不同产地金樱子根、茎、果中多糖含量的比较研究

谭宏韬

金樱子为蔷薇科植物金樱子RosalaevigataMichx.的干燥成熟果实，味酸、甘、涩，性平，归肾、膀胱、大肠经。具有固精缩尿，涩肠止泻的功效，现代药理研究发现金樱子具有抗氧化、抑菌和抗炎、抑脂、免疫活性、致突变等作用，还能诱导细胞凋亡，临床上主要用于治疗遗尿、尿频，腹泻，遗精、早泄，子宫下垂，慢性支气管炎，以及作为肥胖糖尿病的食疗方[1]。

药食兼备的金樱子因其风味独特、营养价值丰富的特点倍受青睐，作为制药企业生产多种保健品的重要原料和疾病治疗不可缺少的药物，金樱子药材资源需求量越来越大。但由于社会产量少、市场库存薄弱、用途日益拓宽的原因，金樱子药材商品货少价扬[2]，因此，研究提高金樱子药材资源的方法为当务之急。席许林等[3]以金樱子根为主自拟中草药方运用于2型糖尿病患者，结果治疗前后血糖明显下降。刘佩沂等[4]通过总结近几年金樱子根的研究进展，得出金樱子根已广泛应用于临床的结论，但关于其化学成分及药理研究报导甚少。赖岳晓等[5]通过研究得出金樱子根、茎多糖具有抑菌作用，说明多糖是金樱子根和茎的主要药效成分，但是否能够代替金樱子果入药，目前尚无相关研究报导。

《中国药典》2005版规定，金樱子肉按干燥品计算，含金樱子多糖以无水葡萄糖计，不得少于25%[6]，金樱子多糖无疑是金樱子果肉的主要活性成分之一。本论文研究通过对不同产地的金樱子根、茎、果中多糖含量进行比较，初步探讨金樱子的根和茎是否能在一定程度上代替果实入药，为进一步解决金樱子药材资源匮乏问题提供科学依据。

1 材料

1.1 药材采集及处理

于广西藤县(2005年10月5日)、湖南长沙(2008年11月24日)、广东河源(2009年1月16日)、广东肇庆(2008年10月6日)，各采集3株已成熟金樱子的根、茎、果实，经广州中医药大学中药学院中药资源教研室何国振副教授鉴定为蔷薇科植物金樱子RosalaevigataMichx.的成熟根、茎、果实。将药材除去杂质，洗净，60℃烘干，粉碎得粗粉备用。

1.2 仪器

紫外光-可见光吸收光谱仪(UV/Vis Spectrophotometer) (Optizen 2120uv，韩国)；十万分之一克电子天平 (Sartorius AG BP211D，德国)。

1.3 试药

浓硫酸(分析纯)，苯酚(分析纯，重蒸酚)；葡萄糖对照品(批号：110833-200503，中国药品生物制品检定所)。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

将葡萄糖对照品打开盖置小烧杯中，在五氧化二磷减压干燥器中干燥12 小时，精密称定0.015 g置25 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每ml中含无水葡萄糖0.6 mg)。

2.2 标准曲线的制备

精密量取对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml分别置50 ml量瓶中，各加水补足至刻度，摇匀。分别精密量取上述溶液2ml，置具塞试管中，迅速滴加4 %苯酚溶液1 ml、浓硫酸7.0 ml，摇匀，置40 ℃水浴中保温30分钟，取出置冰浴中放置5分钟，取出[7]，以蒸馏水为空白，于490 nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线[6]。

测定结果表明，葡萄糖在0.006～0.030 mg/ml范围内呈良好线性关系。r=0.9998，A=11.550c-0.01410。其中，A表示吸光度，c为葡萄糖浓度。

2.3 测定法

精密称定金樱子根、茎粗粉各1 g，果粗粉0.5 g置锥形瓶中，精密加水50 ml，称定重量，静置1小时，水浴回流提取1小时，冷却至室温，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1 ml，置100 ml量瓶中，加水补足至刻度，摇匀，精密量取25 ml，置50 ml量瓶中，加水补足至刻度，摇匀，精密量取2 ml置具塞试管中，参照标准曲线的制备项下的方法，自“迅速滴加4%苯酚溶液1 ml、浓硫酸7.0 ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量[6]。

