前摄宁颗粒对大鼠慢性前列腺炎的治疗作用

何 颖， 沈先荣， 蒋定文， 陈 伟

(海军医学研究所，上海200433)

慢性前列腺炎(chronic prostatitis，CP)是男性泌尿生殖系统最为常见的疾病之一，发病率高，多发于20～40岁成年男性。由于CP病因复杂，发病机制尚未完全明了，目前临床治疗还比较困难。西医治疗主要有抗生素的应用、α受体阻滞剂的应用和非甾体类抗炎药等的应用，但疗效欠佳。而中药治疗有其独特的优势。CP属于中医“淋浊”范畴，症状复杂、病程迁延，容易反复发作。病位在下焦，多责之湿热、瘀血、肾虚，病性多为本虚标实。国内学者报道了605例慢性前列腺炎中医辨证分型的统计结果，发现605例中湿热型109例，气滞血瘀型132例，肾虚型29例，混合型335例，所占比例分别为18.02%、21.85%、4.8% 和 55.46%［1］。因此有学者认为湿热下注、痰瘀胶结、虚实错杂是CP的主要病理机制特点。我们根据上海中医文献馆老中医周家衡教授多年的临床经验方研制了前摄宁颗粒，并对其治疗大肠杆菌引起的细菌性前列腺炎和角叉菜胶引起的急性前列腺肿大(以水肿为主)进行了报道［2］。为了进一步探讨前摄宁颗粒对慢性前列腺炎的治疗效果，我们开展了前摄宁颗粒对消痔灵致大鼠慢性前列腺炎的疗效研究。

1 材料和方法

1.1 药物 前摄宁颗粒，由上海澳博海洋生物技术有限公司提供，含生药5.0 g/g，棕黄色颗粒，由黄芩、黄柏、牡丹皮和丹参等组成，功能:扶正固本，滋阴益肾，清热解毒，利湿通淋、祛瘀止痛，主治慢性前列腺炎。前摄宁颗粒60 g加水配成100 mL混悬液，含前摄宁颗粒0.6 g/mL，作为大鼠大剂量组用药，中、小剂量组再对半稀释，按10 mL/kg体质量灌胃给药，剂量分别为6、3和1.5 g前摄宁颗粒/kg(30、15和7.5 g生药/kg);小鼠用药则配成含前摄宁颗粒0.4 g/mL，按0.2 mL/10 g灌胃给药，大、中、小剂量组分别为8、4和2 g前摄宁颗粒/kg(40、20和10 g生药/kg)。

前列通片，广州中一药业有限公司生产，批号F00047，主要由蒲公英、黄柏、车前子、两头尖和泽兰等组成，功能:清热解毒、清利湿浊，理气活血、消炎止痛等，主治急、慢性前列腺炎。每片重约0.5 g，推荐每次6片，每天3次(共9 g)。实验时取40片，碾钵内碾细后用0.5%CMC-Na溶液配成100 mL的混悬液，相当于0.2 g/mL，大鼠按10 mL/kg灌胃给药，剂量为2.0 g/kg。

消痔灵注射液，北京万辉药业集团第四制药厂生产，批号011006，临用时用生理盐水配制成25%的溶液。乙酸，分析纯，杭州化学试剂有限公司出品。二甲苯，分析纯，杭州化学试剂厂生产。

1.2 动物 SD大鼠，清洁级，雄性;ICR小鼠，清洁级，雌雄兼用，均由浙江省实验动物中心提供，合格证号:浙医动字第2001001号。

1.3 仪器 Motic显微数码摄影处理系统(含图像分析软件)，电子分析天平，组织切片机等。

1.4 前列腺液白细胞计数 参照文献方法［3］，取前列腺按摩液10 μL至200 μL 1%醋酸溶液中，滴管吹打均匀后充于细胞计数板中，镜下计数四角上的4个大方格内的白细胞数，乘以50即为每1 μL前列腺液内的白细胞总数。

