0213—0.1886mg◦kg-1.对照区均未检出.检出样品的残留量均低于MRL值.

3 结论

固相萃取-反相高效液相色谱检测葡萄和土壤中吡唑醚菌酯的残留,其最小检出量为 2×10-10g,最低检测浓度为0.01mg◦kg-1,在0.01—5μg◦ml-1呈很好的线性关系.60%唑醚◦代森联水分散粒剂900mg(a.i.)◦kg-1,吡唑醚菌酯在葡萄上的半衰期为3.7—3.8d,属于易降解农药.喷药后7d、14d、21d,葡萄中吡唑醚菌酯残留量为0.0168—0.1886 mg◦kg-1,均未超过2.0mg◦kg-1.

[1] Abdel-Baky S,Analysis of BAS 500F Residue in Coffee and Soybeans after Treatment with BAS51200F in Brazil.2001.BASF 2001/ 5002345

[2] Abdel-Baky S,Analysisof BAS 500F in Plant Matrices in Brazil.BASF2000/5276

[3] Beck J,Study on the Residue Behaviour of BAS 500F and BAS 510F in Lettuce after Treatmentwith BAS 516GA F under Field Conditions in Germany;France;the Netherlands and Spain.2001,2000 BASF 2001/1000999

[4] FAO,Pesticide Residues in Food-Report 2004,2004.FAO Plant Protection and Production Paper FAO,178

[5] FAO,Pesticide Residue in Food,Evalutions 2004,2005.Plant Production and Protection Paper,1007—1118

[6] Schulz H,Determination of the Residuesof BAS 500Fand BAS 510F in Apples Following Treatmentwith BAS 51601Funder Field Conditions in Italy and France.2001,BASF 2001/1000946