氨基比林原料药含量测定方法的研究

温敏 刘景彬 刘永臣

氨基比林原料药含量测定方法的研究

温敏 刘景彬 刘永臣

氨基比林属吡唑酮类解热镇痛药，其通过选择性的抑制下丘脑前部前列腺合成酶，减少前列腺素的生物合成，使体温恢复正常，而实现疗效。目前现行法定标准是用容量分析法来测定氨基比林的含量，但该法终点无明显突跃，难以准确判断。本实验通过紫外分光光度法直接测定氨基比林原料药中氨基比林的含量，其操作简便、快速、可行，通过对两种方法的简单比较说明紫外分光光度法测得的结果准确度较高。

氨基比林;含量测定;紫外分光光度法;容量分析方法

1 氨基比林简介

通用名称：氨基比林(又名匹拉米洞，氨基吡啉)化学结构：

化学名称：

1-苯基-2，3-二甲基-4-二甲胺基-5-吡唑酮

氨基比林属吡唑酮衍生物，其最初是人们在合成抗疟药奎宁基本母核时意外得到的，然后再对它进行结构改造，于1884年合成了安替比林，用于临床，但毒性较大，受吗啡结构改造中有甲氨基的启发，在安替比林结构中4位上引入二甲氨基既为氨基比林，其解热、镇痛作用持久，且对胃无刺激性，曾应用广泛，但由于能引起白细胞减少及粒细胞缺乏症等副作用，现在主要用其复方制剂如复方氨基比林(即安痛定)。目前为降低其毒性进一步改造将氨基比林的4-位氨基氮上的两个氢分别用甲基和次甲基磺酸钠取代，得到安乃近，其解热镇痛作用迅速而强大，尤其对顽固性发热有效，毒性降低，水溶性增大可供注射，但仍引起粒细胞缺乏症，为了增强疗效降低毒性还合成了许多吡唑酮衍生物，如尼芬那宗与氨基比林相比较，镇痛效果好、作用持久，且毒性仅有氨基比林的八分之一。氨基比林为吡唑酮类解热镇痛药，尽管其解热镇痛作用较强，缓慢而持久，消炎抗风湿作用与阿司匹林相似，但因本品能引起骨髓抑制以及能形成亚硝胺致癌物质，故单用制剂已淘汰，现临床常用其复方制剂而且当氨基比林剂量达到5 g时为人体致死剂量。其作用机制主要通过抑制下丘脑前列腺素的合成和释放，恢复体温调节中枢感受神经元的反应性而起退热作用;通过抑制环氧化酶，选择性抑制下丘脑体温调节中枢前列腺素的合成，导致外周血管扩张、出汗而达到解热的作用，其解热作用强度与阿司匹林相似;通过抑制前列腺素等的合成和释放，提高痛阈而起到镇痛作用，属于外周性镇痛药，作用较阿司匹林弱，仅对轻、中度疼痛有效［3］。此外，氨基比林还可抑制局部炎症组织中的前列腺素等炎性介质的合成和释放，稳定溶酶体膜，抑制吞噬细胞的吞噬作用而起到抗炎作用。临床用药剂型一般为片剂、注射剂，复方制剂。

2 仪器、试药及试剂

2.1 仪器

酸式滴定管、Agilent UV紫外-可见分光光度计、移液管、量筒、AL104型电子分析天平、锥形瓶、容量瓶(100 ml、250 ml)、胶头滴管、玻璃棒。

2.2 试药

氨基比林标准品(中国药品生物制品检定所)批号：100503-200301、氨基比林原料药(山东新华制药有限公司)批号：0806484、0806485、0806486。

2.3 试剂

盐酸(天津市化学试剂三厂)批号：090200、硫酸(天津市翔宇化工工贸有限责任公司)批号：071220、甲基橙-亚甲蓝混合指示液。

3 含量测定

3.1 容量分析法［1］

3.1.1 对照液的制备 取水50 ml，加甲基橙-亚甲蓝混合指示液0.15 ml与盐酸溶液(0.5 mol/L)0.05 ml，摇匀即得。

3.1.2 样品含量测定 取各批号的氨基比林原料药约1.0000 g，精密称定，加水40 ml，温热溶解后，放冷，加甲基橙-亚甲蓝混合指示液0.15 ml，用0.5 mol/L盐酸溶液滴定，至溶液的颜色与对照液一致(30秒不褪色为终点)，自消耗盐酸溶液(0.5 mol/L)的体积中减去0.05 ml，即为样品消耗盐酸(0.5 mol/L)的体积。

注：每1 ml的盐酸溶液(0.5 mol/L)相当于115.6 mg的 C13H17N3O

3.1.3 试验结果及数据处理 见表1。

表1 容量分析法测定的相关数据

计算公式：

注：滴定液F值为1.029。空白试验消耗滴定液体积(V0)为0.05 ml

图1 标准曲线绘制

3.2 紫外分光光度法

3.2.1供试品的制备 精密称取氨基比林标准品0.1510 g，以20 mlH2SO4溶液(0.005 mol/L)微热溶解后移至100 ml量瓶中，加蒸馏水至刻度摇匀做为备用液。

3.2.2 测定波长的选择 精密量取备用液1 ml至100 ml量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度约为15 μg/ml氨基比林溶液.用蒸馏水作参比在200～320 nm波长范围内扫描，结果表明，氨基比林在260 nm波长处有最大吸收。故选择260 nm为其测定波长。

