HPLC法测定风湿马钱片中士的宁的含量

刘海洋王冰冰

HPLC法测定风湿马钱片中士的宁的含量

刘海洋1王冰冰2

（1吉林省白山市食品药品检验所，白山134300；2吉林省通化市食品药品检验所，通化134001）

建立风湿马钱片中士的宁含量HPLC测定法，用C18色谱柱，流动相：乙腈-0.01mol／L庚烷磺酸钠与0.02mol／L磷酸二氢钾等量混合溶液（10%磷酸调pH值2.8）（23∶77），检测波长：254nm。士的宁在0.0247～0.2223μg范围内，线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为101.16%，RSD=1.56%。

风湿马钱片；士的宁；HPLC

风湿马钱片由马钱子粉、僵蚕、乳香、没药、全蝎等九味药组成，本文采用HPLC法测定士的宁含量，考察了方法的精密性、重现性、准确性，结果表明该法准确、可靠、重现性好，可用于风湿马钱片的质量控制。

1 仪器与试剂

LC-2010AHT型液相色谱仪，紫外检测器，CLASSVP工作站。UV-260型紫外分光光度计，电子天平AB265-S、BS110S。士的宁对照品（批号：110715-200212，中国药品生物制品检定）。乙腈为色谱纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：依利特C18（200mm× 4.6mm5μm），流动相：乙腈-0.01mol／L庚烷磺酸钠与0.02mol／L磷酸二氢钾等量混合溶液（10%磷酸调PH值2.8）（23∶77），流速1.0ml／min，检测波长254nm，进样量5μl，理论塔板数按士的宁峰计算不低于6000。

2.2对照品溶液的制备精密称取士的宁对照品15mg，置50ml量瓶中，加三氯甲烷至刻度，再精密吸取1ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得。

2.3供试品溶液及阴性对照溶液的制备取本品20片（除去包衣），研细，精密称取约1g，置具塞锥形瓶中，加氨水2ml，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，静置24小时，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，分取三氯甲烷提取液，弃去初滤液，精密量取续滤液3ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4线性范围的考察吸取士的宁对照品溶液1、3、5、7、10μl，分别注入液相色谱仪，以进样量和峰面积积分值进行回归，得到回归方程Y=3568717X-13296（r= 0.9999）。结果表明线性关系良好，线性范围为0.0247～0.2223μg。

2.5稳定性试验取样品溶液，室温放置，每隔一定时间注入液相色谱仪中，以峰面积为指标。结果，RSD= 0.62%，表明供试品溶液12小时内基本稳定。

2.6精密度试验取对照品溶液，连续5次进样各5μl，依法操作，结果，RSD=0.88%，表明仪器精密度良好。

2.7重复性试验取同一批样品，依法独立测定5次，测得其平均含量为0.90mg／片，结果RSD=0.93%，表明重现性良好。

2.8回收率试验精密称取已知含量供试品5份，分别精密加入对照品溶液（0.018mg／ml）25ml，按供试品溶液方法制备，依法测定，计算回收率，结果见表1。

2.9样品含量测定依2.3方法取5批样品进行测定，结果见表2。

表1 回收率试验结果

3 讨论

分别采用了①三氯甲烷50ml与浓氨试液2ml，密塞，称定重量，放置24小时；（含量为0.90mg／片）。②精密加入氢氧化钠试液3ml，放置30分钟，再精密加入三氯甲烷20ml，称定重量，加热回流2小时（含量为0.84mg／片）。结果方法①提取的充分，除杂效果好，故选此方法。

表2 样品中士的宁含量测定结果

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.07.101

1672-2779（2013）-07-0153-02

张文娟

2013-03-24）