HPLC法测定依托咪酯脂肪乳注射液中依托咪酯的含量

宋 妍马爱玲

（1 河南中医学院第一附属医院药学部，河南 郑州 450000；2 河南省人民医院药学部，河南 郑州 450000）

HPLC法测定依托咪酯脂肪乳注射液中依托咪酯的含量

宋 妍1马爱玲2

（1 河南中医学院第一附属医院药学部，河南 郑州 450000；2 河南省人民医院药学部，河南 郑州 450000）

目的建立测定依托咪酯脂肪乳注射液中依托咪酯含量的高效液相色谱法。方法色谱柱：Agilent TC-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相∶甲醇-水(80∶20)，流速1.0mL/min，检测波长：241nm，进样量：20μL。结果依托咪酯的浓度在5～50μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9990)，高、中、低3种浓度的平均回收率(n=3)为99.3%(RSD=0.11%)、98.1%(RSD=0.08%)、100.3%(RSD=0.14%)。结论该方法操作简便，结果可靠，适用于依托咪酯脂肪乳注射液的含量测定。

依托咪酯；含量测定；高效液相色谱法

依托咪酯是一种静脉注射后起效迅速、作用强、诱导安静平稳、循环抑制轻、对心功能无明显影响的静脉麻醉药。由于依托咪酯的诸多优点，常被用于临床全身麻醉[1]。中国药典2010年版二部[2]中分别采用滴定法和紫外-可见分光光度法测定依托咪酯和依托咪酯注射液的含量，本文参考有关文献[3,4]，建立了测定依托咪酯脂肪乳注射液中依托咪酯含量的HPLC法。该方法简便准确、专属性好、灵敏度高，适用于依托咪酯脂肪乳注射液的含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器

戴安P680高效液相色谱仪，AUW120D电子天平(日本岛津)，WH-866旋涡混合器，TGL-16A(B)高速离心机，DS3120超声波清洗机。

1.2 试药

依托咪酯对照品(江苏恩华药业股份有限公司，批号：20121001，含量：99.9%)；依托咪酯脂肪乳注射液(江苏恩华药业股份有限公司，批号：20120802，规格：20mg/10mL)；甲醇为色谱纯；水为重蒸水。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

精密称取依托咪酯对照品5mg（含量99.9%)，置于100mL量瓶，用甲醇溶解并定容，制备成浓度为50μg/mL的依托咪酯对照品贮备液。

2.2 供试品溶液的制备

精密吸取0.1mL依托咪酯脂肪乳注射液，加入0.9mL甲醇溶液，涡旋混合1min，14000r/min离心10min，精密吸取上清液0.1mL，加甲醇稀释至1 mL作为供试品溶液。

2.3 色谱条件

色谱柱：Agilent TC-C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-水（80∶20），流速：1.0mL/min；检测波长：241nm；柱温：25℃；进样量：20μL。依托咪酯保留时间约5.5min。依托咪酯对照品溶液与供试品溶液HPLC色谱图见图1。

图1 依托咪酯对照品溶液与供试品溶液HPLC色谱图（A：对照品溶液；B：供试品溶液；1：依托咪酯）

2.4 线性关系考察

依次量取50μg/mL的依托咪酯对照品贮备液适量，用甲醇稀释成5μg/mL、10 μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL的标准系列溶液，按照“2.3”项下色谱条件进行测定，以峰面积y对浓度x作线性回归，线性方程为y=0.6084x+0.1687，r=0.9990，线性范围为5～50μg/mL。

2.5 精密度试验

取浓度为20μg/mL的依托咪酯对照品溶液，照“2.3”项下色谱条件，连续进样6次，计算精密度，RSD%为0.81%，结果表明仪器精密度良好。

2.6 重复性试验

照“2.2”项下方法，制备6份供试品溶液，照“2.3”项下色谱条件进样测定，考察方法的重复性，依托咪酯峰面积RSD%为0.85%，结果表明该方法重复性好。

2.7 加样回收率试验

取适量依托咪酯脂肪乳注射液，精密加入依托咪酯低、中、高3个浓度的对照品溶液，每个浓度制备3份样品，进样测定，计算依托咪酯的加样回收率，结果依托咪酯高、中、低3种浓度的平均回收率（n=3）为99.3%(RSD=0.11%)、98.1%(RSD=0.08%)、100.3%(RSD=0.14%)。

2.8 稳定性试验

照“2.2”项下方法，制备1份供试品溶液，室温(25±1)℃下放置24h，分别考察0h、1h、2h、4h、6h、24h的含量变化，结果以0h药物含量为100%计算，24h内药物含量变化＜2%，表明供试品溶液24h内稳定性良好。

2.9 样品含量测定

取3批不同批号的依托咪酯脂肪乳注射液，照“2.2”项下方法制备供试品溶液，每个浓度制备3份，分别进样测定依托咪酯的含量。结果3批样品中依托咪酯含量分别为100.4%，100.2%，99.7%。

3 讨 论

本实验在色谱条件建立时，选择了甲醇-水(80∶20)作为流动相，依托咪酯保留时间为5.5min，色谱峰形好，并且与杂质得到了较好的分离，该流动相的制备简单方便，节省分析时间，适用于依托咪酯的含量测定。

依托咪酯脂肪乳注射液为均一的白色乳剂，不适合直接进样，在样品前处理时，加入甲醇可达到破乳的效果，涡旋、离心后取上清液用甲醇稀释后可进样分析。样品前处理简单方便，样品回收率高，适用于依托咪酯脂肪乳注射液的含量测定。

[1] 廖淳杰,唐小曼,覃怡,等.异丙酚或依托咪酯对幼龄大鼠海马神经元凋亡的影响[J].中华麻醉学杂志,2012,32(2):170-172.

[2] 国家药典委员会.中国药典(二部)[M].2010年版.北京:中国医药科技出版社,2010:474-475.

[3] 胡德福,王荣梅.HPLC测定依托咪酯注射液的含量[J].山东医药工业,2001,20(1):15-16.

[4] 王发,张秉华,郭欢迎,等.HPLC法测定依托咪酯注射液的含量及有关物质[J].西北药学杂志,2010,25(4):253-255.

R927.2

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1671-8194（2013）17-0084-02