不同抗凝剂对血液分析仪测定参数的影响

聂凤英 焦晓宁

河南省濮阳市中医院检验科，河南濮阳 457000

不同抗凝剂对血液分析仪测定参数的影响

聂凤英 焦晓宁

河南省濮阳市中医院检验科，河南濮阳 457000

目的 探讨乙二胺四乙酸盐（EDTA－K2）、肝素、枸橼酸钠3种抗凝剂对血液各项指标的不同影响。方法2012年2月在本院体检者中随机选择50例为研究对象，分别用3种不同抗凝剂抗凝后，对白细胞（WBC）计数、红细胞（RBC）计数、血红蛋白（Hb）、血细胞比容（HCT）、血小板（PLT）及淋巴细胞（LYM）计数等各项参数的检测结果进行比较、分析和探讨。 结果 WBC计数、RBC计数、Hb、HCT、LYM计数此5项参数在3种抗凝剂组间差异无统计学意义（P>0.05）；与EDTA-K2抗凝组相比，使用肝素和枸橼酸钠时，PLT计数降低，差异有统计学意义（P<0.01）。结论在血常规的检测中，使用EDTA-K2、肝素、枸橼酸钠不同抗凝剂时，WBC计数、RBC计数、Hb、HCT、LYM计数此5项参数在3种抗凝剂组间无差异；肝素和枸橼酸钠使PLT计数降低。

静脉血；抗凝剂；血细胞参数；血小板（PLT）

血常规检验是最常用的检验项目之一，对人体健康状态的评估、疾病诊断有重要的临床意义。随着科学技术的发展，全血细胞分析仪以其结果准确率高、采血量少、分析项目多、分析时间短等优点被普遍应用在血常规检验中[1]。然而，由于医疗条件因素的限制，目前无论是门诊患者还是住院患者的标本都不能及时得到检查，从而使抗凝剂的使用十分普遍[2]。在血细胞计数中广泛使用的是国际血液学标准化委员会（ICSH）认定的乙二胺四乙酸盐（EDTA-K2），但不同的抗凝剂对血液各项指标的影响是不同的[3]。在本次试验中，笔者采用EDTA-K2、肝素及枸橼酸钠3种抗凝剂。选择了白细胞（WBC）计数、红细胞（RBC）计数、血红蛋白（Hb）、血细胞比容（HCT）、血小板（PLT）及淋巴细胞（LYM）计数等各项血细胞参数的检测结果进行比较、分析和探讨。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2012年2月在本院体检者中随机选择50例，采集空腹静脉血6 mL分别注入EDTA-K2、肝素、枸橼酸钠抗凝管中各 2 mL，室温保存 2 h 后送检，分别测定 WBC、RBC、Hb、HCT、LYM、PLT各项血细胞参数，平行测定3次，取平均值。

1.2 主要仪器与试剂

XT-1800i血细胞分析仪及其配套试剂（溶血素SYS-FBA、溶血素SYS-SLS、溶血素SYS-4DL、溶血素SYS-4DS）。

1.3 统计学分析

用SPSS 18.0统计软件包进行分析，各组数值变量资料采用±s表示，组间比较采用配对t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

50例标本经软件分析：WBC计数、RBC计数、Hb、HCT、LYM此5项参数在3种抗凝剂组间差异无统计学意义（P>0.05）；与EDTA-K2抗凝组相比，使用肝素和枸橼酸钠时，PLT计数降低，差异有统计学意义（P<0.01）。具体结果见表1。

3 讨论

目前三分类的半自动血液分析仪多采用电阻抗法进行血细胞分类和计数，根据血细胞相对非导电性质悬浮在电解质溶液中的细胞颗粒在通过计数小孔时，可引起电阻的变化为基础，对血细胞进行计数和体积测定[4]。

表1 不同抗凝剂血细胞参数测定结果统计值（±s）

表1 不同抗凝剂血细胞参数测定结果统计值（±s）

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五分类的全自动血液分析仪则采用了多种技术相结合，多种参数共同判定的技术手段，对血细胞特别是WBC的计数和分类的准确性有了很大提高[5]。测WBC时采用了核酸荧光染色技术配合激光流式分析系统，避免了传统三分类血细胞仪器中，因抗凝剂不同引起PLT的聚集被当成LYM计数，导致PLT下降而引起WBC和LYM比例显著上升的现象。故在本实验中不同的抗凝剂对WBC计数几乎无影响[6]。

