玫瑰花茶对束缚应激小鼠旷场活动性的影响

陈 文，任 超，刘 娇，王 祎，郭月逸

(北京联合大学应用文理学院，北京市生物活性物质与功能食品重点实验室，北京100191)

玫瑰花茶对束缚应激小鼠旷场活动性的影响

陈 文，任 超，刘 娇，王 祎，郭月逸

(北京联合大学应用文理学院，北京市生物活性物质与功能食品重点实验室，北京100191)

旨在探讨玫瑰花茶对束缚应激小鼠自主探究活动能力的影响。将8周龄雄性BALB/C小鼠分为4组:正常对照组(C组)、应激对照组(S组)、低剂量玫瑰花茶组(L-RE组)、高剂量玫瑰花茶组(H-RE组)。S、L-RE、H-RE组小鼠每日给与1h的束缚刺激，30min后分别灌喂水和相应剂量的玫瑰花茶。连续6周后用Smart小动物行为活动记录分析系统进行旷场实验。结果显示，S组小鼠在旷场周边区域、中央区域的活动性分别比C组小鼠减弱了10.8% (P＜0.05)和15.7%，快速移动时间百分率显著降低(P＜0.05)。与S组相比较，L-RE组小鼠在旷场周边区域、中央区域的探究活动性明显提升(P＜0.05)，不动时间百分率下降(P＜0.05);H-RE组小鼠在周边区的探究活动性提高(P＜0.05)，不动时间百分率下降(P＜0.05)。以上结果显示玫瑰花茶能够缩短束缚应激小鼠的不动时间，提高小鼠在旷场中央和周边区域的自主探究活动能力，起到缓解应激小鼠焦虑状态的作用。

玫瑰花，旷场，束缚应激，小鼠

1 材料与方法

1.1 材料与设备

玫瑰花 购自平安百合大药房;小鼠60只SPF级，购于军事医学科学院实验动物中心。

小鼠旷场箱 西班牙Smart小动物行为活动记录分析系统。

1.2 实验方法

1.2.1 玫瑰花茶的制备 称取玫瑰花4.5、9g，分别浸于100mL沸水中，超声提取30min，过滤，滤液分别作为高剂量玫瑰花茶和低剂量玫瑰花茶。

1.2.2 实验动物及分组 8周龄雄性BALB/C小鼠60只，在光-暗周期为12h、温度20～22℃的环境下适应饲养一周后，按体重随机分成四组:正常对照组(C组)、应激对照组(S组)、低剂量玫瑰花茶组(L-RE组)、高剂量玫瑰花茶组(H-RE组)，每组15只。各组小鼠均自由摄食饮水，S组、L-RE组、H-RE组小鼠每日置于带有透气孔的束缚管中，给与1h的束缚刺激，30min后分别灌喂0.4mL水、低剂量玫瑰花茶、高剂量玫瑰花茶。连续喂饲6周，于第6周结束时进行旷场实验。

1.2.3 旷场实验 旷场箱是一个单边长为27.5cm、总边长为110cm的正方形，在图形上将该正方形区分为周边、中央两个区域。中央区为套在大正方形中的一个单边长为13.75cm、总边长为55cm的小正方形，此小正方形到大正方形各边的距离相等。小正方形与大正方形之间的区域即为周边区。在旷场箱正上方安装好摄像机，调整好影像画面。

将小鼠置于旷场箱的中央，开始计时，用西班牙Smart小动物行为活动记录分析系统记录并分析小鼠在旷场箱内5min的自主探究情况，包括小鼠分别在周边区、中央区内的自主活动性、小鼠的不动时间、慢速移动时间、以及快速移动时间等。每实验完1只小鼠用75%酒精擦洗旷场箱并挥干，再进行下一只小鼠的实验。

2 结果与分析

2.1 玫瑰花茶对小鼠体重的影响

实验开始时(分组时)各组小鼠间体重无明显差异，经过6周的实验后，与C组相比较，S组的体重有所降低，显示束缚刺激使得小鼠产生焦虑情绪，影响了小鼠随龄的体重增长;与S组相比较，L-RE组和H-RE组小鼠体重也都明显减轻，表明玫瑰花茶有一定减重效果。