1.5 前列腺液卵磷脂小体密度分析 参照文献方法［4］，取前列腺按摩液涂片，压上盖玻片，镜下观察卵磷脂小体分布密度，根据数量多少分4、3、2和1分，进行半定量分析。

1.6 前列腺组织形态学分析 参照文献方法［5］，前列腺组织甲醛固定后，行常规石蜡切片，HE染色，在10倍物镜下，每个标本随机选3个视野(每视野面积4 mm2)，在Motic图象处理分析系统中，描出每个腺管(上皮外周)外周轮廓，系统自动产生该腺管的面积和周长，将数据导出到EXCEL进行处理。位于视野周边的不完整的腺管不论大小均作为0.5个腺管计，计算视野内腺管数。根据腺管面积、腺管周长、腺管数3个原始数据(每个样品3个视野的平均值)，按下列公式计算其它指标:

间质面积=视野总面积-腺管面积(mm2)

间质面积比例=间质面积/视野总面积×100(%)

每个腺管平均面积=腺管面积/腺管数(mm2)

等效直径=2√每个腺管平均面积/π(μm)

每视野腺管总周长注1=腺管总周长注2-等效直径×(不完整腺管数)(μm)

每视野腺管平均周长=每视野腺管总周长/总腺管数(μm)

注1:对视野周围不完整腺管中重复计算部分进行校正

注2:指计算机直接读出的每视野内所有腺管周长总和

1.7 统计方法 所有计量数据采用学生t检验，计数数据采用 χ2检验，与正常对照组比较，#P＜0.05，##P ＜0.01;和模型组比较，*P ＜0.05，**P ＜0.01。

1.8 试验方法［6］雄性SD大鼠60只，体重180～200 g，将动物随机分成6组，即模型组、前摄宁大剂量组、中剂量组，小剂量组、阳性药对照组(前列通片)和假手术组，每组10只。饲养1 d后造模:100 mg/kg异戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，打开腹腔，提出膀胱及两侧精囊，暴露附于精囊的前列腺侧叶，每侧分别注入25%消痔灵溶液100 μL，假手术组注入相同量的生理盐水，复位、腹腔内滴入16万单位/mL青霉素1滴抗菌，缝合，伤口连续3 d碘酒消毒。造模后第2天开始灌胃给药，每天1次，连续给药30 d。前摄宁颗粒大、中、小剂量组分别为30、15和7.5 g生药/kg体质量(6、3和1.5 g前摄宁颗粒/kg体质量)，阳性药对照组给前列通片2.0 g/kg体质量，模型组及假手术组给等量的水，灌胃体积均为1.0 mL/100 g。第30天尾静脉取血测定白细胞数，按摩取前列腺液，镜下观察卵磷脂小体密度，白细胞计数。取前列腺按摩液后处死大鼠，解剖摘取前列腺，进行解剖学观察，称取前列腺湿重，计算前列腺指数，肿胀率和肿胀抑制率。10%福尔马林溶液固定前列腺，石蜡包埋，切片，常规HE染色，进行镜下组织形态学观察与分析。

前列腺重质量指数(g/100 g)=前列腺体质量(g)/体质量(g)×100

肿胀率=(致炎鼠前列腺指数-假手术鼠前列腺指数)/假手术鼠前列腺指数×100%

肿胀率抑率=(模型组肿胀率-用药组肿胀率)/模型组肿胀率×100%

2 结果

2.1 前摄宁颗粒对大鼠前列腺组织增生(体质量)的影响 前列腺组织内注射消痔灵引起大鼠前列腺组织明显增生，前列腺体质量指数增加(肿胀率)41.9%。和模型组比较，前摄宁颗粒大、中和小剂量组使大鼠前列腺的肿胀度明显降低，肿胀抑制率分别达到62.8%、54.2%和42.7%，具有明显的剂量关系(表1)。

表1 前摄宁颗粒对消痔灵致前列腺炎大鼠前列腺重量的影响 (±s，n=10)

表1 前摄宁颗粒对消痔灵致前列腺炎大鼠前列腺重量的影响 (±s，n=10)