3.2.3 标准曲线的建立 精密吸取备用液各1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 m1分别置250 ml量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀。在260 nm波长处测其吸收度，并得标准曲线(见图1)。且经计算R2=0.99994，符合线性要求。

3.2.4 样品的制备及测定 精密称取样品约0.5000 g，置250 ml量瓶中，以 20 mlH2SO4溶液(O.005 mol/L)，微热溶解，加蒸馏水至刻度，再精密量取2 ml置250 ml量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液.以蒸馏水为空白溶液，将适量的供试品置1 cm吸收池中在260 nm波长处测其吸收度即可。

3.2.5 试验结果及数据处理 试验结果及数据见表2。

表2 紫外分光光度法测定的相关数据

计算公式：

注：D值为250×250/2

3.2.6 紫外方法回收率实验 精密称定4.00 mg标准品置250 ml容量瓶中，以20 mlH2SO4溶液(0.005 mol/L)微热溶解，加水稀释至刻度，在260 nm波长下测得结果，数据如表3。

表3

实验结果表明：紫外方法测得回收率结果较好。

3.2.7 紫外方法稳定性实验 取含量测定相下样品溶液室温放置 1 h、2 h、4 h、16 h、24 h 后，分别用紫外分光光度计在260 nm波长下测得数据结果见表4。

表4

实验结果表明：24 h内吸收度基本无变化，紫外方法测得样品稳定性良好。

3.2.8 紫外方法重复性实验 精密称取批号为0806485的氨基比林原料药样品0.5000 g，各平行称取6份，置250 ml量瓶中，以20 mlH2SO4溶液(0.005 mol/L)，微热溶解，加蒸馏水至刻度，再精密量取2 ml置250 ml量瓶中，作为供试品溶液.在260 nm波长处测其吸收度，测得数据如表5。

表5

实验结果表明：紫外方法测得样品重复性良好。

3.2.9 两种方法的比较

表6

实验结果表明：两种方法比较有一定的相对偏差，但两种方法的结果基本符合。

4 实验讨论

4.1 实验证明氨基比林在6～30 mg/ml范围内吸收度均符合朗伯-比尔定律，线性、回收率、稳定性、重复性均较稳定。

4.2 现行法定标准是采用酸碱滴定法测定氨基比林含量，容量分析法测定时一般所用仪器廉价易得，操作简便，快速，方法耐用性高，通常情况下其相对误差在0.2%以下，但其专属性较差，实验的终点不易掌握，因为在用甲基橙-亚甲蓝混合指示液指示终点时，若按理论上与对照品的颜色一致时实际经验得知滴定液已过量，且突跃不明显，导致测定的氨基比林的含量准确度较差。

4.3 紫外分光光度法的测定结果与地方标准的测定结果基本一致或更好。且紫外分光光度法操作简便、快速、准确，说明紫外分光光度法测定氨基比林是一种简便可行的方法。另外，标准对照液和样品液一次性配制，测定结果数据同时测出省时、省力、省药品。标准数据可用计算机长期保存，在实验条件相同时，尤其适合多种批号的样品测定，对生产中药品的质量控制有一定的应用价值。

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Amidopyrine drug study on the determination of the capacity

WENG Min，LIU Jing-bin，LIU Yong-cheng.

The Fourth Hospital affiliated with Medical College of Inner Mongolia，Hohht 010059，China

Amidopyrine is the antipyretic analgesics of pyrazole ketones，which through selective inhibition of prostate anterior hypothalamus synthase to reduce the biosynthesis of prostaglandins.So the body temperature returned to normal and achieve the effect.At present，the existing legal standards of capacity analysis is used to determine the content of aminopyrine，but the end of the act no significant jump，it is difficult to determine accurately.This experiment with the use of Amidopyrine reductive to Fe3+reduced to Fe2+，and Fe2+can be with the o-phenanthroline to form a red complex，followed by direct determination Absorptiophotometry drug in its content of aminopyrine，and two ways to make a simple comparison.

Aminopyrine;Determining content;UV spectrophotometry;The capacity analysis method

014032 内蒙古医学院第四附属医院(一机医院)(温敏 刘景彬 刘永臣);河北钢铁集团矿业有限公司龙烟矿山分公司职工医院(温敏)

目前测定氨基比林的方法主要有化学发光法、滴定法、高效液相色谱法、薄层色谱法等［1，2，3］。检验依据卫生部药品标准《化学药品及制剂》第一册第123页(1989年)其含量测定一般采用水溶液中和滴定法，因氨基比林属弱碱性药物(pH=9)，相对强酸强碱滴定来说反应完成程度较低，滴定突跃不太明显，往往存在较大的滴定误差。经过众多学者研究发现，以及在双波长法测定安痛定注射液中氨基比林的含量的两种方法研究的基础上，用紫外分光光度法对原料药氨基比林含量的测定进行了研究，发现可用吸光光度法测定原料药氨基比林的含量，此法只需测定一个最大吸收波长处的吸收度值即可，方法简便，结果满意［4，5，6，7］。所以本次实验通过容量分析法和紫外分光光度法两种方法测定氨基比林的含量，并对两种方法做一简单比较。