血脂平冲剂对HLP大鼠补体调节蛋白CD55、CD59表达的影响*

刘锋 张红 齐斌武 许爱英

（1陕西中医学院2008级硕士研究生 咸阳712046；2陕西中医学院 咸阳712046）

心脑血管病是现代社会对人类健康危害较大的疾病之一，尤其是冠心病（CHD）居所有疾病的死亡率之首。而CHD则由动脉粥样硬化(AS)引起为最常见。大规模、多中心的临床流行病学及实验研究证实，高脂血症（HLP）是AS的首要危险因素，参与了AS的发生、发展及病变恶化的全过程[1]，与CHD、脑血管疾病（CVD）的发病率有直接关系。所以，HLP治疗成为解决此类病变的研究重点，颇受医学界关注，已日益引起广大学者的高度重视。血脂平冲剂[2]由蒲黄、泽泻、山楂、何首乌、白术、决明子等中药组成，经多年的临床观察有较好的降脂效果，该方具有化痰祛瘀、健脾益肾的功效。本文旨在通过对血脂平冲剂作用机理的探讨，为心脑血管病预防与治疗的新药开发应用提供科学的理论依据。

1 实验材料

1.1 试剂 总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）测定试剂盒由南京建成生物制品研究所提供；单克隆抗体CD55-PE、CD59-FITC试剂盒由美国caltag公司提供。

1.2 药物 辛伐他汀片，浙江海正药业股份有限公司生产；血脂平冲剂，陕西中医学院门诊部提供。

1.3 实验动物 昆明种雄性SD大鼠60只,体重180～220g,西安交通大学医学院实验动物中心提供。1.4 仪器与设备 流式细胞仪（型号：C3K、3KVA），全自动生化分析仪，台式高速离心机等。

2 实验方法

2.1 实验分组 随机分为六组，每组10只：A组（空白对照组）、B组（高脂病理模型组）、C组（辛伐他汀组）、D组（血脂平冲剂大剂量组）、E组（血脂平冲剂中剂量组）、F组（血脂平冲剂小剂量组）。

2.2 饲料配方 普通饲料：由西安交通大学医学院实验动物中心提供。脂肪乳剂：参考高脂饲料配方[3]，并略加改进：胆固醇2%、猪油10%、丙基硫氧嘧啶0.2%、吐温80.2%，加防腐剂、水制成乳剂。

2.3 模型建立及给药 60只SD大鼠普通饲料于20～24℃、湿度40%～60%动物留观室内适应喂养7d。实验开始继续普通饲料喂养，除A组大鼠灌胃等体积的生理盐水外，其余五组灌胃脂肪乳剂5mL/kg。造模4周后，除A、B组给予等体积生理盐水灌胃外，其余各组每天上午灌胃给药，C组给予辛伐他汀灌胃，D、E、F组分别给予血脂平冲剂大、中、小剂量灌胃，剂量分别为C组0.625g/kg，D组10mL/kg，E 组 4mL/kg，F 组 2mL/kg，灌胃 6 周后停药，用戊巴比妥钠麻醉，腹主动脉、静脉采血。

2.4 检测方法 用酶法检测血清中 TC、TG、HDL-C、LDL-C；用流式细胞仪测白细胞 CD55、CD59的表达，即以荧光标记细胞平均强度（MFI）来反映CD分子的表达。

2.5 统计学处理 实验数据用SPSS12.0软件包进行统计学处理，统计结果用均数±标准差 (±S)表示，并用t检验比较组间差异性。

3 结果与分析

3.1 血脂平冲剂对HLP大鼠血脂水平的影响 从表1可以看出，高脂病理模型组大鼠TC、TG和LDL-C含量较空白对照组均显著升高（P＜0.05或P＜0.01），HDL-C 略有降低（P ＜0.05），表明本次实验造模成功。实验结果表明，血脂平冲剂具有显著的调脂效果，并且大剂量组效果最好。

