HPLC法测盐酸左西替利嗪颗粒的含量

洪江游 洪志慧 凌日金 谢清春

HPLC法测盐酸左西替利嗪颗粒的含量

洪江游 洪志慧 凌日金 谢清春

目的建立盐酸左西替利嗪颗粒含量的高效液相色谱测定法。方法采用C18柱，以甲醇-磷酸二氢钠溶液(70∶30)为流动相，流速1ml/min，检测波长230nm。结果在4.98～49.8μg/ml范围内呈线性关系，进样精密度、重复性试验和中间精密度的RSD分别为0.25%、0.49%和0.61%，低中高三个浓度的回收率分别是99.41%、99.55%和99.64%。结论本法可用于盐酸左西替利嗪颗粒含量测定。

盐酸左西替利嗪;HPLC;含量测定

盐酸左西替利嗪是选择性组胺H1受体拮抗制剂，作为新型抗组胺药，主要用于缓解变态反应性疾病的过敏症状，临床上用于治疗变应性鼻炎、荨麻疹、血管神经性水肿等皮肤黏膜过敏性疾病，具有口服吸收迅速，受体选择性高，临床疗效强，副作用小，安全性好等多方面优点［1，2］。其对组胺H1受体的亲和力比西替利嗪高出2倍，是右西替利嗪的30倍，且受体结合时间更长［3］。本文研究了高效液相色谱法测定盐酸左西替利嗪颗粒剂含量的方法。

1 仪器与试剂

岛津LC-10A高效液相色谱仪;Chromstation色谱工作站;电子天平(型号:ALC，d=0.0001)。盐酸左西替利嗪(湖南九典制药有限公司，批号200604J03，含量:99.4%);盐酸左西替利嗪对照品(中国药品生物制品检定所，批号100659-200401);三批盐酸左西替利嗪颗粒(海南中瑞康芝制药有限公司制备，批号:060601、060602、060603);磷酸(分析纯)，甲醇(色谱纯)，水为双蒸水。

2 方法和结果

图1 对照品

图2 样品

图3 阴性对照

2.1 溶液的配制 供试品溶液:取盐酸左西替利嗪颗粒研细粉末适量(约相当于盐酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

阴性对照溶液:取空白辅料适量(约相当于盐酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。对照品溶液:取线性与范围下25μg/ml即得。

2.2 色谱条件与系统适用性 色谱柱:Apollo C18柱(250×4.6mm，5μm);流动相:甲醇-磷酸二氢钠溶液(取 NaH2PO4·2H2O 3.12g加水至1000ml溶解)(70∶30);流速1ml/min 检测波长 230nm;进样量 20μl。

精密量取供试品溶液、阴性对照溶液、对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。同法测定。结果盐酸左西替利嗪保留时间为7.758min，理论板数为5040;空白辅料峰均在4min之前，不干扰测定，见图1、图2和图3。

2.3 线性与范围 精密称取盐酸左西替利嗪25mg，置50ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，再分别精密称取 1、3、5、7、10ml，置 100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。分别精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果线性方程:A=16083C+1136.4，R2=0.9994。盐酸左西替利嗪在4.98～49.8μg/ml浓度范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系。

2.4 进样精密度 取线性与范围项下的3号溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，连续进样6次峰面积的RSD值为0.25%，精密度好。

2.5 重复性试验 取盐酸左西替利嗪颗粒研细粉末适量(约相当于盐酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，平行配制六份，分别精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取105℃干燥2h的盐酸左西替利嗪对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含25μg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算。结果盐酸左西替利嗪颗粒的6份平行样品的含量测定结果的RSD为0.49%，方法重复性好。

2.6 中间精密度 不同分析人(两个人)、不同日期(两天)，取盐酸左西替利嗪颗粒研细粉末适量(约相当于盐酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，平行配制六份，分别精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取105℃干燥2h的盐酸左西替利嗪对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含25μg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，结果不同分析人、不同日期检测盐酸左西替利嗪颗粒样品的含量测定的RSD为0.61%，方法中间精密度好。

