不同水平的亚硒酸钠对公鸡组织硒沉积及血液抗氧化能力的影响

■姚晓磊 汤贝贝 杜亚丽 刘雪雪 李彦霖 蔡俊国 石 磊

（山西农业大学动物科技学院，山西太谷 030801）

硒最初被列为一种有毒物质，直到1957年才被认识到是一种机体必需微量元素。在动物体内，硒作为谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性中心，维系着组织的抗氧化防御体系的功能。据报道，缺硒可使动物的抗氧化能力下降，使动物受到氧化应激,诱发各种疾病，如家禽肌肉营养不良、渗出性素质、胰腺变性、种蛋的受胎和孵化率降低等，这说明硒在禽类的生产中起着非常重要的作用。研究表明，补硒能防治动物肝脏疾病、保障机体健康、提高畜禽产品质量。据报道，日粮中添加硒能够改善蛋鸡肠道菌群平衡，提高种蛋的孵化率，对提高蛋鸡的采食量、产蛋率、鸡体重及蛋中硒含量等。这说明硒在禽类的生产中起着非常重要的作用。因此，本试验通过在公鸡日粮中添加不同水平亚硒酸钠，探讨硒在公鸡组织中的沉积和血液抗氧化能力的变化规律，为硒在家禽生产中的应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

选取80只体重接近、健康无疾病的海兰白成年公鸡，随机分成4组，每组20只鸡，之后按免疫程序严格免疫。对照组饲喂基础日粮；硒处理组分别在基础日粮中添加0.5、1、2 mg/kg的亚硒酸钠。本试验在山西农业大学动物科技学院实验站进行。

1.2 基础日粮

参照美国NRC(1994)禽类饲养标准，配制玉米-豆饼型基础日粮，其原料配方及营养水平见表1。

1.3 饲养管理

本试验共50 d，试验前，对所有的试验鸡进行驱虫，圈舍进行消毒。以基础日粮预饲10 d后，开始饲喂相应的试验日粮，正式试验期40 d。分别在早9:00和晚19:00定量饲喂试验公鸡，自由饮水，且在试验期保证鸡舍通风。

1.4 样品采集和处理

试验结束时，采用颈部放血法进行采血。迅速解剖分别摘取鸡的心、肝、脾、肺、肾和睾丸，然后对所摘取的组织进行样品的采集。采集的样品均置于冰箱中冷冻保存。

表1 基础日粮组成及营养水平（干物质基础）

1.5 测定指标及方法

1.5.1 硒含量的测定

硒含量的测定采用简化的酸消化法进行处理。各取组织1 g和血液1 ml，分别置于三角瓶和加有抗凝血的三角瓶中，然后各加入5 ml浓硝酸，盖小漏斗冷消化过夜，次日加入1 ml双氧水，置于电热板上90℃加热1 h，再调至130℃加热至溶液变为清亮无色，冷却后移至50 ml容量瓶中，定容至刻度后用原子荧光光度计（AFS-230E）进行检测。

1.5.2 血液抗氧化酶活性的测定

血液中的GSH-Px活性、SOD活性、MDA含量和T-AOC采用化学法进行测定，测定所使用的试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.6 数据处理

用SPSS 13.0统计软件对所测定的数据进行方差分析，然后通过Duncan's法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 不同水平的硒对公鸡组织和血液硒含量的影响（见表2）

表2 不同水平亚硒酸钠对鸡血液和组织硒含量的影响（mg/kg）

从表2可看到，血液和各组织硒含量随日粮硒含量的增加而升高，除心肌组织以外，各组之间差异显著（P＜0.05）；硒处理组各个组织中硒含量均显著高于对照组（P＜0.05）；在硒处理组中，血液、肝脏、脾、肺、肾和睾丸组间差异显著（P＜0.05），而心脏组织中0.5 mg/kg组和1 mg/kg组间差异不显著（P＞0.05）。

2.2 不同硒水平对血液中抗氧化酶活性的影响（见表3）

表3 血液抗氧化能力测定

从表3可见，在血液抗氧化体系的各个指标中，除了GSH-Px的活性和MDA含量以外，各组之间差异显著（P＜0.05）；在硒各处理组中，随着鸡日粮中硒含量的增加，血液中GSH-Px活性、SOD活性和T-AOC有下降趋势，除了GSH-Px活性外，其余均差异显著（P＜0.05）；0.5 mg/kg组中的GSH-Px活性均高于0、1、2 mg/kg组，其中0.5 mg/kg组与1 mg/kg组差异不显著（P＞0.05）；0.5 mg/kg组中T-AOC和SOD活性均分别显著高于1 mg/kg组和2 mg/kg组；对照组中的MDA含量显著高于硒处理组（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 不同水平的亚硒酸钠对公鸡组织硒含量的影响

诸多研究表明，适量的硒是动物健康生长发育、维持特定生产性能以及参与机体的抗氧化防御等所必需的。本研究发现，日粮中添加不同水平的亚硒酸钠均能显著提高公鸡血液、肝脏、脾、肺、肾脏和睾丸中的硒含量，这些组织器官硒含量随着硒添加水平的升高而升高。潘翠玲等(2010)、王海宏等(2003)和R.L.Payne等(2005)报道，在鸡的日粮中添加酵母硒和亚硒酸钠均能显著提高鸡的肝脏、肾脏和心肌硒含量；吴东等(2013)研究发现，高硒日粮对蛋鸡的产蛋量、蛋重、蛋壳厚度无显著提高，但蛋中的硒含量显著提高。Leeson等(2008)报道，与不添加硒的鸡相比，添加硒能显著提高鸡肝和肌肉组织的硒含量，且日粮中硒水平越高，这些组织硒含量也较高。同时，研究者又在肥育猪、山羊、羯羊中得到相似的结果。张乙山等(2008)报道，在肥育猪的日粮中添加亚硒酸钠，得出在肝脏和肾脏中硒含量显著升高，且得出较适宜的添加量为0.8 mg/kg。曹少先等(2005)研究结果也表明，补适量的硒对山羊的生长、提高羊肉含硒量具有显著效果，但硒含量过高，反而会影响羊肉的品质。石磊等(2012)对黎城大青羊研究也发现，母羊初乳和常乳及血液的硒含量随着母羊日粮硒含量的增加而逐渐升高，同时硒元素从母体的胎盘转移给后代，使后代的血液中的含硒量也随之增加。此外，本试验也得出，添加同等水平的亚硒酸钠，硒在肝脏、睾丸和肾中的沉积比其他的组织多，脾和肺中的沉积量次之，心脏中的最少。

3.2 不同硒水平对血液抗氧化能力的影响

血液中GSH-Px、SOD活性、MDA含量是反映机体抗氧化能力的重要指标。机体不同组织的总抗氧化能力（T-AOC）是由酶促和非酶促抗氧化体系共同维系的。酶促抗氧化体系功能的发挥主要依赖GSH-Px、SOD、过氧化氢酶（CAT）以及谷胱甘肽还原酶等。非酶促抗氧化体系功能的发挥主要依赖维生素E、胡萝卜素、维生素C、尿酸、半胱氨酸、蛋氨酸及铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。本研究发现,日粮中添加不同水平的亚硒酸钠能显著提高海兰白公鸡血液中GSH-Px和SOD活性。张习文等(2010)等研究发现，在肉鸡日粮中添加无机硒，提高了其GSH-Px和SOD活性，同时又降低了后代的死亡率和料重比。Hag等(1996)研究发现，在肉种鸡饲料中将硒和维生素E结合添加可使胚胎肝脏GSH-Px活性增加,进而影响子代机体抗氧化功能。但是本试验也发现，随着日粮中硒含量的增加，GSH-Px和SOD的活性开始下降，且下降的幅度较对照组小，这一结果与Mahan等(1999)的研究结果一致。此外，硒处理组中，血液中的MDA含量与硒含量呈正相关。究其原因，可能是由于过量的硒导致自由基的生成超过了抗氧化系统的中和能力，引起了脂质过氧化反应，从而使机体的抗氧化系统激活，产生抗氧化酶来抑制脂质过氧化。这种机制可能是机体对外界刺激的一种适应性调节。值得指出的是，对照组的MDA含量显著高于4 mg/kg，这说明硒缺乏更容易导致自由基的产生，使组织发生脂质过氧化反应。许多研究也得到了与本试验类似的结论。

本研究发现，日粮中添加亚硒酸钠可提高蛋鸡血液中T-AOC，而且与日粮中硒含量的多少呈正相关。这一结论与前人在鸡中的报道一致。苏传福等(2008)研究表明，在草鱼的日粮中添加硒能够很大程度的提高T-AOC，进而改善鱼的肉质。分析其原因，一方面可能是因为添加硒提高了相关组织的GSH-Px和SOD的活性，另一方面可能是硒与维生素E有协同作用，添加硒有利于维生素E抗氧化功能的发挥；从而使得血液有较高水平的T-AOC。但要确定具体是哪一种机制，还需要进一步研究。本试验通过在公鸡日粮中添加不同水平亚硒酸钠，得出适量的硒可以提高鸡组织和血液中的硒含量，也可以提高血液的抗氧化能力，且提倡适宜的浓度为0.5 mg/kg，为硒在以后的禽类生产中进一步研究提供科学的实验依据。

（参考文献23篇，刊略，需者可函索）