表1 实验前后各组小鼠体重(g)的变化(X±SD)

2.2 玫瑰花茶对小鼠旷场自主活动性的影响

Smart小动物行为活动记录分析系统通过小鼠在旷场箱中的移动运行时间、速度、以及轨迹等不同参数来综合给出小鼠在不同区域的自主探究活性数据。

由表2可见，与C组相比较，S组小鼠在周边区域的活动性数值明显降低(P＜0.05)，在中央区域的活动性也降低了15.7%，显示束缚刺激使小鼠的自主活动能力下降、焦虑水平提升;与S组相比较，L-RE组和H-RE组小鼠在周边区域的探究活动性都显著提高(P＜0.05)，L-RE组小鼠在中央区域的探究活动性比S组小鼠提高了34%(P＜0.05)，表明玫瑰花茶能够提升束缚应激小鼠的自主探究活动性、缓解焦虑状态。

表2 玫瑰花茶对小鼠旷场自主活动性的影响(X±SD)

2.3 玫瑰花茶对小鼠旷场自主活动时间与移动速度的影响

小鼠在旷场箱中的移动分为三种情况，小鼠不动或移动速率小于2.04cm/s时计为不动，移动速率介于2.04～8.16cm/s时计为慢速移动，移动速率大于8.16cm/s时计为快速移动。

实验结果显示，连续喂饲6周后，与C组相比较，S组小鼠的不动时间百分率上升、慢速移动时间百分率减少、快速移动时间百分率则显著降低(P＜0.05)，提示每日的束缚刺激使小鼠的快速移动能力明显减弱;与S组相比较，L-RE组和H-RE组小鼠的不动时间百分率都显著降低(P＜0.05)，分别下降了20.5%和22.3%，而慢速移动和快速移动时间百分率则均有所上升，显示玫瑰花茶能够明显缩短束缚应激小鼠在旷场中的不动时间，在一定程度上提高小鼠的活动能力。

表3 玫瑰花茶对小鼠旷场自主活动时间与移动速度的影响(X±SD)

3 讨论与结论

应激是指机体在受到各种内外环境因素刺激时出现的非特异性全身反应，有研究表明，适度的应激对机体而言具有积极意义［6］;但长期或严重的应激则易对机体造成伤害，对多种疾病如心脑血管疾病、恶性肿瘤和糖尿病的发生、发展都有重要影响［1］。应激又与焦虑和抑郁密切相关，被认为是导致焦虑和抑郁的诱因。在焦虑和抑郁生物学机制的研究方面，通常利用动物对应激性或新异性事件的行为或生理反应来测定动物的焦虑状态，旷场实验就是经典的方法之一［7］，主要检测动物的非条件性反射，利用动物对新异环境的恐惧心理和探究特性形成的矛盾冲突来考察动物的焦虑状态［8］。当小鼠进入旷场箱中，对新环境的恐惧使其主要在周边区域活动，而喜欢探究的天性又使其产生在中央区域活动和探究的动机，造成了探究-回避的冲突行为，从而诱导焦虑产生。在中央区域活动、中央-周边穿梭等自发活动行为能有效反应小鼠对新环境的探索欲望水平和环境适应能力，探索欲越强代表环境适应能力越强，焦虑水平越低［9］。1999年，王天芳［10］等人报道慢性束缚应激使大鼠的不动时间延长、自主活动次数减少、穿格次数减少，表现出抑郁倾向。随后，又有多项动物实验也显示［11-12］，慢性应激可致大鼠旷场行为异常，如潜伏期延长、行为活动减少等。

本实验结果显示，束缚应激组小鼠在旷场周边和中央区域的活动性、慢速与快速移动时间百分率等均比正常对照组小鼠有所下降，而不动时间百分率上升。说明每日的束缚刺激抑制了小鼠的自主活动能力，提升了焦虑水平。

