自制外伤药乳膏镇痛抗炎作用试验

刘 鑫，刘万平

（商丘职业技术学院动物工程系，河南 商丘476000）

自制外伤药乳膏由蜂蜜、大黄、延胡索、青木香、红花、旋覆花、乳香、没药等十几味中药组方制备而成，系我院中兽医教研室刘万平教授自制制剂，经多年的临床使用证实，具有活血化瘀、瘀去生新、复通血脉、行气止痛之功效。本试验采用热板法和醋酸扭体法观察镇痛作用；采用大鼠足肿胀模型及小鼠耳廓肿胀模型观察抗炎作用。

1 材料与仪器

1．1 实验动物 Wistar种大鼠、昆明系小鼠，均来源于商丘市医学高等专科学校实验动物中心，试验前适应性喂养7d。

1．2 药物与试剂 6%、12%、18%外伤药乳膏（每100g制剂含原药量分别为6g、12g、18g），由商丘职业技术学院中兽医教研室提供。氟芬那酸丁酯软膏，由沈阳抗生素厂生产（lot10010013）。其他试剂均为分析纯。

1．3 仪器 BS110S电子天平（Sartorius公司生产），数控恒温浴锅Ⅱ（宁波东胜仪器科技有限公司生产）。

2 方法与结果

2．1 镇痛作用试验

2．1．1 自制外伤药乳膏对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响 取体重18～22g健康小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。设空白组，外伤药乳膏分大、中、小剂量组，对照组（氟芬那酸丁酯软膏）。用药前1d，先用8%硫化钠脱掉小鼠腹部长的毛，以备第2天试验用。试验当日，在各小鼠腹部分别涂药，连续给药7d，于末次给药30min后，每鼠腹腔注射0．3%醋酸0．2mL，详细记录各鼠出现每一次扭体反应的时间及20min内小鼠的扭体次数，结果见表1。外伤药乳膏能显著延长小鼠镇痛潜伏期，动物扭体次数随外伤药乳膏浓度的增高而降低，且中、大剂量组分别与对照组和镇痛强度相当，具有较好的镇痛作用。

2．1．2 外伤药乳膏对小鼠热板法致痛的影响 取体重18～22g雌性小鼠，于室温22℃放入在恒温水浴锅预热到55℃±1℃的500mL烧杯中，1只／次，用秒表记录小鼠自投入热板至出现舔后足的时间（s）作为该鼠的痛阈值，如此测定2次，间隔30min，取均值为给药前痛阈值。筛选出痛阈小于30s的小鼠为试验所用。以给药前痛阈值随机分为3组：第1组为外伤药乳膏组（中剂量），将外伤药乳膏按1g／cm2的剂量涂在烧杯底部的基质上（第2组、第3组按同样剂量分别涂氟芬那酸丁酯软膏和赋形剂），把小鼠放在药膏上，让四肢充分与药膏接触。第2组为氟芬那酸丁酯软膏组，第3组为赋形剂，后两组的处理方法均同第1组。3组小鼠接触药物后30、60、90min再分别测定其痛阈值，每次测定完后均将小鼠放在药膏上。结果见表2。表明小鼠足部接触外伤药乳膏60min后可明显延长痛阈值。而在60 min前作用不明显，氟芬那酸丁酯软膏组也是在60 min后出现镇痛作用，两药作用基本相同。该试验表明，外伤药乳膏外用具有一定的镇痛作用。

表1 外伤药乳膏对醋酸致小鼠疼痛的影响（±S）

表1 外伤药乳膏对醋酸致小鼠疼痛的影响（±S）

注：与空白组比较，＊：P＜0．05；＊＊：P＜0．01

组别 剂量（g）第1次扭体反应时间（min） 扭体次数空白组0．5 5．2±4．1 38．14±11．25小剂量组 0．5 8．6±2．3＊ 25．11±14．26＊中剂量组 0．5 8．3±2．1＊ 15．30±11．96＊＊大剂量组 0．5 6．5±2．8 14．70±10．17＊＊对照组 0．5 7．7±3．3 14．98±10．34＊＊