2.4 精密度试验

同一供试品溶液，各精密称取5份，参照标准曲线制备项下的方法，依法测定吸光度为0.193、0.193、0.194、0.193、0.193，RSD=0.23%(n=5)，精密度良好。

2.5 重复性试验

同一批样品，各精密称取5份，参照测定法项下的方法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量，计算出样品中金樱子多糖的含量，分别为15.47%、14.95%、15.53%、14.34%、13.85%，RSD=4.92%(n=5)，重复性良好。

2.6 回收率试验

根据重复性试验中测定的5份样品金樱子多糖含量的平均值，计算0.25 g样品中含有金樱子多糖的重量。取同一批样品，各精密称取5份，参照测定法项下的方法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量，计算平均回收率为98.64%，RSD值为1.80%。

2.7 样品含量测定及统计分析

每个样品重复3次，参照测定法项下的方法，从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量，计算出样品中金樱子多糖的含量，分别对广西藤县、湖南长沙、广东河源、广东肇庆4个不同采收地点的金樱子的多糖含量进行测定，结果见表1。

运用SPSS 11.5软件的One-Way ANOVA 过程进行方差分析，对比不同产地金樱子根、茎与果之间的多糖含量，结果示4个产地金樱子的根与果、茎与果多糖含量均存在显著性差异(P<0.05)；广西藤县、湖南长沙、广东肇庆3个产地金樱子根与茎多糖含量存在显著性差异(P<0.05)，而广东河源金樱子的根与茎多糖含量之间无显著性差异(P>0.05)。

表1 不同产地的金樱子不同部位多糖含量比较

3 分析与讨论

4个产地金樱子根、茎的多糖含量都比果实的多糖含量低，且具有显著性差异，因此，不能以金樱子的根和茎代替果实入药。且《中国药典》2005版规定，金樱子肉按干燥品计算，含金樱子多糖以无水葡萄糖计，不得少于25%[6]，而实测值均低于该标准，除却操作误差，主要因为药用植物的生长发育及产品器官的形成、有效物质的合成与累积受自身遗传特征、自然环境、采收等多方面的影响[8]。当药用植物所处的外界环境条件发生了变化，其体内的代谢活动就会受到影响，从而使有效物质的含量发生变化，结果影响到药材的内在质量，因此对中药材实施GAP种植显得尤为重要。另外也说明金樱子在入药前必须经过一些炮制加工，才可以达到较好的临床疗效。

目前国内学者对金樱子已经进行了大量研究，这些工作可以为本研究提供可靠的基础。根、茎、果之间的比较属于同一植株的纵向比较，可消除外界干扰因素；多糖的测定方法来源于药典，科学而稳定。本研究通过测定比较金樱子根、茎、果中主要活性成分——金樱子多糖的含量，跟以往的研究仅局限于药材化学成分、药理作用、临床应用和制剂工艺不同，从新的角度研究解决药材货源不足的现状，具有重要意义。

参考文献

[1] 闵俊，李燕燕，余华．金樱子化学成分、药理作用及临床应用研究进展[J]．环球中医药，2008，1(2)：16-18.

[2] 尹平孙.几种中药材热销品种行情点评[J].特种经济动植，2008，14(8)：24-25.

[3] 席许林，张新国.古老中药方治疗2型糖尿病的秘方[J].中国医药指南，2011，9(5)：147-148.

[4] 刘佩沂，田素英，梅全喜.金樱根研究进展[J].海峡药学，2010，22(1)：98-99.

[5] 赖岳晓，王艳，盘昌盛，等.金樱子根和茎多糖的抑菌作用研究[J].中国药房，2009，20(24)：1857-1858.

[6] 国家药典委员会．中华人民共和国药典[M]．一部．北京：化学工业出版社，2005：153-154.

[7] 罗毅，潘细贵，刘刚，等.苯酚-硫酸法测定多糖含量显色方式的优选[J].中国中医药信息杂质，2005，12(1)：45-46.

[8] 黄坚航.影响中药质量的因素[J].海峡药学，2005，17(3)：189-192.