接尘工人血清中人表皮生长因子受体3抗体的表达水平

晋晓飞，郝长付，姚 武

(郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室 河南郑州 450001)

接尘工人血清中人表皮生长因子受体3抗体的表达水平

晋晓飞，郝长付，姚 武

(郑州大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学教研室 河南郑州 450001)

目的:观察人表皮生长因子受体3抗体在接尘工人血清内的表达水平及其与尘肺病的关系。方法:采集159例接尘工人和85例健康对照者的外周静脉血，应用双位点夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HER3-Ab的含量。结果:健康对照组血清HER3抗体含量为(1.29±1.83)mg/L，接尘工龄＜5年组和≥5年组人群血清HER3抗体含量分别为(3.72±7.17)mg/L和(9.96±21.86)mg/L，各组间人群血浆HER3-Ab的差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:自身免疫抗体HER3-Ab的表达水平与接尘有关。

尘肺;抗体:人表皮生长因子受体3抗体

尘肺病是由生产性粉尘引起的肺组织弥漫纤维化为主的全身性疾病，长期以来我国已采取了大量措施来预防、控制生产性粉尘的危害，并取得了一定的成效，但尘肺病目前仍是我国职业病中发病率最高、死亡率较大、对劳动者危害最严重的一类［1］。尘肺病所致的肺纤维化是一个长期慢性的过程，目前尚无将其消除或是逆转的根治方法，只能根据病情进行综合医治以减轻症状、延缓病情的进展。积极预防并尽早的诊断对于提高病人的生存质量及延长寿命尤为重要［2］。矽肺的发病机制目前虽尚无明确定论，为了认清尘肺病的发生发展和演进过程，国内外已有学者提出了多种研究策略［3］。早在六七十年代，有研究者已着手尘肺与机体免疫方面的研究，发现尘肺病患者体内存在多种免疫异常，其以不同的方式参与了粉尘与机体的相互作用，而且矽肺患者机体内存在自身抗体，即发生了自身免疫反应［4，5］。人表皮生长因子受体3(HER3)抗体在胃癌、口腔癌、前列腺癌、乳腺癌等肿瘤中常与 HER2一起出现过度表达［6，7］，参与自身免疫反应，但在肺纤维化方面的研究目前还很少。因此本研究对159名接尘人员和85名非接尘人员的血清的HER3-Ab含量进行了检测，探讨其与尘肺病的关系。

1 材料与方法

1.1 研究对象 中国平煤神马集团体检的、正在接尘的159例男性煤矿工人，年龄20～55岁，平均年龄(34.03±8.30)岁，均为掘进车间井工，接尘工龄1～38年，接尘工龄中位数为5年。根据接尘工龄分为两组:接尘年限 ＜5年组年龄20～44岁，平均年龄为(29.14±5.688)岁，平均年限为(1.81±0.935)年;接尘年限≥5年组年龄22～55岁，平均年龄为(38.86±7.625)岁，平均年限为(13.35±9.736)。对照组:同期体检的男性岗前人群85例，无粉尘接触职业史，均排除心、脑、肝、肾等脏器的纤维化疾病以及免疫性疾病，年龄19 ～40岁，平均年龄为(27.52±4.95)岁。

1.2 样品采集 全部研究对象取清晨空腹静脉血2 ml，静置 30 min后，离心分离血清(1000 r/min，10 min)，置－20℃保存待用。

1.3 血清HER3-Ab的检测 采用双位点夹心酶联免疫吸附法即ELISA法，测定血清自身免疫抗体HER3-Ab的含量，人血清自身免疫抗体HER3-Ab试剂盒由安迪生物科技(上海)有限公司生产，分析仪器为TECAN SUNR ISE REMOTE型酶标仪。操作均严格按照说明书进行，质量控制和定标结果均在要求范围内。

1.4 统计方法 采用SPSS 12.0统计软件包对数据进行统计学处理，计数数据以(中位数±四分位数间距)表示，进行秩和检验，计量数据以四格表形式表示，进行 χ2检验，检验水准为 α=0.05。

2 结果

2.1 不同组别人群血浆中HER3-Ab抗体浓度的比较 接尘组人群按接尘时间进行分组，由于接尘中位时间为5年，所以分为≥5年组和＜5年组。表1可见，各组间人群血浆HER3抗体浓度的差异有统计学意义(P＜0.05)。两两比较可发现，＜5年组人群血浆HER3抗体浓度高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.017);≥5年组人群抗体浓度也高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.017);≥5年组人群血浆抗体浓度均高于＜5年组，且差异有统计学意义(P＜0.017)。

表1 不同组别人群血浆中HER3抗体浓度比较(中位数±四分位数间距)

2.2 接尘组不同年龄工人血清中自身免疫抗体HER3-Ab含量及其与年龄的相关性分析 表2可见各年龄组人群血浆HER3抗体浓度不同，差异有统计学意义(P＜0.05)。两两比较可发现，30～40年组与＜30年组比较血浆HER3抗体浓度无差异，差异无统计学意义(P＞0.017);≥40年组与＜30年组比较血浆抗HER3抗体浓度有差异，差异有统计学意义(P＜0.017);≥40年组与30～40年组比较比较血浆HER3抗体浓度不同，差异有统计学意义(P＜0.017)。

表2 接尘组不同年龄工人血清中HER3抗体含量比较(中位数±四分位数间距)