和假手术组比较，##P＜0.01;和模型组比较，*P＜0.05;和模型组比较，**P ＜0.01。

组别 剂量/(g/kg)前列腺体质量/g前列腺指数/(g/100 g)体质重肿胀率/%肿胀抑制率/%假手术组 1.58±0.29 0.396±0.067—18.4 56.1模型组 2.05±0.29##0.562±0.073## 41.9 0前摄宁组 6.0 1.66±0.11**0.458±0.041**15.6 62.8 3.0 1.75±0.31*0.472±0.070**19.2 54.2 1.5 1.85±0.13 0.492±0.039* 24.0 42.7前列通片 2.0 1.73±0.32*0.469±0.069**

2.2 前摄宁颗粒对血液和前列腺液内白细胞数量及前列腺液卵磷脂小体密度的影响 和假手术组比较，消痔灵模型大鼠血液白细胞数量无明显变化，但前列腺液内白细胞数明显增加，卵磷脂小体密度则显著降低。前摄宁颗粒各剂量组及阳性药对照组血液白细胞数量无明显变化，但明显降低前列腺液内的白细胞数，并使前列腺液内的卵磷脂小体密度显著增加，有明显的剂量关系(表2)。

表2 前摄宁颗粒对消痔灵致前列腺炎大鼠前列腺液和血液白细胞数及卵磷脂小体密度的影响 (±s，n=10)

表2 前摄宁颗粒对消痔灵致前列腺炎大鼠前列腺液和血液白细胞数及卵磷脂小体密度的影响 (±s，n=10)

和假手术组比较，##P＜0.01;*和模型组比较，P＜0.05;和模型组比较，**P ＜0.01。

卵磷脂小体密度假手术组组别 剂量//(g/kg)血液白细胞数109个/dL前列腺液白细胞108个/dL 17.2±7.3 14.5±2.9 3.67±0.50模型组 18.6±3.9 23.6±5.4## 1.30±0.48##前摄宁组 6 21.5±6.7 17.4±3.9* 2.10±0.74*3 28.1±12.2 17.6±4.2* 1.50±0.71 1.5 16.7±2.1 21.8±3.5 1.40±0.70前列通片 2.0 21.3±7.1 17.5±4.4* 2.30±0.67**

2.3 前摄宁颗粒对前列腺形态结构的影响 假手术对照组大鼠前列腺组织柔软有光泽，弹性好，与周围组织无黏连，易分离;模型组腺体稍大，部分与周围组织黏连，部分组织表面可见纤维化;阳性药对照组前列腺大;中剂量组腺体相对较柔软，表面有光泽，但腺体也有不同程度的肿胀;小剂量组前列腺组织外观改善并不很明显。

组织形态学分析显示，和假手术组比较模型组大鼠前列腺组织中每一视野内(4 mm2)间质组织面积比例明显增加，提示间质组织增生，而每个腺管的平均面积和周长均无明显变化，提示模型对前列腺组织中腺管上皮细胞并无明显促增殖作用。和模型组比较，前摄宁颗粒大、中剂量组的间质面积均明显降低，小剂量组则有一定的降低趋势，提示能明显抑制消痔灵引起的前列腺间质组织增生，而对腺管的平均面积等均无明显影响(表3，图1)。

表3 前摄宁颗粒对前列腺组织间质增生和腺体形态的影响 (n=10)

