五藤痛风饮对急性痛风性关节炎大鼠模型IL-1β、NO的影响

徐 静 王晓璐 郭 慧 李 慧 梁 华*

（黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040）

五藤痛风饮对急性痛风性关节炎大鼠模型IL-1β、NO的影响

徐 静 王晓璐 郭 慧 李 慧 梁 华*

（黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040）

目的 本实验研究五藤痛风饮对高尿酸血症并急性痛风性关节炎模型大鼠的IL-1β、NO指标的影响。方法 将Wister大鼠60只随机分为6组，分别为空白对照组、模型对照组、五藤痛风饮高剂量、五藤痛风饮中剂量、五藤痛风饮低剂量、西药对照组。每天给大鼠喂特制的酵母饲料，同时灌胃给腺嘌呤和治疗药各1次，连续给药7d。于第5天除空白组外其余大鼠按照国外Coderre等经典方法略作改进造模，第7天给药后采血、取关节液和滑膜，比较6组IL-1β、NO方面的变化。结果 五藤痛风饮高、中剂量组均可降低实验大鼠的IL-1β水平，与模型组对照组比较，高剂量P＜0.01有极显著差异，中剂量P＜0.05有显著差异。结论 五藤痛风饮可以降低高尿酸血症并急性痛风性关节炎模型大鼠的IL-1β、NO的分泌，对关节有治疗和保护作用。

急性痛风性关节炎；尿酸钠；IL-1β；NO

痛风是由尿酸钠结晶沉积在关节周围而引起的炎性反应，高尿酸血症是其表现的主要特征。随着人们生活水平的提高，高嘌呤、高蛋白食物摄入和饮酒量的增多，痛风的发病率也明显上升。正确的使用中药方剂既能有效的降低尿酸含量和炎症因子的水平，又能保护肾脏减少不良反应。

1 实验材料与方法

1.1 实验材料

①动物：Wister清洁级大鼠60只，体质量200g。北京维通利华实验动物技术有限公司提供。②药物。五藤痛风饮：忍冬藤、海风藤、鸡血藤、络石藤、青风藤、穿山龙、土茯苓、威灵仙等饮片组成。按比例配，加水煎煮，浓缩成浓度为7.2g/mL（高剂量用量）。阳性对照药：秋水仙碱（西双版纳版纳药业有限责任公司），每片含秋水仙碱0.5mg，批号120313。配制成0.03mg/mL。尿酸钠：SIGMAALDRICH公司，规格：5g/瓶，CAS：1198-77-2。配制成25mg/mL。腺嘌呤：SIGMA公司，制成10mg/mL的乳浊液，现用现配。特制酵母饲料：酵母干粉（英国OXIOD公司）与普通大鼠饲料混合，制成含量为10%的酵母饲料。氯化钠注射液：500mL/瓶，批号：120517A3，哈尔滨三联药业有限公司提供。③试剂与仪器。试剂盒：NO、白介素-1β（IL-1β）ELISA试剂盒均由RD公司提供。仪器：KDC-40低速离心机、酶标仪、KQ-500E型医用超声波清洗器。

1.2 实验方法

1.2.1 试剂的制备：尿酸钠溶液的制备：取250 mg尿酸钠晶体颗粒加入9mL生理盐水，1mL吐温80加热搅拌，制成浓度为25mg/mL的尿酸钠溶液。

1.2.2 动物分组：将Wister清洁级大鼠60只在相同环境条件下饲养2周，适应环境后随机分为6组，分别为空白对照组、模型对照组、阳性药对照组、五藤痛风饮高剂量、五藤痛风饮中剂量、五藤痛风饮低剂量。模型制备：除空白对照组外，每天各组大鼠喂特制的酵母饲料，同时上午定点按10mL/kg的剂量灌胃，即腺嘌呤和治疗药各2mL各一次，连续给药7d。于第5天除空白组外其余各组大鼠按照国外Coderre等经典方法[1-5]略作改进造模，即给药后30分钟，立即以乙醇消毒局部，选大鼠右踝关节外侧后方为穿刺点，针口斜面朝前方向与胫骨成45度夹角刺入踝关节腔，以6号针头向关节腔一次性注入25mg/ mLMSU溶液0.2mL，以关节囊对侧膨起为注入标准。第7天给药后30分钟后，10%水合氯醛麻醉，颈动脉取血，脱颈处死大鼠后取肝脏、肾脏和踝关节滑膜组织，制备血清和组织匀浆-70℃保存待测[6]。