表1 血脂平冲剂对HLP大鼠血脂水平的影响 (±S)mmol/L

表1 血脂平冲剂对HLP大鼠血脂水平的影响 (±S)mmol/L

注：与空白组比较，▲P ＜0.01，▲▲P ＜0.05；与模型组比较，△P ＜0.01，△△P ＜0.05。

组别 n 剂量 TC TG HDL-C LDL-C A 10 — 1.81±0.29 0.39±0.08 0.52±0.09 0.83±0.09 B 10 — 2.21±0.25▲ 0.70±0.18▲ 0.39±0.08▲▲ 0.98±0.05▲▲C 10 0.625g/kg 1.82±0.29△△ 0.48±0.09△△ 0.51±0.08△△ 0.85±0.10△△D 10 10mL/kg 1.83±0.29△△ 0.42±0.09△ 0.53±0.05△ 0.79±0.14△E 10 4mL/kg 1.88±0.26△△ 0.49±0.09△△ 0.52±0.08△△ 0.85±0.12△△F 10 2mL/kg 2.15±0.28 0.51±0.10△△ 0.41±0.08 0.96±0.04

3.2 血脂平冲剂对HLP大鼠CD55、CD59表达的影响 从表2可见，与高脂病理模型组相比，血脂平冲剂能使HLP大鼠白细胞CD55、CD59的表达明显上调，且呈现出明显的量效正相关关系。

表2 血脂平冲剂对HLP大鼠CD55、CD59的影响 (±S)

表2 血脂平冲剂对HLP大鼠CD55、CD59的影响 (±S)

注：与空白组比较，▲P ＜0.01；与模型组比较，△P ＜0.01，△△P ＜0.05。

A B C D E F CD55 2.40±0.25 1.81±0.12▲ 2.47±0.39△ 2.34±0.20△ 2.20±0.15△ 1.88±0.14 CD59 2.39±0.21 2.00±0.09▲ 2.78±0.19△ 2.76±0.12△ 2.69±0.39△ 2.17±0.14△△

4 讨论

补体是机体免疫系统的重要组成部分，补体系统的过度激活则会直接或间接地导致机体自身正常组织的损伤。补体调节蛋白是调节补体功能的补体抑制因子，能够抑制补体的过度激活，保护宿主细胞免受补体介导的免疫损伤[4]。TC、TG增高是HLP的显著标志，以往治疗该病均以调节TC、TG为主。随着分子免疫学的发展，大量研究证实HLP中补体参与非常活跃，补体激活在AS的发生发展中起重要作用[5]，实验报道也证实补体活化可促进AS的进展和不稳定斑块的形成[6]。国内研究发现，HLP患者血清C3、C4升高并与血脂水平相关，表明高脂血症患者存在补体生成升高，提示补体系统功能活跃，这与国外研究结果相一致[7]。唐氏等[8]认为补体C3参与肾脏疾病患儿血脂代谢的调节。补体调节蛋白可抑制补体的活性，尤其是CD55、CD59。CD55又称衰变加速因子（DAF），具有促进C3、C4转化酶衰变的活性，可阻止补体C3、C4转化酶的形成，并且可使已形成的C3、C4转化酶失去其稳定性，避免补体对自身组织细胞的溶解、破裂[9]；CD59又称保护素，可阻碍补体C7、C8与相应受体的结合,抑制膜攻击复合体（MAC）的形成，使自身正常组织细胞免受补体损伤[10，11]。

本研究结果显示病理模型组CD55、CD59平均荧光强度明显降低，随着CD55、CD59表达的上调，血脂含量明显下降，表明血脂水平与补体调节蛋白CD55、CD59具有相关性，并且具有显著的量效关系。血脂平冲剂降脂、调脂作用可能是通过促进CD55、CD59高表达实现的，其详细机理还需要更为深入的基础研究。HLP患者CD55表达下调，降低了机体对补体活化的抑制作用，有利于AS的形成[12]。而血脂平冲剂可促进CD55、CD59的表达上调，则说明血脂平冲剂可抑制补体的活性，可直接干预AS的发生。

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