2.3 吸烟对接尘组血清中自身免疫抗体HER3-Ab含量的影响 采用二元logistic分析方法分析吸烟是否对接尘组的血清中的HER3-Ab含量是否有影响，由表3可见吸烟变量对接尘组的血清中的HER3-Ab含量的影响无统计学意义(P＞0.05)。

表3 logistic方程中的变量

3 讨论

尘肺是一种以肺纤维化为主要病变的慢性疾病，它的发生发展与机体自身内外因素密切相关，纤维化实质上是机体对肺损伤的一种修复机制，与多种纤维化有关的自身免疫抗体密切相关，它们的表达反映了受损害程度的大小，预示了疾病发展的结局，在早期的异常表达亦可做为判断预防控制疾病的预警信息。尘肺患者出现自身抗体，其机理可能与巨噬细胞的吞噬活动有关，煤尘细胞的毒作用使巨噬细胞吞噬煤尘后变性、坏死、崩解。巨噬细胞的自身崩解，使细胞核内多种抗体成分暴漏，产生自身免疫抗体。自身抗体含量的升高可反映机体免疫应答的失调。煤矿工人尘肺和进行性大块肺纤维化的血清学变化显示尘肺患者的自身免疫抗体水平比正常人高的多。本次研究的目的就在于探讨自身免疫抗体HER3抗体在尘肺病早期变化中表达水平的变化及其意义，探讨其做为肺纤维化早期诊断指标的可能性。

当EGFR的胞外区与之相应的配体如EGF等结合后，受体发生二聚化，激活胞内区的RTK，激酶使受体自身或底物蛋白上的酪氨酸磷酸化后引起一系列的信号传导级联反应，主要是通过PI3K途径、MAPK途径、STAT途径等，最终引起DNA的复制、细胞的分裂与增殖等生物效应［6］。因此这次的研究有很强创新性和实用性。本研究结果表明接尘工人血清的HER3-Ab含量高于对照组，这表明，接尘工人血清的HER3-Ab可能与粉尘暴露之间存在一定的关系，有成为粉尘暴露生物监测指标的可能性，但其具体机制尚不明确，仍需进行进一步的研究。同时研究结果显示接尘工人血清中HER3-Ab的含量与接尘工龄之间有关，但是还需要进一步的研究以证实这种相关性的存在，这对于粉尘的暴露及尘肺的诊断有十分积极的意义。接尘工人血清中HER3-Ab的含量与年龄之间有关，与工龄之间的结果一致。但未发现接尘工人血清中HER3-Ab的含量与吸烟之间存在相关性，这需要在以后的研究中收集详细的粉尘暴露资料来阐明。

综上本次研究提示，自身免疫抗体HER3-Ab表达水平与接尘有关，因此具有作为监测粉尘暴露的指标，亦可考虑作为作为早期筛查尘肺高危人群的指标的研究意义。

［1］ 李德鸿.我国尘肺防治工作55年［J］.现代职业安全，2005，(5):26-28.

［2］ Maestrelli P，Guarnieri.Diagnosis of occupational chronic pulmonary diseases［J］.G ital Med Lav Ergon.2010，32(4):1 33-436.

［3］ Okamoto T，Mukai Y，Yoshioka Y，et al.Optimal construction of nonimmune scFv phage display libraries from mouse bone marrow and spleen established to select specific scFvs efficiently binding to antigen［J］.Biochem Biophys Res Commun.2004，323(2):583-579.

［4］ Lee H W，Lee S H，Park K J，et al.Design and validation of a synthetic VH repertoire With tailored diversity for protein recognition［J］.2006，19(5):413-422.

［5］ Richard M，Perreault J，Gane P，et al.Phage-derived monoclonal anti-Lu［J］.Transfusion.2006，46(6):1011-1017.

［6］ Yarden Y，Sliwkowski M X.Untanling the ErbB signalling network［J］.Nat ReV MoI Cell Biol，2001，2(2):127.

［7］ Klapper L N ，Kirschbaum M H，Sela M，et al.Biochemical and clinical implications of the ErbB/HER signaling network of growth factor receptors［J］.Adv Cancer Res，2000，77:25-79.

HER3-Ab serum level in dust exposed workers

JIN Xiao-fei，HAO Chang-fu，YAO Wu
(Department of Occupational Health and Occupational Disease，Public Heath College，Zhengzhou University，Zhengzhou 450001，China)

Objective:To observe the level of HER3-Ab in serum of coal workers，and to discuss the role in pneumoconiosis.Methods:159 exposed workers and 85 healthy subjects were selected.Then use ELISA to detect the serum HER3-Ab of all cases.Results:The serum HER3 antibody of healthy control group，＜5 years exposure group and ≥ 5 years group was(1.29±1.83)mg/L，(3.72±7.17)mg/L and(9.96±21.86)mg/L.There was significant differences in them(P ＜0.05).Conclusion:The expression of HER3-Ab was related to dust exposure.

pneumoconiosis;antibody;HER3-Ab

R 392

B

10.3969/j.issn.1004-437X2012.03.006

2012-08-12;

2012-09-13

国家自然科学基金资助课题(81072278)。

晋晓飞(1985－)，男，河南灵宝人，在读硕士研究生，

研究方向:职业性肺部疾病的防治。

姚武(1962－)，男，教授，博士生导师，E-mail:yaowu@zzu.edu.cn。

1004-437X(2012)03-0274-03