RBC计数是一个常规的检测项目，大多数抗凝剂对RBC形态影响都有限，不同抗凝剂对红系结果影响不大（P>0.05），故在检测血气分析、血液黏度或其他实验中，需同时测RBC及HCT时，可以用肝素或枸橼酸钠抗凝[7]。任何类型、档次的全血细胞分析仪，Hb测定原理都是相同的，即溶解RBC，释放Hb进行测试。本研究也证实，不同的抗凝剂对Hb的检测值之间的差异无统计学意义。

目前广泛使用的抗凝剂是ICSH认定的EDTA-K2为血细胞分析检测的抗凝剂。它能有效结合血液中的钙离子，通过膜离子通道进入PLT膜内。由于它螯合作用要比枸橼酸钠络合钙离子作用强，能更好地防止血液中PLT因各种因素而发生凝集，对PLT计数影响较小，有较好的稳定性。

肝素抗凝主要是抑制凝血活酶与凝血酶形成，并激活纤溶酶而发挥作用。肝素能引起PLT聚集及肿胀，过量的肝素可导致PLT破坏，对PLT计数影响最大[8]。聚集的PLT通过微孔，由于体积较大，不易被识别，因此与EDTA抗凝剂比较，用肝素和枸橼酸钠抗凝时，PLY计数减少，差异有统计学意义（P<0.05）。

枸橼酸钠呈碱性，可与Ca形成可溶性螯合物，其抗凝性弱，易使PLT聚集而致总数减少，差异有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，EDTA可使离体后的PLT离散，抑制PLT聚集，使之成为一个颗粒或细胞通过微孔，而肝素和枸橼酸钠均无此作用。五分类血液分析仪检测PLT时，应用鞘流电阻抗原理：当PLT体积大或聚集成较大颗粒通过微孔时，仪器只识别颗粒大小而不能识别颗粒性质，被误认为LMY计数，某些PLT也会被误认为小红细胞而不纳入PLT计数范围，使PLT假性减低。本实验结果显示，EDTA-K2抗凝血的PLT及其参数的值分别高于其他两种抗凝血，差异有统计学意义（P<0.01）。

[1]刘红军.药物治疗肝硬化对抗凝血测定白细胞总数及形态的影响[J].中国当代医药，2010，17（34）：82.

[2]孙杨.抗凝剂EDTA致PLT假性减少[J].检验医学与临床，2008，5（8）：504.

[3]邹鸿燕.抗凝剂对血液检验结果的影响[J].中外健康文摘，2012，9（4）：41-42.

[4]吴晓蔓.临床检验基础与临床实验指导[M].北京：人民卫生出版社，2007：23-26.

[5]叶应抚，王毓三.全国临床检验操作规程[M].南京：东南大学出版社，1991：65-68.

[6]方蓉，黄宇烽，郑均，等.抗凝剂浓度不同血液的血细胞计数仪分析结果[J].临床检验杂志，2001，19（2）：105-106.

[7]许德英，常永超，张淑珍，等.4种抗凝剂对血液分析仪计数结果的影响[J].洛阳医专学报，2001，19（2）：156-157.

[8]马雨东.血细胞分析仪测定血小板时抗凝剂等影响因素分析[J].检验医学与临床，2010，7（11）：189-191.

The influnce of different anticoagulants on blood analyzer determine parameters

NIE Fengying JIAO Xiaoning
Department of Clinical Laboratory,Hospital of Traditional Chinese Medicine in Puyang City,He′nan Province,Puyang 457000,China

Objective To explore the different influence of three anticoagulant agent of EDTA-K2,heparin,folic acid sodium to the index of blood.Methods Fifty cases with medical examination in our hospital from February 2012 were randomly chosen as the research object.The parameters testing results of white blood cells(WBC)counting,red blood cell count(RBC),hemoglobin(Hb),red blood cell deposited(HCT),platelet(PLT)and lymph cells(LYM)count,and so on,were compared,analyzed and discussed after administration of three different anticoagulants,respectively.Results The differences of five parameters of WBC count,RBC count,Hb,HCT,LYM count between three anticoagulant agent groups were not statistically significant(P>0.05);and compared with EDTA-K2anticoagulant group,PLT count reduced,the difference was statistically significant(P<0.01)with the use of heparin and folic acid sodium.Conclusion In the blood detection,WBC count,RBC count,Hb,HCT,LYM count between the three kinds of anticoagulant EDTA-K2,heparin,sodium citrate has no difference;PLT count decreases in heparin and sodium citrate.

Venous blood;Anticoagulants;Blood cells parameters;Platelet(PLT)

R446.11

A

1674-4721（2012）08（b）-0140-02

2012-05-04 本文编辑：郭静娟）