1.2.3 数据处理与统计分析：用SPSS 13.0统计软件进行数据分析。所有计量资料用（）表示。多组间均数比较采用单因素方差分析，两组间均数比较采用t检验。

2 实验结果

2.1 对血清中白介素-1β（IL-1β）的影响

由表1可见，模型对照组IL-1β的水平明显高于空白对照组，具有极显著差异（P＜0.01），说明造模成功。五藤痛风饮高、中、低剂量组和阳性对照组IL-1β的水平均低于模型对照组。其中，阳性对照组和高剂量组具有极显著性差异（P＜0.01），说明两组均有明显抑制炎症因子IL-1β的分泌。中剂量组与模型对照组比较有显著性差异（P＜0.05），但没有高剂量组效果明显。

2.2 对血清中一氧化氮（NO）的影响

由表1可见，模型对照组NO的水平也明显高于空白对照组，具有极显著差异（P＜0.01），说明造模成功。五藤痛风饮高、中、低剂量组和阳性对照组NO的水平均低于模型对照组。其中，阳性对照组和高剂量组具有极显著性差异（P＜0.01），说明两组均有明显降低NO的含量。中剂量组与模型对照组比较有显著性差异（P＜0.05），但没有高剂量组效果明显。

3 讨 论

痛风又称“高尿酸血症”，是由于嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄障碍所致的代谢性疾病。主要表现为急性关节炎反复发作、痛风石形成和关节畸形，严重者可导致骨关节病变和关节活动障碍与畸形，以及在病程后其出现肾尿酸结石和痛风性肾实质病变[7-8]。目前有些报道已经证实，急性痛风性关节炎因子是MSUC，当MSUC沉积到关节周围时，可诱使炎症细胞聚集到其周围发生吞噬反应，且吞噬细胞破裂释放出多种致炎因子，如白介素-1、白介素-6、白介素-8、NO、TNF-α、LTB4等[9]。快速降低或抑制这些因子的分泌，使炎症得到缓解，从而有效的治疗急性痛风性关节炎这一疾病。本实验所用的五藤痛风饮是临床常用方，具有利水渗湿、祛风通络、清热解毒、消肿止痛指之功。为进一步阐明五藤痛风饮抗炎的药理作用，本实验研究了其对急性痛风性关节炎模型大鼠的影响。实验结果表明，五藤痛风饮有抑制急性痛风性关节炎大鼠血液中细胞因子IL-1β、NO的分泌和局部血管扩张，从而降低炎性反应保护关节[10]，为临床提供参考依据。见表1。

[1] CoderreTJ,Wall PD.Ankle joint urate arthritis in rat:analternativeanimal model of arthritis to that produced by freund sadjuvant. [J] Pain,1987,28(3):379.

表1 五藤痛风饮对痛风性关节炎大鼠血清NO、IL-1β的影响（n=10，）

表1 五藤痛风饮对痛风性关节炎大鼠血清NO、IL-1β的影响（n=10，）

注：与正常组比较P＜0.05为显著性差异，用Δ表示，P＜0.01为极显著性差异，用ΔΔ表示；与模型组比较P＜0.05为显著性差异，用*表示，P＜0.01为极显著性差异，用**表示

组别数量(n) 剂量IL-1β(pg/mL)NO(umol/l)空白对照组10—51.33±13.888.66±2.28模型对照组10—101.32±18.78ΔΔ13.67±2.88ΔΔ五藤痛风饮高剂量107.2g/mL70.79±17.54**10.09±1.35**五藤痛风饮中剂量103.6g/mL81.74±18.37*11.22±1.46*五藤痛风饮低剂量101.8g/mL90.56±15.4712.27±1.95阳性对照组100.03mg/mL68.32±16.90**9.65±1.92**

[2] Coderre TJ,Wall PD.Ankle joint arthritis in rats:provide ausefull tool for the evaluation of analgesis and anti-arthritisagents[J]. Pharm Biochern Be-hav,1988,29(3):461.

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R593.22

B

1671-8194（2013）22-0086-02

*通讯作者: