肝达康颗粒提取工艺的研究

柳成刚，王晓丽

(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

肝达康颗粒由柴胡、白芍、枳实、黄芪、生牡蛎、雄胆粉、甘草7位中药组成，具有疏肝益气，解毒散结之功效。原方为汤剂，为方便临床应用，保证制剂的质量和疗效的稳定性，拟将其制成颗粒剂。本研究以芍药苷、浸膏得率为考察指标，采用正交设计实验，对白芍、黄芪、生牡蛎、甘草四味药材及柴胡、枳实提油后残渣的提取工艺条件进行优化。

1 仪器与试药

Agilent1100高效液相色谱仪;十万分之一分析天平;芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所);甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为重蒸馏水;所用药材均购于世一堂中药饮片有限公司(经检验，均符合2010版《中华人民共和国药典》标准［1］)。

2 实验方法

2．1 芍药苷含量测定［2－3］

2．1．1 色谱条件 色谱柱:Kromasil C18柱(4.6mm×250mm，5μm);流动相:水 －甲醇 －冰醋酸(65∶35∶0.5);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;检测波长:230nm。

在上述色谱条件下，芍药苷和样品中其他组分可

基金项目:黑龙江省中医药管理局项目(ZHY10－Z47);黑龙江中医药大学科研基金资助(200909)

作者简介:柳成刚(1977－)，男，博士，讲师，主要研究方向:六经辨证在肝胆疾病中的临床应用。

收稿日期:2010－12－08

修回日期:2011－01－20

达到基线分离，芍药苷与其相邻色谱峰的分离度大于1.5，且阴性对照液无干扰，按芍药苷峰计算，理论塔板数不少于2 000。

2．1．2 对照品溶液的制备 精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥至恒重的芍药苷对照品5.10mg，以甲醇定容至50mL量瓶中，制成0.102mg/mL的溶液作为对照品溶液，过0.45um微孔滤膜，取续滤液，即得。

2．1．3 样品含量测定 精密称取浸膏干粉约1g，精密称定，置50mL容量瓶中，加甲醇适量，超声处理30min，取出，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2．2 浸膏收得率测定 精密吸取9份样品的供试液20mL，蒸干至恒重，精密称重，分别计算其浸膏收得率。

2．3 正交试验设计

采用正交试验法，以浸膏得率、芍药苷含量为评价指标;选择加水倍量、煎煮时间、煎煮次数为考察因素，采用L9(34)正交试验设计进行试验。因素水平安排见表1。

表1 正交试验因素水平表

表2 正交试验结果表

按肝达康中各药材的比例，称取总量为50g处方共9份，其中柴胡、枳实先用挥发油提取器提取4h，得挥发油，另器保存。残渣再加入其它(除雄胆粉外)药材，合并浸泡1h，按正交试验表方案进行煎煮，滤过，再浓缩，减压干燥，干膏称重，得干浸膏重量，研细过60目筛，得浸膏粉共9份。分别测定浸膏中的含水量和芍药苷的含量，并计算浸膏得率和芍药苷提取量。权重系数分别为0.4、0.6，进行综合评价。结果见表2，方差分析见表3。

表3 提取工艺方差分析表

2．4 工艺条件的确定 从方差分析结果可知，加水量、提取时间对提取效果具有显著性影响，而提取次数对结果的影响并不显著。因此，从节约能源的角度考虑，提取次数定为2次，则A2B2C1为最佳组合，即10倍量水提取2次，每次1小时最好。

2．5 验证试验

按最佳工艺A2B2C1进行重复试验3次，验证结果见表4。结果表明，RSD小于2%，重复性好。

表4 验证试验结果

3 讨论

3．1 根据上述试验，肝达康颗粒剂的最佳提取方案可确定为加药材量的10倍量水，煎煮2次，每次煎煮1h。此外，还考虑了生产条件，尽可能做到省时节能，且通过验证试验证明，文中选定的最佳工艺条件具有较高的提取效率。

3．2 颗粒以其生产自动化、生产条件恒定、人为因素影响小等优势，广泛应用于临床［4］。肝达康颗粒是白芍等药材经水提、浓缩、干燥、制粒等工序制成的颗粒。笔者优化其提取工艺，并以高效液相色谱(HPLC)法对配方中芍药苷的含量进行测定，方法简便可行，重现性好，可以作为控制产品质量的方法。

［1］国家药典委员会编．中华人民共和国药典［S］．北京:化学工业出版社，2010:96．

［2］王晟，张丽艳，吴涛．HPLC法测定胃宝颗粒中芍药苷的含量［J］．中医药学报，2010，38(2):113 －114．

［3］周洪伟，许文博，王玉蓉，等．赤芍总苷提取与大孔树脂纯化工艺研究［J］．中医药学报，2011，39(1):48 －51．

［4］姚焕英，赵宁侠，史恒军，等．配方颗粒剂临床利弊点滴谈［J］．现代中医药，2006，26(1):61．