兰健萍,熊圆圆,覃幸开,黎 宇(广西医科大学第四附属医院检验科,广西 柳州 545005)
血清果糖胺(FMN)又称糖化血清蛋白(GSP),是血液中葡萄糖与白蛋白以非酶促反应产生的衍生物,可反映糖尿病(DM)患者过去2~3周的血糖平均水平,因此其广泛被用于监测DM患者治疗过程中的血糖变化[1]。溶血、脂血、黄疸等因素均会影响实验室检查项目检测结果偏离真值,FMN作为实验室检查检测项目之一,也受到以上诸多因素的影响。笔者收集不同脂血程度的血液标本进行测定,分析对比该因素对FMN监测的影响。
1.1 一般材料:收集我院2012年5月~8月送检的血液发生脂血的标本224份,以三酰甘油(TG)的含量作为试验脂血的分级,TG≥3 mmol/L且 <5 mmol/L定为轻度脂血组;5 mmol/L<TG≤8 mmol/L定为中度脂血组;TG>8 mmol/L定为重度脂血组。根据TG含量分级,其中轻度脂血组标本75份,中度脂血组标本91份,重度脂血组标本58份。所选体检者身体各项指标正常,无糖尿病史,无血糖药物使用史,且标本无溶血、黄疸等其他异常现象。
1.2 仪器与试剂:所选离心机德国UNIVERSAL 32R超速离心机;所选仪器为罗氏P800全自动实验室检查分析仪;所选果糖胺试剂盒为罗氏公司配套产品。
1.3 方法:按日常临床实验室检查检验一般程序分别测定发生轻度、中度、重度脂血标本血清果糖胺的含量。测完后,将所有标本以12 000 r/min高速离心30 min,待血脂层分离即吸取澄清的下层血清进行果糖胺水平的测定。操作方法和步骤均严格按照厂家提供的试剂盒说明书和检验科实验室检查室制定的SOP文件执行。每份样本均测3次,取均值,分别计算不同分度脂血标本的测定均值,得到高速离心后的测定均值和脂血血清的测定均值,并对测定结果进行对比观察。同时对比观察轻度、中度、重度脂血血清各组间的数据差异。
脂血标本血清FMN值与高速离心后的血清FMN值比较,轻度、中度脂血组,P>0.05为差异无统计学意义;重度脂血组脂血标本结果明显高于离心后的结果,重度脂血组有统计学意义(P<0.05)。详见表1。
表1 轻度、中度、重度脂血标本血清与高速离心后血清FMN测定结果比较(±s)
表1 轻度、中度、重度脂血标本血清与高速离心后血清FMN测定结果比较(±s)
组名 脂血血清FMN(μmol/L)离心后血清FMN(μmol/L) P值轻度脂血254.43 ±18.84 247.65 ±16.78 >0.05中度脂血 265.36±19.21 256.25±22.39 >0.05重度脂血 296.32±22.42 272.98±20.36 ﹤0.05
血脂是血浆中脂类物质的总称,包括中性脂肪(三酰甘油和胆固醇)和类脂(磷脂、糖脂、固醇、类固醇)。血脂中的三酰甘油(TG)不溶于水,高速离心后可分离出,即为人们肉眼所见到悬浮于血清表层的乳白色样乳糜微粒。为使试验操作简单化,故本试验仅以TG作为脂血标本的分组。果糖胺常用的检验方法是四氮唑蓝比色法(NBT),理论上说,高乳糜微粒血液会造成果糖胺比色测定的干扰。从本试验可看出,重度脂血组(TG>8 mmol/L)会影响果糖胺的测定水平,比较样本离心前后的结果发现两者差异有统计学意义(P<0.05)。孙静研究的结果也显示[2],FMN单纯增高主要是受溶血、脂血、黄疸等因素影响,这与本试验研究的脂血因素影响的结果相符。
本试验以发生不同程度的脂血血液标本为研究条件来观察其对果糖胺测定水平的影响。试验结果表明,轻度、中度脂血对血清FMN测定结果影响不大,差异无统计学意义(P>0.05)。其原因在于罗氏P800光路系统选择的是双波长测定,主波长为仪器检测反应物的最大吸收峰,而副波长为周围吸收峰中最大的那个波长点,可用于其消除吸收峰周围干扰物的影响。对于轻度、中度脂血组的标本,仪器检测的主波长测定的果糖胺最大吸收峰会受影响,但这种影响仍可通过副波长的校正来使仪器果糖胺检测达到最佳吸收峰,从而减少脂血对检测结果的干扰。可对于重度脂血组而言,过高的脂血会影响仪器光电部分的敏感性,导致这种干扰难以用双波长法消除而影响果糖胺的测定结果;且脂血程度越严重,干扰作用越明显。
[1]初开秋,周淑华,张少燕.血清清蛋白浓度对果糖胺浓度的影响[J].现代检验医学杂志,2007,22(1):115.
[2]孙 静.血糖糖化血红蛋白 果糖胺指标在糖尿病中的临床应用[J].检验医学与临床,2009,6(9):694.