HPLC法测定盐酸吗啉胍片含量的考察

康 军，李 征

（辽阳市食品药品检验所，辽宁辽阳 111000）

盐酸吗啉胍片主要用于病毒性感冒，亦可用于腮腺炎、扁桃腺炎、疱疹和水痘等。现标准采用紫外分光光度法测定其含量。本文建立了以高效液相色谱法测定盐酸吗啉胍片中盐酸吗啉胍的含量，该方法简单、准确、可靠、专属性强，能够较原标准更好地控制药品质量[1]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

高效液相色谱仪（日本岛津公司）包括LC-10ATvp输液泵、SPD 10Avp输液泵、SPD 10Avp可变波长紫外检测器、TA-130柱温箱和ANASTAR色谱数据处理系统；兰博牌超声波清洗器HS-3120型；赛多利斯电子天平BP211-D；电子天平ES120J-4H。

1.2 试药

盐酸吗啉胍片 （XX制药有限公司，批号：20090109、20090802、20091001）；盐酸吗啉胍（中国生物制品检定所，批号：100483-200402）；甲醇、乙腈为色谱纯；磷酸二氢钠、磷酸氢二钠为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性试验[2-8]

色谱柱：Diamonsil C18（4.6 mm×200 mm，5 μm）色谱柱；流动相：甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液（60∶20∶20），流速：1.0 ml/min，检测波长：237 nm，柱温：25℃，进样量：10 μl。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液制备 精密称取盐酸吗啉胍对照品10 mg，置于100 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 ml，置100 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液制备 取本品20片，研细，精密称定，精密称取适量 （约相当于盐酸吗啉胍50 mg），置于200 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，制成对照品贮备液。精密量取续滤液2 ml，置100 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.2.3 阴性样品溶液制备 取不加盐酸吗啉胍的空白样品按“2.2.2”项下方法操作，即得。

2.3 阴性干扰试验

照上述色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10 μl，注入高效液相色谱仪中测定，阴性样品在盐酸吗啉胍出峰处无干扰峰出现，证明本方法可行。结果见图1。

2.4 线性关系考察

精密吸取上述对照品溶液 4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、14.0 μl，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积Y为纵坐标，进样量X为（μg）横坐标进行线性回归，得回归方程为Y＝26 789X-121 717（r=0.999 2），表明进样量在20～70 μg范围内有良好的线性关系。

2.5 精密度试验

取“2.2.1”项下对照品溶液，重复进样6次，平均峰面积为1 117 876，RSD为0.62%。结果表明本法精密度良好。

2.6 稳定性试验

取对照品溶液和供试品溶液（批号：20091001）于0、3、6、12、24 h分别进行测定，平均峰面积分别为1 108 772和1 269 050，RSD分别为0.61%和0.83%，表明溶液在24 h内稳定性良好。

2.7 重复性试验

取供试品溶液（批号：20091001）6份，按含量测定方法分别进行测定，计算求得盐酸吗啉胍的平均含量为94.5%，RSD为0.52%（n=6），表明本法重复性良好。

2.8 回收率试验

精密称取9份已知含量的同一批号样品 （批号：20091001，含量为94.5%，约相当于盐酸吗啉胍25 mg），分别加入盐酸吗啉胍对照品适量，使加入的3种对照品的量分别为标示量的80%、100%、120%，每种加入量各3份。按供试品溶液的制备方法配制供试品溶液，测定盐酸吗啉胍的含量，计算回收率，结果平均回收率为99.90%，RSD为0.69%（n=9）。见表1。

表1 回收率试验结果（n=9）Tab.1 Results of recovery test（n=9）

2.9 样品含量测定

精密量取对照品溶液和供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，以外标法计算含量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=3)

3 讨论

3.1 检测波长的选择

盐酸吗啉胍片在237 n m处有最大吸收，因此选择237 nm作为检测波长[1，5]。

3.2 流动相的选择

通过比对试验，发现甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液（60∶20∶20）比例的流动相比其他流动相能获得更好的分离效果，峰形好，柱效高。

3.3 溶解方法的选择

本试验分别采用甲醇、磷酸氢二钠等溶剂溶解盐酸吗啉胍，最后测定盐酸吗啉胍的含量，结果认定甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液（60∶20∶20）溶解效果最好。

本文建立的HPLC法测定盐酸吗啉胍片的方法精密度好，操作简单、快速，是测定盐酸吗啉胍片含量的有效方法。

[1]国家食品药品监督管理局.国家药品标准[S].WS-10001-(HD-0650)-2002.

[2]方东伟,王正权.反相高效液相色谱法测定盐酸吗啉胍片的含量[J].中国药业,2006,15(5):41.

[3]周小露,何勇虎,伍思强.治感佳片中对乙酰氨基酚和盐酸吗啉胍的含量测定[J].中国药业,2008,17(14):41.

[4]杨怀镜,李雪梅,张玲.盐酸吗啉胍片含量测定方法的比较[J].中国药事,2001,15(2):123-124.

[5]罗凤琴,张锦,刘韵琪.紫外分光光度法测定盐酸吗啉胍片的含量[J].川北医学院学报,2007,18(3):93-95.

[6]吕海华,陈军.HPLC法同时测定感冒清胶囊中3组分的含量[J].安徽医药,2007,11(8):708-709.

[7]梁敏,李芳,张彬.高效液相色谱法同时测定感冒清胶囊中两组分的含量[J].广东药学院学报,2006,22(5):521-523.

[8]李小燕.反相高效液相色谱法同时测定感冒清片中两组分的含量[J].中国药房,2003,14(9):560-561.