骆驼刺地上部分化学成分的分离与鉴定△

张贵杰,李宁，熊元君，波拉提·马卡比力，王金辉*，李铣，贾晓光

(1.沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳 110016；2.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，新疆 乌鲁木齐 830002)

化学成分

新疆维吾尔自治区科技厅国际合作项目——骆驼刺(含骆驼刺糖)化学成分及药理活性基础研究(200741120)；新疆维吾尔自治区科研院所改革与发展专项资助项目(200808)

*王金辉，E-mail：wangjh1972@vip.sina.com

骆驼刺地上部分化学成分的分离与鉴定△

张贵杰1,李宁1，熊元君2，波拉提·马卡比力2，王金辉1*，李铣1，贾晓光2

(1.沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳110016；2.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，新疆 乌鲁木齐830002)

目的研究骆驼刺的化学成分，为进一步阐明其活性成分和开发利用提供科学依据。方法采用反复硅胶、Sephadex LH-20、ODS等柱色谱法进行分离纯化，并通过理化常数测定和波谱数据分析鉴定其化学结构。结果从骆驼刺中分离鉴定了12个化合物，即异鼠李素(isorhamnetin,1)，异鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside,2)，异鼠李素3-O-β-D-芸香糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside,3)，山柰酚(kaempferol,4)，槲皮素(quercetin,5)，芦丁(rutin,6)，芒柄花苷(ononin,7)，二十六烷醇(1-hexacosanol,8)，二十七烷醇(1-heptacosanol,9)，二十八烷醇 (octacosanol,10)，三十烷醇(1-triacontanol,11)，三十烷酸甲酯(triacontanoic acid, methyl ester,12)。结论化合物4、7～12为首次从该属植物中分离得到，化合物2、5、6为首次从该植物中分离得到。

骆驼刺；化学成分；结构鉴定

骆驼刺Alhagipseudalhagi(M.B.) Desv.为豆科骆驼刺属植物，主产于新疆，民间用于治疗风湿和癌症[1]。骆驼刺全草治疗感冒发烧，胃腹湿热，肠炎；叶用于治疗关节肿痛；花用于清热解毒；种子用于止热痢和牙痛[2]。该植物枝叶能分泌糖类物质而凝结其上，干燥后经敲打而脱落，收集即所谓“刺糖”为维吾尔族民族药，治疗神经头痛[3]。为了进一步阐明其药效物质基础，我们对骆驼刺的化学成分进行了研究。从其70%乙醇提取物中分离得到了12个化合物，根据其理化性质和波谱数据并参考文献，鉴定其分别为：异鼠李素(isorhamnetin,1)，异鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside,2)，异鼠李素3-O-β-D-芸香糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside,3)，山柰酚(kaempferol,4)，槲皮素(quercetin,5)，芦丁(rutin,6)，芒柄花苷(ononin,7)，二十六烷醇(1-hexacosanol,8)，二十七烷醇(1-heptacosanol,9)，二十八烷醇(octacosanol,10)，三十烷醇(1-triacontanol,11)，三十烷酸甲酯(triacontanoic acid methyl ester,12)。化合物4、7～12为首次从该属植物中分离得到，化合物2、5、6为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

1.1仪器

核磁共振波谱用BrukerARX-300，BrukerAV-600型核磁共振仪测定(TMS内标，瑞士Bruker公司)，GC-MS为Agilent6890N/5973气质联用仪(美国Agilent科技)，熔点用YanacoMP-S3显微熔点测定仪(未校正,日本Yanaco公司)测定。

1.2材料

薄层色谱及制备薄层色谱用硅胶GF254(40～10μm)、柱色谱用硅胶(71～51μm)(青岛海洋化工厂)，葡聚糖凝胶SephadexLH-20(瑞典Pharmacia)；ODS填料(天津市化学试剂工厂色谱技术开发公司)；所用试剂均为分析纯。骆驼刺采自新疆维吾尔自治区(2007年9月)，由新疆民族药物研究所贾晓光教授鉴定为Alhagipseudalhagi(M.B.)。

2 提取与分离

干燥骆驼刺地上部分10kg，用体积分数为70%的乙醇溶液加热回流提取2次，合并提取液，回收溶剂至5000mL，取其中4500mL依次以石油醚(60～90℃)、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取，得三氯甲烷萃取物(35.0g)，醋酸乙酯萃取物(20.0g)和正丁醇萃取物(170.0g)，以石油醚-丙酮，三氯甲烷-甲醇等溶剂系统进行梯度洗脱。将所得流分进行反复硅胶、ODS柱色谱，结合SephadexLH-20柱色谱法以及重结晶等手段得到了化合物1(100mg)、2(8.4mg)、3(10.0mg)、4(13.5mg)、5(22.5mg)、6(14.1mg)、7(16.1mg)、8～12(30.5mg)。

3 结构鉴定

3.1化合物1

黄色粉末(三氯甲烷)，mp.305～307℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性。盐酸镁粉反应阳性，显示为一黄酮类化合物。1H-NMR中给出5个芳香质子信号组成一组AX系统[δ6.19(1H，d，J=1.8Hz，H-6)和6.47(1H，d，J=1.8Hz，H-8)]和一组ABX系统[δ7.74(1H，d，J=2.1Hz，H-2′)，7.69(1H，dd，J=8.4，1.5Hz，H-6′)，6.92(1H，d，J=8.4Hz，H-5′)]；1H-NMR中还给出了5-OH的特征信号δ12.46(1H，s)。13C-NMR 中给出了16个碳信号，分别为δ147.3(C-2)，135.8(C-3)，175.9(C-4)，160.7(C-5)，98.2(C-6)，164.1(C-7)，93.6(C-8)，156.2(C-9)，102.0(C-10)，122.0(C-1′)，115.5(C-2′)，148.8(C-3′)，146.6(C-4′)，111.7(C-5′)，121.7(C-6′)和55.7(C-3′-OCH3)。其NMR数据与文献[1]对照，鉴定该化合物为异鼠李素(isorhamnetin)。

3.2化合物2

黄色粉末(甲醇)，mp.167～170℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性。盐酸镁粉反应阳性，显示为一黄酮类化合物。Molish反应阳性，示为黄酮苷。2%硫酸水解检出葡萄糖。1H-NMR中给出5个芳香质子信号组成一组AX系统[δ6.21(1H，d，J=1.8Hz，H-6)和6.46(1H，d，J=1.8Hz，H-8)]和一组ABX系统[δ7.94(1H，d，J=1.8Hz，H-2′)，7.50(1H，dd，J=8.4，1.8Hz，H-6′)，6.92(1H，d，J=8.4Hz，H-5′)]；1H-NMR 中还给出了5-OH的特征信号δ12.60(1H，s)；另外还给出了糖的端基质子信号δ5.57(1H，d，J=8.8Hz，H-1″)，根据偶合常数确定存在一β型的苷键；同时给出了一甲氧基质子的信号δ3.85(1H，s，3′-OCH3)。13C-NMR中给出了黄酮母核的15个碳信号，分别为δ156.3(C-2)，133.5(C-3)，177.5(C-4)，161.3(C-5)，98.8(C-6)，164.3(C-7)，93.8(C-8)，156.4(C-9)，104.1(C-10)，121.2(C-1′)，115.3(C-2′)，149.5(C-3′)，146.9(C-4′)，114.6(C-5′)和122.1(C-6′)；糖区给出了糖的端基碳信号δ100.9(C-1″)；另外高场区给出了一甲氧基的碳信号δ55.8(3′-OCH3)。碳谱与化合物1相比，C-2向低场位移了9.0个化学位移单位，而C-3向高场移动了2.3个化学位移单位。其NMR数据与文献[4]比较，鉴定该化合物为异鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside)，见表1。化合物2为首次从该植物中分离得到。

3.3化合物3

黄色粉末(甲醇)，mp.178～180℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性。盐酸镁粉反应阳性，显示为一黄酮类化合物。Molish反应阳性，示为黄酮苷。2%硫酸水解检出葡萄糖和鼠李糖。1H-NMR中给出5个芳香质子信号组成一组AX系统[δ6.20(1H，d，J=2.0Hz，H-6)和6.46(1H，d，J=2.0Hz，H-8)]和一组ABX系统[δ7.85(1H，d，J=2.0Hz，H-2′)，7.50(1H，dd，J=8.0，2.0Hz，H-6′)，6.92(1H，d，J=8.0Hz，H-5′)]；1H-NMR中还给出了5-OH的特征信号δ12.58(1H，s)；另外还给出了两个糖的端基质子信号δ5.54(1H，d，J=8.8Hz，H-1″)和4.42(1H，d，J=2.0Hz，H-1″′)以及鼠李糖特征甲基质子信号δ0.96(3H，d，J=6.5Hz)；同时给出了一甲氧基质子的信号δ3.85(1H，s，3′-OCH3)。13C-NMR中给出了黄酮母核的15个碳信号分别为δ156.4(C-2)，133.0(C-3)，177.3(C-4)，161.2(C-5)，98.8(C-6)，164.2(C-7)，93.8(C-8)，156.5(C-9)，104.0(C-10)，121.2(C-1′)，115.3(C-2′)，149.4(C-3′)，146.9(C-4′)，113.3(C-5′)和122.3(C-6′)；糖区给出了两个糖的端基碳信号δ101.2(C-1″)和100.9(C-1″′)；另外在高场区给出了一甲氧基的碳信号δ55.7(3′-OCH3)，且给出了鼠李糖甲基碳信号δ17.7。与化合物2相比，C-6″向低场位移了6.0个化学位移单位，提示C-6″位连接鼠李糖。其NMR数据与文献[1]对照，鉴定该化合物为异鼠李素3-O-β-D-芸香糖苷(isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside)，见表1。

3.4化合物4

黄色粉末(甲醇)，mp.276～278℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性。盐酸镁粉反应阳性，显示为一黄酮类化合物。1H-NMR中给出6个芳香质子信号组成一组AX系统[δ6.14(1H，br.s，H-6)和6.39(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)]和一组AA′BB′系统[δ8.03(2H，d，J=8.1Hz，H-2′，6′)，6.92(2H，d，J=8.1Hz，H-3′，5′)]。13C-NMR 中给出了黄酮母核的15个碳信号分别为δ146.4(C-2)，135.9(C-3)，175.8(C-4)，160.6(C-5)，98.7(C-6)，165.6(C-7)，93.7(C-8)，156.3(C-9)，102.4(C-10)，121.2(C-1′)，129.3(C-2′，6′)，115.5(C-3′，5′)，159.3(C-4′)。其NMR数据和理化性质与文献[5]对照，鉴定该化合物为山柰酚(kaempferol)。化合物4为首次从该属植物中分离得到。

表1 化合物1～3的1H-NMR和13C-NMR的波谱数据(in DMSO-d6)

3.5化合物5

黄色粉末(甲醇)，mp.>300℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性。盐酸镁粉反应阳性，显示为一黄酮类化合物。1H-NMR中给出5个芳香质子信号组成一组AX系统[δ6.19(1H，d，J=1.9Hz，H-6)和6.41(1H，d，J=1.9Hz，H-8)]和一组ABX系统[δ7.68(1H，d，J=2.1Hz，H-2′)，7.55(1H，dd，J=8.4，2.1Hz，H-6′)，6.88(1H，d，J=8.4Hz，H-5′)]；1H-NMR 中还给出了活泼氢的质子信号δ12.50(1H，s，5-OH)，10.75(1H，s，7-OH)，9.34(2H，s，3，3′-OH)，9.70(1H，s，4′-OH)。其NMR数据和理化性质与文献[6]比较一致，鉴定该化合物为槲皮素(quercetin)。化合物5为首次从该植物中分离得到。

3.6化合物6

黄色粉末(甲醇)，mp.178～181℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性，盐酸镁粉反应阳性，显示为一黄酮类化合物。Molish反应阳性，示为黄酮苷。1H-NMR中给出5个烯氢信号组成一组AX系统[δ6.20(1H，d，J=1.8Hz，H-6)和6.39(1H，d，J=1.8Hz，H-8)]和一组ABX系统[δ7.59(1H，d，J=1.8Hz，H-2′)，7.50(1H，m，H-6′)，6.85(1H，d，J=7.8Hz，H-5′)]；1H-NMR 中还给出了活泼氢的质子信号δ12.60(1H，s，5-OH)，10.83(1H，s，7-OH)，9.19(1H，s，3′-OH)，9.66(1H，s，4′-OH)；另外还给出了两个糖的端基质子信号δ5.35(1H，d，J=7.2Hz，H-1″)和4.42(1H，s，H-1′′′)以及鼠李糖特征甲基质子信号δ1.00(3H，d，J=6.5Hz)；13C-NMR 中给出了黄酮母核的15个碳信号，分别为δ156.6(C-2)，133.4(C-3)，177.5(C-4)，161.3(C-5)，98.8(C-6)，164.2(C-7)，93.7(C-8)，156.7(C-9)，104.1(C-10)，121.3(C-1′)，115.3(C-2′)，144.8(C-3′)，148.5(C-4′)，116.4(C-5′)和121.7(C-6′)；糖区给出了两个糖的端基碳信号δ101.3(C-1″)和100.8(C-1′′′)，且在高场区给出了鼠李糖甲基碳信号δ17.8。其NMR数据和理化性质与文献[5]比较，鉴定该化合物为芦丁(rutin)。化合物6为首次从该植物中分离得到。