2.7 回收率试验 分别精密称取盐酸左西替利嗪20、25、30mg各3份，置1000ml量瓶中，并按处方比例加入辅料，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，平行配制六份，分别精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取105℃干燥2h的盐酸左西替利嗪对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含25μg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积，计算回收率，结果见表1，高中低三浓度的回收率均在98.0% ～102.0%范围内，符合规定。

表1 盐酸左西替利嗪颗粒含量测定回收率试验结果

2.8 溶液稳定性试验 取重复性试验项下样品溶液之一，于室温条件下放置，分别于0、2、4、6、8h测定，结果盐酸左西替利嗪颗粒含量测定溶液在室温放置8h，各时间点峰面积的RSD为0.20%，小于2%，说明在盐酸左西替利嗪颗粒的水溶液8h内稳定。

2.9 含量测定 取本品10袋，倾出内容物，混匀研细，称取细粉适量(约相当于盐酸左西替利嗪2.5mg)，置100ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取105℃干燥2h的盐酸左西替利嗪对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含25μg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，结果见表2。计算公式为:

C对照品:盐酸左西替利嗪对照品溶液的浓度(μg/ml)

C供试品:盐酸左西替利嗪颗粒供试品溶液的浓度(mg/ml)

A对照品:盐酸左西替利嗪对照品溶液主峰面积

A供试品:盐酸左西替利嗪颗粒供试品溶液主峰面积

W:盐酸左西替利嗪颗粒平均装量(g)

表2 三批样品含量测定结果

结论:本品可采用高效液相色谱法进行含量测定。经方法学研究结果表明，方法灵敏度、准确度、重复性、精密度、线性均符合要求。

2.10 含量均匀度 取本品1袋，将内容物置100ml量瓶中，加水适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液，照含量测定项下的方法测定，应符合规定(中国药典2005年版二部附录X E)。三批样品含量均匀度检查结果见表3，三批样品的A+1.8S均小于15.0，含量均匀度符合药典规定。

3 讨论

本文的流动相先后考察过流动相1:甲醇-磷酸二氢钠溶液(取NaH2PO4O2H2O 3.12g加水至1000ml溶解)(75∶25)，结果此条件下，盐酸左西替利嗪出峰较快(约5.5min)。流动相2:庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠0.3g，加水580ml溶解)-乙腈(58∶42)(用稀磷酸调pH至2.4)，结果主峰拖尾较严重，加入三乙胺也不能改善峰的拖尾情况。如将流动相1的比例改为70∶30则出峰时间适宜，约8min，可满足本品分析方法的要求。

表3 盐酸左西替利嗪颗粒含量均匀度检查结果

［1］Clough GF，Boutsiouki P，Church MK.Comparison of the effects of levocetirizine and loratadine on histamine-induced wheal，flar，and itch in human skin.Allergy，2001，56(10):985-988.

［2］张壹.盐酸左西替利嗪.中国新药杂志，2004，13(12):1420-1421.

［3］Gillard M，Van Der Perren C，Moguilevsky N，et al.Binding characteristics of cetirizine and levocetirizine to human H1histamine receptor’s:Contribution of Lys(191)and Thr(194).Mol Pharmacol，2002，61:391-399.

Content detemination of levocetirizine granules by HPLC method

HONG Jiang-you，HONG Zhi-hui，LING Ri-jin，et al.Kangzhi Pharmaceutical Co.LTD of Hainan，Hainan 570311，China

ObjectiveTo establish a HPLC method to determine the content of levocetirizine granules.MethodsC18column was used，menthol alcohol-Sodium dihydrogen phosphate(70∶30)as mobile phase，flow rate at 1ml/min，detection wavelength at 230nm.ResultsIn 4.98～49.8μg/ml was line.Instrument precision，Repeatability test，middle precision was 0.25%，0.49%and 0.61%respectively.Recoveries(low level，middle level，and high level)were 99.41%，99.55%and 99.64%respectively.ConclusionThe assay method can be used to determine content of levocetirizine granules.

Levocetirizine hydrochloric;HPLC;Content determination

570311海南康芝药业股份有限公司(洪江游 凌日金);深圳市红会医院(洪志慧);广东药学院(谢清春)

谢清春