玫瑰花作为药食两用的植物，其主要的功效报道集中在抗氧化、抗菌、抗病毒、以及对心血管的保护等方面。作为日常饮品，玫瑰花茶虽然常常被宣传具有“减压”功效，却鲜有相关的文献报道。本实验中，在连续给予束缚应激小鼠6周的玫瑰花茶后，与应激对照组相比较，两个玫瑰花茶组小鼠在旷场周边区域的探究活动性都明显提高、在中央区域的探究活动性也都有所增强，特别是低剂量玫瑰花茶组小鼠在旷场中央区域的探究活动性比应激对照组显著提高了34%，两个玫瑰花茶组小鼠的不动时间百分率都明显下降了20%以上。结果显示，玫瑰花起到了缓解应激小鼠焦虑状态的作用，低剂量优于高剂量。长期过度的应激往往会导致机体的氧化损伤，而玫瑰花茶组小鼠应激状态的缓解很可能与其抗氧化活性相关。曾佑炜等人曾报道［13］玫瑰花水提液具有良好的清除二苯代苦味酰自由基的作用。

本实验中另一个值得探讨的问题是，束缚刺激抑制了小鼠体重的增长;而与应激对照组相比较，两个玫瑰花茶组小鼠的体重也都减轻，这与我们此前关于玫瑰花茶功效作用的实验结果相吻合，玫瑰花茶组均多次出现减重效果。关于玫瑰花茶减重减压功效及其作用机制有待于深入探讨。

本文通过旷场实验，初步证实了玫瑰花茶能够缩短束缚应激小鼠的不动时间，提高了其在旷场中央和周边区域的自主探究活动能力，具有一定的缓解应激小鼠焦虑状态的作用，为玫瑰花茶的功效研发提供一些参考依据。

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Effect of the rose extract on stressed mice in open-field test

CHEN Wen，REN Chao，LIU Jiao，WANG Yi，GUO Yue-yi
(College of Arts＆Science of Beijing Union University，Beijing Key Laboratory of Bioactive Substances and Functional Foods，Beijing 100191，China)

In order to study the effect of rose extract on the open-field test of stressed mice，8-weeks-old male BALB/C mice were divided into 4 groups:control group(C)，stressed group(S)，low-dose rose extract group(LRE)，and high-dose rose extract group(H-RE)based on their body weights.The mice of S，L-RE and H-RE group were suffered restraint stress 1h a day.6 weeks later，open-field test was determined.Results showed that compared with C group，fast-moving time(%)and the locomotive activity of S group in periphery and central area were markedly decreased(P＜0.05).Compared with S group，L-RE group had higher locomotive activity in periphery and central area and had less immobility time(%)(P＜0.05)，and H-RE group had higher locomotive activity in periphery area and less immobility time(%)(P＜0.05).The above results suggested rose extract was reducing the immobility time and improving the locomotive activity of stressed mice and showed some anxiolytic effect.

rose;the open-field test;restraint stress;mice

TS201.4

A

1002-0306(2011)09-0396-03

当前，在我国社会经济发展、转型的阶段，越来越多的心理应激问题引起了社会各界的重视，人们已经逐渐认识到应激会影响健康和增加疾病的易感性。已有大量的研究表明，长期或严重的应激对多种疾病，如心脑血管疾病、恶性肿瘤和糖尿病的发生、发展都有重要影响［1］。玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰(Rosa rugosa Thunb)的干燥花蕾［2］，含有多种生物活性成分，主要包括挥发油、鞣质、氨基酸、黄酮类、色素类、多酚类等［3-5］，其在中医药学中的应用历史悠久，具有理气解郁、活血散淤的作用。玫瑰花的现代药理学研究大多集中在抗氧化、抗菌、抗病毒、以及对心血管的保护方面。关于玫瑰花茶的“减压”功效虽常被宣传，但却鲜有相关的科技文献报道。本研究旨在观察玫瑰花茶对束缚应激小鼠旷场自主活动性的影响，以初步探讨玫瑰花茶之“减压”的功效。

2010-03-21

陈文(1966-)，女，博士，副教授，研究方向:营养与功能食品。

北京联合大学自然科学类项目(2009)。