3.7化合物7

白色粉末(甲醇)，mp.213～216℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在。1H-NMR中给出异黄酮的特征信号δ8.44(1H，s，H-2)；还给出了7个烯氢质子信号：质子δ7.54(2H，d，J=8.7Hz，H-2′，6′)和6.99(2H，d，J=8.7Hz，H-3′，5′)组成了AA′BB′偶合系统；δ8.06(1H，d，J=9.0Hz，H-5)，7.15(1H，dd，J=9.0，2.4Hz，H-6)和7.24(1H，d，J=2.4Hz，H-8)组成了ABX偶合系统；氢谱高场区给出了一个甲氧基的质子信号δ3.77(3H，s，4′-OCH3)。另外还给出了一个糖的端基质子信号δ5.10(1H，d，J=7.2Hz)。13C-NMR给出了黄酮母核的15个碳信号δ153.7(C-2)，123.4(C-3)，174.7(C-4)，127.0(C-5)，115.7(C-6)，161.5(C-7)，103.5(C-8)，157.1(C-9)，118.5(C-10)，124.0(C-1′)，130.1(C-2′,6′)，113.7(C-3′,5′)，159.4(C-4′)；糖区给出了糖的端基碳信号δ100.1(C-1″)，另外给出了一甲氧基的碳信号δ55.2(4′-OCH3)。与化合物10相比，C-7向高场位移了1.7个化学位移单位。其NMR数据与文献[7]比较，鉴定该化合物为芒柄花苷(ononin)。化合物7为首次从该属植物中分离得到。

3.8化合物8～12

[1] 杨秀伟，蒋玉梅，李君山，等.骆驼刺中一个新的黄酮醇葡萄糖苷类化合物[J].中草药，1996，27(12)：707-711.

[2] 李君山，刘勇民，蔡少青.维吾尔医用骆驼刺类药材的资源、商品流通及民间应用研究[J].中国民族医药杂志，1996，2(2)：39-40.

[3] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第四十二卷第二分册)[M].北京：科学出版社，2004：163-164.

[4] 谢韬，刘净，梁敬钰,等. 滨蒿炔类和黄酮类成分研究Ⅱ[J].中国天然药物，2005，3(2)：86-89.

[5] 梁侨丽，丁林生. 枳椇叶化学成分研究(Ⅰ)[J].中草药，1996，27(10)：581-583.

[6] 左文健.杜香的化学成分研究[D].沈阳：沈阳药科大学硕士论文，2006.

[7] 马强，雷海民，周玉新,等.红车轴草化学成分的研究[J].中国药学杂志，2005，40(14)：1057-1059.

IsolationandIdentificationofChemicalConstituentsofAerialPartsofAlhagipseudalhagi(M.B.)

Zhang Guijie1, Li Ning1, Xiong Yuanjun2, Bolat Makhabel2, Wang Jinhui1, Li Xian1, Jia Xiaoguang2

(1.SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,ShenyangLiaoning110016,China;2.XinjiangInstituteofChineseMateriaMedicaandEthnodrug,UrumqiXinjiang830002,China)

Objective: To study the chemical constituents of aerial parts ofAlhagipseudalhagi(M.B.) Desv..MethodsThe compounds were isolated by chromatography on silica gel, Sephadex LH-20columns, ODS columns and the recrystallization methods. Chemical properties and NMR data were employed for the structural identification.ResultsTwelve compounds were isolated, their structures were identified as isorhamnetin (1)， isorhamnetin3-O-β-D-glucopyranoside (2)，isorhamnetin3-O-β-D-rutinoside (3)，kaempferol (4)，quercetin (5)， rutin (6)， ononin (7)，1-hexacosanol (8)，1-heptacosanol (9)， octacosanol (10)，1-triacontanol (11)，and triacontanoic acid methyl ester (12).ConclusionCompounds4,7～12were obtained from theAlhagigenus for the first time and2,5,6were isolated fromA.pseudalhagi(M.B.) for the first time.

Alhagipseudalhagi(M.B.) Desv.； Chemical constituents； Isolation and identification

2010-03-08)