IgD型多发性骨髓瘤患者实验室检查结果分析

耿红莲,王淇泓,赵文静,竺 蓓,仲人前

(第二军医大学附属长征医院实验诊断科、全军临床免疫中心,上海200003)

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是浆细胞单克隆增生的恶性肿瘤,实验室检查以血清蛋白电泳中出现异常浓集区带,即M蛋白带最有诊断价值。根据其增生的浆细胞分泌的免疫球蛋白重链的不同,可将MM分为IgG型 、IgA 型、IgM 型、IgD型和IgE型。其中IgG型、IgA型、IgM型较为常见,其实验室诊断方法和结果分析较为成熟,而IgE型非常罕见。本研究主要针对临床出现但较为少见的IgD型MM的实验室检查结果进行分析,以期发现其特点,避免漏诊。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集2009.5至2010.10符合MM诊断标准的患者血清分别收集20例,本实验室检测到的IgD型、IgG型、IgA型、IgM型MM患者血清标本,尽量包括κ轻链型和λ轻链型。30例体检健康者血清,为免疫球蛋白定量的正常对照组。

1.2 检测方法

1.2.1 免疫球蛋白定量:采用西门子公司Dade Behring BNII免疫生化分析仪及配套试剂,利用免疫散射比浊法,定量测定免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和kappa、lambda轻链的浓度。

1.2.2 血清蛋白电泳:采用Helena公司的Spife3000电泳仪及扫描仪进行血清蛋白电泳,具体操作包括加样(每孔19ul)、染色(acid blue)、脱色(5%乙酸)、烘干等,最后在扫描仪上进行扫描,自动计算出各区带所占百分比。

1.2.3 免疫固定电泳:采用Helena公司的Spife3000电泳仪及配套试剂,特别注意加IgD泳道。具体操作包括琼脂糖凝胶电泳、免疫沉淀及显色三个部分。免疫沉淀即应用固定剂和各型免疫球蛋白及轻链抗血清,加于凝胶表面的泳道上,经孵育让固定剂和抗血清的在凝胶内渗透并扩散后,若有对应的抗原存在,则在适当位置形成抗原抗体复合物。

1.3 统计学处理

所得免疫球蛋白和轻链浓度采用均数加减标准差表示,两组之间比较采用t检验。

2 结果

2.1 血清免疫球蛋白及轻链定量 20例IgD型MM患者血清免疫球蛋白及轻链定量结果显示,IgG、IgA和 IgM 含量显著减低(18例,占90%),其余两例3种免疫球蛋白含量处于正常下限。轻链定量发现,IgD型MM患者以λ轻链升高为主(19例,占95%),且20例中有19例是轻链比值异常的。与IgG、IgA和IgM型MM定量结果比较发现,IgG型MM以IgG升高为主,其它免疫球蛋白下降,轻链型中κ型和λ型均有;IgA和IgM型结果类似;IgD型MM患者血清IgG、IgA和IgM均显著低于正常对照组,轻链型以λ升高,κ/λ比值下降为主。以 IgG/λ型MM患者为例,IgG/λ型和IgD/λ型MM患者血清免疫球蛋白及轻链定量结果比较如表1所示。

表1 IgG/λ型和IgD/λ型MM患者定量测定结果比较

2.2 血清蛋白电泳M带检出率

MM患者经血清蛋白电泳后,IgG、IgA、IgM和IgD型MM的血清蛋白电泳M带检出率分别为19(95%)、18(90%)、19(95%)和 18(90%),检出率无显著差异。另外,各型MM的血清蛋白电泳阳性条带的位置分布包括β区、γ区以及位于β和γ之间的区域,各型之间无明显差异。

2.3 免疫固定电泳分型

IgG、IgA、IgM和IgD型MM患者血清经免疫固定电泳均呈现异常浓集区带,分型结果显示IgD型MM,以IgD/λ为主(19/20,95%);6例经血清蛋白电泳未检出M带而免疫固定电泳检出M带的患者中,有2例为IgD型MM患者,其余4例为各型MM患者化疗后样本。以一例典型的IgD型MM患者为例,其实验室检查结果如图1所示:

图1 IgD型MM患者实验室检查结果

3 讨论

多发性骨髓瘤是恶性浆细胞单克隆增殖性疾病[1,2],单克隆增殖是一个细胞在某一分裂阶段发生突变,然后急剧分化、增殖,并大量表达某种单一的免疫球蛋白。MM在人群中发病机率和免疫球蛋白本身含量一致[3],因为IgG含量最高,因此IgG型最多,IgA型次之,IgM型少见,IgD更少。本文以少见的IgD型MM实验室检查结果进行分析,目的是减少IgD型MM的漏诊和误诊。

MM患者的实验室检查中以M蛋白鉴定最有诊断价值,所谓M蛋白带即单一的免疫球蛋白增殖在血清蛋白电泳时表现为一条狭窄浓集的异常区带。本研究发现IgD型MM患者的IgG、IgA和 IgM含量均减低者,而由于试剂限制,无法进行 IgD定量。MM患者一个显著特点是难治性感染的反复发作[4,5],可能是当某种免疫球蛋白特异性升高时,其它正常成分的免疫球蛋白就会相应的减少,失去正常的免疫功能。因此推断,IgD型MM患者三种免疫球蛋白减少,IgD免疫球蛋白含量升高。轻链定量发现,20例IgD型MM患者有19例为IgD型λ轻链型,占95%,而IgD型κ轻链型仅1例,这可能是因为正常人总的免疫球蛋白κ/λ比值为2左右,而IgD型免疫球蛋白κ/λ比值仅为0.3,因此是以λ型为主的。IgD型MM患者的血清蛋白电泳阳性率与其余类型无显著差异,免疫固定电泳显示IgD泳道有特异性的抗原抗体沉淀带。

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