2．2 抗炎作用试验

2．2．1 自制动物外伤药乳膏对蛋清致炎大鼠足趾肿胀的影响 取大鼠50只，雌雄各半，按体重随机分为空白组、外伤药乳膏大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组（氟芬那酸丁酯软膏）共5组，每组10只。试验当日首先用自制容积测定装置测定各组大鼠右后足正常体积（mL），然后给各组动物分别涂药物于右后足，均给药0．3g。30min后，于右后足皮下注射100%新鲜鸡蛋清0．1mL／只，测定注射蛋清30、60、90min的右后足体积，连续3次。结果见表3。外伤药乳膏大剂量组和阳性对照组的足肿胀程度与空白对照组比较差异显著，说明其对蛋清引起的大鼠足肿胀程度有抑制作用。

2．2．2 自制动物外伤药乳膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 取体重25g～30g雄性小鼠50只，按体重随机分为空白组、药乳膏大、中、小剂量及对照组（氟芬那酸丁酯软膏），每组10只，面积3cm×1cm左右，45min后各组以蒸馏水棉球擦去药液，用于棉球擦净，给小鼠右耳两面涂二甲苯0．05mL／只，致肿，左耳作对照。30min后将小鼠脱颈处死，用8 mm直径打孔器在每只动物双耳相同部位打下圆耳片，置于电子分析天平上称重，以左右耳片重之差为肿胀度求出肿胀抑制率。结果见表4。外伤药乳膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀具有明显的抑制作用。

表2 外伤药乳膏对小鼠热板致痛的影响 （±S）

表2 外伤药乳膏对小鼠热板致痛的影响 （±S）

注：与赋形剂组比较，＊：P＜0．05，n＝6

组别 剂量g／（cm2） 给药前痛阈值t／s给药后不同时间痛阈值（t／s）30min 60min 90min赋形剂 1 16．82±4．39 18．18±5．40 17．71±5．12 17．30±5．61外伤药乳膏中剂量 1 17．77±3．95 23．03±5．82 24．03±6．34＊ 25．75±7．43＊氟芬那酸丁酯软膏 1 16．63±4．55 21．89±4．38 23．05±5．41＊ 2 416．00±5．76＊

表3 外伤药乳膏对蛋清致大鼠足趾肿胀的影响 （±S）

表3 外伤药乳膏对蛋清致大鼠足趾肿胀的影响 （±S）

注：与空白组比较，＊：P＜0．05，n＝10。下表同

组别不同时间右足容积v／（mL）致炎前30min 60min 90min空白组2．16±0．56 3．79±0．88 4．61±1．06 4．56±1．19小剂量组 2．01±0．67 3．22±0．63 4．20±0．67 4．18±0．53中剂量组 2．12±0．45 3．16±0．51 3．68±0．46＊ 3．71±0．44＊大剂量组 2．05±0．75 3．14±0．69 3．16±0．60＊ 3．54±0．87＊对照组2．10±0．80 3．14±0．98 3．78±1．05 3．84±0．94

表4 外伤药乳膏对二甲苯所致小鼠耳部肿胀的影响（±S）

表4 外伤药乳膏对二甲苯所致小鼠耳部肿胀的影响（±S）

组别 肿胀度m（mg） 肿胀度抑制率（%）空白组3．68±0．99 －小剂量组 2．66±0．86＊ 27．72中剂量组 2．35±0．64＊ 36．14大剂量组 2．27±0．65＊ 38．32对照组 2．30±0．81＊37．50

3 小结

通过药理试验表明，自制动物外伤药乳膏对二甲苯所致耳廓肿胀、蛋清致大鼠后足、醋酸诱发的小鼠扭体及热板法致痛试验具有抗炎、镇痛作用，这与外伤药乳膏里中药解毒、消肿、活血、止痛、散瘀、泻火、行水功效是一致的。本试验为外伤药乳膏的临床应用及进一步研究提供了可靠依据。

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