中药何首乌饮对衰老大鼠抗氧化能力的影响*

王小杰，焦海涛，宋莺春，牛嗣云

(1.承德医学院，河北承德 067000;2.承德医学院附属医院麻醉科;3.河北大学)

衰老是一种正常而复杂的生物学过程，英国学者Harman于1956年在分子生物学的基础上提出了衰老的自由基学说。人体内存在清除自由基的防御系统，包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）及维生素、氨基酸、金属蛋白等。随着年龄的增长，机体抗氧化防御物质合成和活性下降，清除自由基能力降低，导致自由基代谢产物丙二醛(MDA）等大量堆积，加速机体的衰老[1-2]。当前，传统中药已经成为抗衰老研究领域的热点。本研究对补肾中药何首乌饮的抗衰老作用进行了初步研究，观察了何首乌饮对亚急性衰老大鼠血清MDA含量，GSH-Px和SOD活性以及总抗氧化能力(T-AOC）的影响。

1 材料与方法

1.1 试剂 D-半乳糖，北京化学试剂公司，用生理盐水配成6%的溶液;SOD、MDA、GSH-Px、T-AOC试剂盒，南京建成生物工程研究所。何首乌饮由何首乌、怀牛膝、肉从蓉、淫羊藿、丹参、茯苓组成，熬制后含生药4.8g/ml,按0.06ml/kg灌胃给药。

1.2 实验动物分组及衰老动物模型的建立 清洁级8周龄雄性SD大鼠30只,体重180-220g(由河北医科大学实验动物中心提供）。随机分为正常组、模型组、何首乌饮预防组(预防饮组），每组10只大鼠。模型组、预防饮组大鼠连续腹腔注射D-半乳糖(300mg/kg/d，60d）建立亚急性衰老的动物模型，正常组大鼠腹腔注射同等剂量的生理盐水。预防饮组大鼠在腹腔注射D-半乳糖的同时，灌胃何首乌饮，每天2次，连续60d;正常组、模型组大鼠灌胃等量生理盐水，每天1次，时间同预防饮组。

1.3 取材及检测 各组大鼠用药结束后4%水合氯醛腹腔注射麻醉，经内眦取血,离心取上清，采用TBA法检测MDA含量，比色法检测GSH-Px活性，黄嘌呤氧化酶法检测SOD活性，铁还原法检测T-AOC。

2 结果

与正常组比较，模型组大鼠MDA含量明显升高，GSHPx活性、SOD活性、T-AOC明显降低，差异具有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05）;何首乌饮可预防性抑制衰老大鼠MDA含量的升高，GSH-Px活性、SOD活性、T-AOC的降低，预防饮组与模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.01）。见附表。

附表 大鼠各指标检测结果(±s，n=10）

附表 大鼠各指标检测结果(±s，n=10）

与模型组比较:*P＜0.01，**P＜0.05

组别 MDA(nmol/ml pr） GSH-Px(U/ml)SOD(U/ml)T-AOC(U/ml)正常组 2.21±0.83* 1862.7±717.5** 191.77±15.04** 12.35±3.04*模型组 4.57±1.20 1301.8±452.4 156.48±13.58 4.51±2.71预防饮组 2.43±0.83* 2386.0±543.5* 216.35±29.79* 9.15±2.31*

3 讨论

MDA是机体在衰老过程中产生的过量超氧阴离子自由基与脂质发生过氧化反应的终产物[3]。有报道表明，MDA的含量可代表脂质过氧化产物的浓度,间接反映组织的损伤程度[4]。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶，它的主要生理功能是催化谷胱甘肽(GSH）参与过氧化反应，清除细胞在呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基，从而减轻不饱和脂肪酸的过氧化作用。研究发现，当生物体的年龄增加到一定程度时,机体氧化还原平衡逐渐被打破,过氧化产物不断积累、抗氧化物质的含量明显下降,导致机体衰老。因此，GSH-Px活性变化与机体的衰老密切相关[5]。SOD可消除生物体在新陈代谢过程中产生的自由基等有害物质，对机体的氧化与抗氧化平衡起着重要作用,是机体抗自由基损伤的重要防御因素[6]。大量研究表明,SOD活性随增龄下降[7]。T-AOC代表体内酶性和非酶性抗氧化物的总体水平，血清T-AOC是一个可全面反映机体抗氧化能力的指标。

何首乌饮由何首乌、肉苁蓉、怀牛膝、淫羊藿、丹参、茯苓组成，能填精补髓、乌发延年，补肾壮阳强筋骨、活血化淤通心脉、健脾利湿宁心神。本研究发现，D-半乳糖致模型模型大鼠血清MDA含量明显升高，SOD活性、GSH-Px活性、T-AOC明显降低，说明衰老大鼠抗氧化能力明显降低，机体因此不能及时、有效地清除代谢过程中产生的自由基等有毒物质。另外，本研究发现，预防性何首乌饮灌胃可明显抑制衰老大鼠血清MDA含量的升高，SOD活性、GSH-Px活性、T-AOC的降低;表明何首乌饮可通过抑制衰老大鼠抗氧化能力的下降，预防自由基等有毒物质对机体的损害，因此具有一定延缓衰老的作用。

[1]Vohra BP, Sharma SP, Kansal VK.Age-dependent variations in mitochondrial and cytosolic antioxidant enzymes and lipid per oxidation in different regions of central nervous system of guinea pigs[J].Indian J Biochem Biophys,2001,38(5):321-326.

[2]LIU Kun-zhi.The effect of deoxyribonucleic acid on the activity of superoxide dismutase and peroxides[J].Acta Laser Biology Sinica,2002,11(2):119-121.

[3]Zhang Q,Li X, Cui X, et al.D-galactose injured neurogenesis in the hippocampus of adultmice[J].Neurol Res,2005,27(5):552-556.

[4]刘国强,杨桂文,安利国.芦笋黄酮对D-半乳糖衰老小鼠大脑皮层SOD、MDA的影响[J].科技信息(学术研究）,2008,(2）:119.

[5]Giardino R, Giavaresi G, FiniM, et al.The role of different chemical modifications of superoxide dismutase in preventing a prolonged muscular ischemis/ reperfusion injury[J].Artif Cells Blood Immubiol Biotechmol,2002,30(3):189-198.

[6]何建明,李玉蓉,韦英秀,等.急性脑梗死患者血管内皮生长因子与自由基SOD、MDA 的临床研究[J].现代生物医学进展,2010,10(12):2295-2298.

[7]李胜志,赵雪莹,李冀.二至丸对D-半乳糖致衰老模型大鼠SOD、MDA影响的实验研究[J].中医药信息,2008,25(3):37-38.