两种浓度抗凝剂检测凝血酶原时间比较

陆奎英，周 艳，吴 艳，冯恒荣，包广宇

(扬州市第一人民医院检验科，江苏 扬州 225001)

凝血酶原时间(PT)是检测维生素K(Vitamin K)依赖因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ及Ⅴ和纤维蛋白原活性的指标。它不仅适用于外源性凝血途径的先天性凝血疾病及获得性出血性疾病的诊断，也可用于判断肝病病情，同时还是临床上口服抗凝剂治疗监测的首选指标。但长期以来，实验室间凝血酶原时间检测结果一致性较差。引起PT结果室间可比性差的原因很多，本文旨对抗凝剂的浓度影响进行探讨。

1 材料与方法

1.1 对象 我院2008年10月份门诊口服抗凝剂治疗监测的患者及小手术患者计46例。

1.2 方法 所有研究对象抽取静脉血各1.2ml分别加入到A组为含0.2ml3.2%枸橼酸钠(109mmol/L)和B组含0.2ml3.8%枸橼酸钠 (119mmol/L)抗凝管内(采血量为60%)。抽取静脉血各1.6ml分别加入到C组为含0.2ml3.2%枸橼酸钠 (109mmol/L)和D组含0.2ml3.8%枸橼酸钠(119mmol/L)抗凝管内(采血量为80%)离心后分离血浆。 抽取静脉血各1.8ml分别加入到对照组E组为含0.2ml3.2%枸橼酸钠(109mmol/L)和对照组F组含0.2ml3.8%枸橼酸钠(119mmol/L)抗凝管内(1：9 抗凝)。 Sysmex CA-7000全自动血凝仪检测PT。试剂由上海太阳生物技术有限公司提供。

1.3 统计学处理 数据采用x±s表示，六组间均数比较采用非配对t检验。

2 结果

46份标本PT结果分别为：A组17.4±0.21(s)，B组 23.8±0.56(s)，C 组 17.0±0.27(s)，D 组 20.9±0.32(s)，E组 16.8±0.26(s)，F 组 17.9±0.31(s)。 对照组 E 组、F组之间无显著差异 (P＞0.05)，A组、C组与对照组E组、F组之间无显著差异(P＞0.05);B组、D组之间有显著性差异(P＜0.05)，B组、D组与对照组E组、F组之间有显著差异(P＜0.05)。结果见表1。

表1 两种浓度抗凝剂检测PT比较±s)

表1 两种浓度抗凝剂检测PT比较±s)

组别 n PT(s)A组B组C组D组E组F组46 46 46 46 46 46 17.4±0.21 23.8±0.56 17.0±0.27 22.9±0.32 16.8±0.26 17.9±0.31

3 讨论

PT检测中常用的抗凝剂有两种，分别为3.2%枸橼酸盐 (109mmol/L)和3.8%枸橼酸盐(119mmoL/L)。两种抗凝剂抗凝全血进行PT检测时，均要求抗凝剂和血液的比例为1:9，但是临床工作中由于操作人员不同，真空采血管的质量等原因，往往比例很难控制[1]。本实验结果表明使用3.8%和3.2%枸橼酸盐抗凝标本时，如果抗凝剂与血液的比例达不到1:9时，使用3.8%枸橼酸盐抗凝的标本PT检测时间比3.2%枸橼酸盐抗凝的标本PT检测时间平均延长约6.0s左右。

使用3.8%枸橼酸盐抗凝的标本中如果采血量少于80%会导致检测结果出现显著差异，使用3.2%枸橼酸盐抗凝的标本即使采血量仅达到60%检测结果也不会出现显著差异。美国2001年的血凝实验室室间调查显示也证明了：使用3.2%枸橼酸盐抗凝的标本受血量影响小只要满足采血量超过60%检测结果不会出现显著差异[2]。

3.8 %枸橼酸盐抗凝的标本中PT检测时间会延长,其结果与临床表现不符。在早期室间调查中发现3.8%抗凝抗凝的标本如果采血量少于80%PT检测时间会延长,约有17%的患者出现7s以上的偏差[3]。因此，世界卫生组织都推荐使用3.2%枸橼酸盐作为PT检测的抗凝剂[3]。探其原理可能与血浆中钙离子浓度有关：因为PT在检测过程中血浆重新钙化，由于抗凝剂相对用量的多少直接影响血浆钙浓度，而血浆钙浓度的高低则影响凝血功能检测结果，因此血浆中钙浓度是凝血功能检测至关重要的因素[4]。当血液与抗凝剂比为9:1时血浆中枸橼酸盐浓度为正常水平，所谓血液与抗凝剂比为9:1实际上是抗凝剂与正常红细胞压积血液的血浆之比[5]。当采血量不足时血浆量就少，血浆中枸橼酸盐浓度相对增高，血浆中钙离子浓度相对不足，即使在检测过程中加入了钙离子仍然不能满足反应所需要的钙离子浓度从而影响PT检测结果,使检测结果延长。相对于少量的血浆量而言含有3.8%枸橼酸盐浓度比3.2%枸橼酸盐浓度要高，对PT检测结果影响就大[6]。

综上所述，为减少采血量对检测结果的影响用3.2%枸橼酸钠(109mmol/L)作为抗凝剂来检测凝血酶原时间更适合于临床使用。

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