宫颈癌患者治疗后人乳头瘤病毒检测结果分析及临床意义

李冰 郭珊 杨晓红

随着分子生物学和分子流行病学的迅速发展，病毒感染与肿瘤的关系受到广泛重视。经过国内外学者近20年的研究［1，2］，已经证明HPV感染是宫颈癌的直接病因。宫颈癌亦成为目前唯一一种病因明确的可以早期预防和治愈的恶性肿瘤。宫颈癌系指发生在宫颈阴道部或移行带的鳞状上皮细胞及宫颈管内膜的柱状上皮细胞交界处的恶性肿瘤。宫颈癌是临床常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率在女性恶性肿瘤中居第二位，且发病率逐年增加。近年的研究显示:几乎100%宫颈鳞状细胞癌和70%宫颈腺癌检出人乳头瘤病毒［3］，故高危型HPV生殖道持续感染是宫颈癌发生发展的致病因素。本文通过我院1216例宫颈患者术后HPV感染情况分析，为患者定期随诊复检提供临床依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料 2000年1月至2011年12月，经我院妇瘤科治疗后来我院门诊第一次复诊的宫颈癌患者。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 采用专用的HPV采样刷采集宫颈分泌物标本。采样前48 h内不要做阴道冲洗，不要阴道用药，以专用细胞保存液保存标本。采样的标本4℃冰箱保存，2周内检测。

1.2.2 HPV分型检测 用凯普导流杂交技术及其配套试剂(潮州凯普生物化学有限公司提供)对21种HPV基因型进行分型检测。基本原理是将病毒基因的DNA进行基因扩增，然后利用核酸分子快速导流杂交技术法，使目的分子导流穿过固定有DNA探针的低密度基因芯片薄膜上，而发生快速杂交。

1.3 检测步骤 ①HPV DNA分离提取。②HPV PCR扩增。③核酸分子快速导流杂交。④显色HPV分型。操作和结果判读按试剂盒要求进行。

2 结果

通过对1216例检测对象的HPV分型基因检测，HPV阳性612例，占受检人数的50.3%，(612/1216);HPV阴性604例，占受检人数的49.6(604/1216)。HPV阳性患者612例中，单一亚型HPV感染的例数为385例，比率为31.7%(385/1216)，主要为高危亚型 HPV16，其次为 HPV18、HPV52、HPV31、HPV33等亚型。多重HPV亚型感染227例，比率为18.7%(227/1216)。

结果见表1

表11216例宫颈癌患者术后HPV感染检出率(例，%)

3 讨论

HPV是一种小分子双链DNA病毒，对人皮肤、黏膜有高度亲嗜性，根据其基因序列的多态性，目前已发现HPV有200余种临床亚型，已证明其中30种HPV型可以从感染的生殖道组织细胞中分离出来，20余种已证实与子宫颈肿瘤相关。尤其HPV16型和HPV18型是子宫颈癌中最常见型别。其次是HPV58、HPV52和HPV56型［4］。高危型 HPV持续感染是发生宫颈癌必要因素，这一观点已成共识，年轻人感染HPV多为一过性，自然消退时间约7～12月，大多数在2年内消失，而年龄高的人群易持续感染［5］。检测患者宫颈分泌物HPV，不但可以进行宫颈癌筛查，而且还可作为宫颈癌术后判断治疗效果和预后的随访指标。本文研究表明，宫颈癌患者术后HPV感染率为50.3%，说明在治疗后感染率明显下降，HPV转阴与宫颈癌转归有关。这提示在今后的工作中，加强随访复诊工作，进一步观察宫颈癌患者治疗后持续性HPV感染与远期疗效的关系，十分重要。

有研究报道，宫颈癌患者治疗后HPV感染率仍高于普通正常人群，这样为判断治疗效果，预后的分子学指标奠定了基础，对预测残留或复发有重要价值。对于治疗后仍持续感染HPV的患者应密切随访，及时随诊复检，以提高宫颈癌患者复发早期诊断，以免延误病情。有研究显示，HPV对预测疾病残留和复发的敏感性分别为81%和100%，阴性预测值为96%和100%。且HPV检测较单纯细胞学检查对术后复发或残留具有更多的敏感性。HPV的分型检测在随访中有助于判断高危亚型的持续感染，还是新亚型的新型感染，是多型混合感染，还是单独亚型病毒感染。在HPV感染随访中，除重视某一些高危亚型的持续感染外，术后HPV16型持续阳性时，还应警惕宫颈癌复发及CN(宫颈上皮内瘤变)的复发及发展。另外，若宫颈癌患者术后HPV检测是阴性，可适当延长随访复诊间隔，以节省医疗资源，降低患者医疗费用。

［1］ Lombard I，Vincent-Salomon A，Validire P，et al．Human Papillomavirus genotrpe as a major determinant of the course of cervical Jclim oncol，1998 16(8):2613-2619．

［2］ Mclachlin CM，Human Papillomavirus in cervical neop lasia:role，risk factors and implications Clin Lab Med，2000，20(2):257-270．

［3］ 于科雁，薛永春．人乳头瘤病毒与宫颈癌的关系．口岸卫生控制，2003，8(1):40-45．

［4］ 张学春．人乳头瘤病毒与子宫颈癌的研究进展．国外医学妇产科分册，2006，33(2):113-116．

［5］ 章文华主编．子宫颈病变的诊断要点．人民卫生出版社，2006，12．