毛细管气相色谱法测定海参口服液中甲基汞的含量

鲁 刚，宗万里

（威海市产品质量监督检验所，山东威海 264209）

汞在自然界中，能被动植物富集，经生物转化作用而转变为毒性更大的甲基汞，通过食物链进入人体后，对机体产生毒性作用。甲基汞是一种脂溶性化合物，易经消化道、呼吸道、皮肤黏膜吸收；进入血液后，除与血浆蛋白结合外，大部分与血红蛋白结合，由血液逐渐向器官分布；在体内代谢成汞离子而发挥毒性作用。由于甲基汞与巯基的高亲和性和有效的肠肝循环使甲基汞不易排出，而在体内蓄积。甲基汞中毒是以神经系统为主的全身性损害[1]。我国现行国家标准GB 2762—2005《食品中污染物限量》中对海参口服液中甲基汞的残留量有一定要求[2]，因此对海参口服液中的甲基汞的快速准确检测方法的研究十分必要。测定甲基汞的检测方法有气相色谱法[3-8]、液相色谱串联原子荧光光度计法[9-10]、液相色谱串联电感耦合等离子体质谱法[11]。本文以弱性毛细管柱DB-5分离测定中海参口服液中甲基汞的残留量，前处理简单，所使用试剂对实验人员的健康危害小，灵敏度高，甲基汞出峰时间快，是一种准确、可靠、快速的分析方法。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

气相色谱仪：GC2010型，带电子捕获检测器（ECD），日本岛津公司；分析天平：FC204型，精度为0.1mg，上海精密科学仪器有限公司；氯化甲基汞标准品：10.0μg/mL，2mL/瓶，环境保护部标准样品研究所；毛细管色谱柱：DB-5(弱极性，30m×0.53 mm×0.5μm)，J&W Scientific；氯化铜：分析纯，天津市标准科技有限公司；甲苯：分析纯，烟台市双双化工有限公司；浓盐酸:优级纯，天津市耀华化学试剂有限责任公司；氯化铜溶液（42.5g/L）：称取8.5克氯化铜加水定容至200mL。盐酸溶液（1+4）：量取100mL浓盐酸，加水400mL，混匀。

1.2 色谱参考条件

色谱柱：毛细管色谱柱D B-5 (弱极性，30m×0.53 mm×0.5μm)；载气（氮气）流速为10mL/min，恒定流速控制；WBI进样口温度:200℃；柱温：100℃保持2min，以5℃/min升至230℃； 检测器温度：300℃，尾吹50mL/min，检测器电流：0.5nA；进样方式:直接注入；进样量：1μL。

1.3 溶液配制

1.3.1 标准溶液的配制

分别精密量取0.1、0.2、0.4、0.5、1.0mL的甲基汞标准溶液（10.0μg/mL）至10.0mL容量瓶中,用甲苯稀释至刻度,得甲基汞浓度为0.1μg/mL 、0.2μg /mL、0.4μg /mL 、0.5μg /mL、1.0μg /mL的系列混合标准溶液。每个浓度取1μL直接注入气相色谱仪进行分析。

1.3.2 供试品溶液的配制(样品前处理)

准确称取5.0g海参口服液样品加入到30mL具赛刻度管中，加入2mL氯化铜溶液（42.5g/L），充分振荡摇匀，再加入5mL盐酸溶液(1+4)置于30mL具塞刻度试管中，充分振荡摇匀、静置30分钟后，再加入甲苯5mL，充分振荡摇匀，静置分层后，吸取上层提取液1μL注进气相色谱仪进行分析。

2 结果与讨论

2.1 色谱图

在1.2色谱条件下, 得到氯化甲基汞标准样品、空白样品、空白加标样品的色谱图, 如图1所示, 氯化甲基汞保留时间分别为1.7分钟左右，峰型尖锐，出峰时间快，有效缩短分析时间。

2.2 样品前处理

Cu2+能与组织中结合的甲基汞交换，在样品中加入氯化铜与盐酸溶液，可以把样品中的甲基汞转移到盐酸溶液中，最后再加入甲苯能把氯化甲基汞萃取到甲苯溶液之中[8]。本文在甲苯与苯常用的两种有机溶剂之间选择甲苯是因为甲苯的毒性相对苯要小的多。

2.3 标准曲线和最低检出限

在实验条件下，以峰面积y为纵坐标、质量浓度c/(μg/ml)为横坐标绘制标准曲线，得线性方程，以基线噪声3倍峰面积对应的质量浓度为检出限(RSN=3)[12]，回归方程、相关系数及检出限见表1。

表1 回归曲线的基本参数Table 1 Regression equation

2.4 精密度和加标回收试验

图1 各样品的色谱图Fig.1 Chromatography of each sample

取不含甲基汞的海参口服液空白样品进行加标回收试验，向5.0g海参口服液样品中分别添加10.0μg/mL甲基汞标准溶液0.05 mL、0.1mL、0.25mL即样品中甲基汞含量为0.1mg／kg 、0.2mg／kg、0.5mg／kg。按上述提取步骤进行提取，重复6次。按1.2色谱条件进行测定，精密度和回收率计算结果列于表2。

表2 按照本方法样品添加回收和精密度实验（n=6）Table 2 Spiked recovery and precision by this method(n=6)

3 结语

本实验采用大口径弱极性毛细管气相色谱法对海参口服液中甲基汞的含量进行测定, 并进行了方法学考察。实验结果表明本方法前处理简单、出峰时间快, 灵敏度高，方法可行, 结果准确。适用于海参口服液中甲基汞的检测，在实际的检测工作中具有一定的参考价值。

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