图1 前摄宁颗粒对消痔灵致大鼠慢性前列腺炎的抑制作用

3 讨论

国内外相关研究发现，慢性前列腺炎患者的前列腺内可以检测出革兰氏阴性杆菌、沙眼衣原体、支原体、人乳头状瘤病毒、真菌、滴虫等。前列腺组织因感染细菌而产生的黏性物质抗吞噬和抗趋化作用，可影响白细胞浸润、淋巴细胞增殖。若前列腺组织中细菌对抗生素产生耐药性，将导致前列腺感染难以治愈且易复发［7］。病理观察表明，慢性前列腺炎的前列腺组织中炎性细胞浸润上皮细胞导致阻塞、变性，而前列腺腺体间质发生水肿、腺管阻塞、炎性脓液。CP感染多发于间质，并因与腺体慢性充血相互影响，导致CP的病理改变加重，迁延难愈。前摄宁颗粒6 g和3 g/kg明显抑制由消痔灵诱导的大鼠慢性前列腺炎，使前列腺组织增生程度明显降低，前列腺(重量)肿胀度抑制率达到43% ～63%，前列腺液内白细胞数降低，而磷脂小体密度则明显恢复。组织形态学分析显示，前摄宁颗粒6 g和3 g/kg使前列腺间质增生程度明显减轻，1.5 g/kg也有相似的趋势，剂量关系明确。但前摄宁颗粒不同剂量组对腺管大小无明显影响，提示前摄宁颗粒对前列腺组织中腺管上皮细胞无明显作用。

刘明等报道纯中药滴丸剂-飞龙前列爽滴丸能抗炎、镇痛，有明显的抗慢性前列腺炎作用，有抑制早期炎症和晚期炎症的作用［8-9］;李占玲等观察了前康宁颗粒对大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型前列腺组织病理学的影响，发现前康宁有抗炎、消肿作用，可改善局部血运，使前列腺组织形态恢复正常，相关抗炎实验也表明前康宁颗粒具有明显的抗炎作用，临床疗效观察揭示该药对慢性前列腺炎治疗作用显著［10-11］。众多研究表明中医药治疗CP较西医治疗效果好，因此，研制疗效佳的前摄宁颗粒治疗易反复发作的CP有着良好的应用前景。

此外，我们在前期研究中发现，前摄宁对大肠杆菌引起的细菌性前列腺炎大鼠模型具有与消痔灵模型类似效应，对角叉菜胶引起的急性前列腺肿大(以水肿为主)疗效相对较弱，但也能明显减少该模型前列腺液内的白细胞数，能够抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀和醋酸引起的小鼠扭体反应，减轻大鼠异物(棉球)刺激引起的肉芽组织形成，预防和治疗给药对金黄色葡萄球菌感染引起的小鼠死亡有一定的抑制作用，但作用强度较弱。上述结果提示:前摄宁颗粒能明显抑制大鼠慢性前列腺炎，抑制前列腺间质组织的增生，并具有一定的抗炎和镇痛作用。

［1］戚广宗.中国首届男科学术大全述要［J］.中医杂志，1996，37(1):11-14.

［2］沈先荣，李水军，蒋定文，等.前摄宁颗粒对SD大鼠前列腺炎的抗炎作用［J］. 中成药，2008，30(6):808-812.

［3］赵广明，赵连华，韩贵夫，等.前列腺液白细胞定量计数及参考值测定［J］. 中华男科学，2002，8(2):209.

［4］孙明杰，贾玉森，李 军，等.前列腺炎栓药理学实验研究［J］. 中国中药杂志，2000，25(4):233-238.

［5］谷现恩，潘柏年.现代前列腺疾病［M］.北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1996:17.

［6］张亚强，于灵惠.中药前列腺汤对实验性前列腺炎病理模型的影响［J］. 中西医结合杂志，1991，11(8):480-481.

［7］陈志强.男科专病中医临床诊治［M］.北京:人民卫生出版社，2000:1-7.

［8］刘 明，张永萍，邱德文，等.飞龙前列爽滴丸抗前列腺炎的实验研究［J］.贵阳中医学院学报，2006，28(2):58-60.

［9］刘 明，张永萍，罗春丽，等.飞龙前列爽滴丸对慢性前列腺炎的抗炎作用［J］. 中南药学，2006，4(3):169-171.

［10］李占玲，吴春芳，李国信，等.前康宁颗粒对前列腺组织病理学的影响［J］. 中国医药学报，2003，18(10):632-633.

［11］李占玲，李国信，吴春芳，等.前康宁治疗慢性前列腺炎动物实验及临床疗效观察［J］.中国中西医结合外科杂志，2003，9(5):391-395.