丹参注射液与临床常用注射液配伍的稳定性

马媛媛， 李雪宁

(复旦大学附属中山医院药物临床试验机构，上海200032)

丹参注射液原收载于卫生部中药成方制剂第二十册，现执行标准为国家食品药品监督管理局药品标准WS3-B-3766-98-2011。具有活血化瘀、通脉养心的功能，主要用于冠心病胸闷、心绞痛的治疗，还用于糖尿病并发症、肺心病、慢性肾病、脑血栓、微循环障碍性疾病等［1］。用法用量为肌内注射，1次2～4 mL，1日1～2次;静脉注射，1次4 mL(用50%葡萄糖注射液20 mL稀释后使用)，1日1～2次;静脉滴注，1次10～20 mL(用5%葡萄糖注射液100～500 mL稀释后使用)，1日1次。临床上常与不同药物配伍使用，起到辅助治疗作用，如丹参注射液与氯霉素配伍使用，可以提高治疗百日咳的作用;与强的松配伍使用，治疗结节性多动脉炎有协同作用［2］。但丹参注射液为中药注射液，成分复杂，配伍不当容易造成不良反应，如丹参注射液不能与普萘洛尔联用，因为它能拮抗普萘洛尔收缩冠状动脉的作用［3］;与喹诺酮类抗菌药合用时，会出现浑浊，并产生絮状沉淀［4］;与阿托品注射液配伍使用时，丹参注射液具有的降压效应可被阿托品阻断，从而降低药效［5］。因此，本实验通过丹参注射液与临床常用化学药物配伍溶液的稳定性研究，确定二者配伍使用的注意事项及配伍禁忌，为临床用药提供理论依据。研究过程中分别就配伍溶液的外观性状、pH值、可见异物、不溶性微粒、丹参中成分的量等指标进行了检测，对配伍溶液室温放置2、4、6 h后的检测结果与0 h进行了对比，判断其稳定性，同时对定量测定方法进行了验证。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液液相色谱仪 (日本岛津LC-10AT、LC-20AT、SPD-20A)、注射液微粒分析仪(天河医疗仪器有限公司ZWF-T6)、酸度计 (上海大普仪器PHS-25B)。

1.2 试药 丹参素钠对照品 (批号110855-200809)，原儿茶醛对照品 (批号 110810-201007)，迷迭香酸对照品 (批号11871-201102)，丹酚酸B对照品 (批号12020104)，以上对照品购自中国药品生物制品检定所。丹参注射液 (山东华信制药集团，批号12042401);盐酸川芎嗪注射液 (河南辅仁怀庆堂，批号1108051);血塞通注射液 (云南白药集团兴中制药，批号20110606);葛根素注射液、维生素C注射液、维生素B6注射液 (山东华信制药集团，批号分别为:12020701、11102101、12013001);脉络宁注射液 (金陵药业南京金陵制药，批号20111156);西咪替丁注射液 (徐州莱恩药业，批号1112132);盐酸倍他司汀注射液 (广东邦民制药，批号111201);甲醇、乙腈、醋酸均为色谱纯，购自国药集团化学试剂有限公司。

2 方法与结果

2.1 配伍溶液的配制 模拟临床用药方法，取丹参注射液20 mL 10份，分别与盐酸川芎嗪注射液2 mL、盐酸倍他司汀注射液6 mL、血塞通注射液4 mL、葛根素注射液8 mL、脉络宁注射液10 mL、西咪替丁注射液2 mL、维生素C注射液8 mL、维生素B6注射液2 mL置于250 mL量瓶中，用5%葡萄糖注射液稀释至刻度，混匀，即得配伍溶液。

2.2 配伍溶液外观 取上述配伍溶液，分别室温放置0、2、4、6 h后目测观察颜色有无变化，是否有气体或沉淀生成。观察结果表明，在放置6 h后，各配伍溶液均无明显颜色变化，也无气体或沉淀生成。

2.3 配伍溶液可见异物稳定性 取上述配伍溶液，分别室温放置0、2、4、6 h后，参照可见异物检查法(《中国药典》2010年版一部附录ⅨC第一法)检查，结果表明，配伍溶液在6 h内可见异物数符合药典要求。

2.4 不溶性微粒 取上述配伍溶液，分别室温放置0、2、4、6 h后，参照不溶性微粒检查法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅸ R第一法)检查，结果表明，6 h内配伍溶液中不溶性微粒＞10μm的微粒数和粒径＞25μm的微粒数均符合药典规定，结果见表1，说明，各配伍溶液6 h内稳定。

2.5 pH值稳定性 参照pH值测定法(《中国药典》2010年版一部附ⅦG)检查，结果见表2，说明配伍溶液在6 h内pH值稳定，无显著变化。

表1 配伍溶液放置不同时间的不溶性微粒数Tab.1 Insolub le particles of com patibility solution within 6 hours

表2 配伍溶液放置不同时间p H值Tab.2 p H value of com patibility solution within 6 hours

2.6 样品测定 取上述配伍溶液，分别室温放置0、2、4、6 h后，采用高效液相色谱法，检测丹参注射液中丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B量变化情况。

2.6.1 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A，以0.05%三氟乙酸水溶液为流动相B，按表3中的规定进行梯度洗脱;体积流量为0.8 mL/min;柱温为40℃;检测波长为288 nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于200 000。

表3 梯度洗脱程序Tab.3 Gradient elution procedure

2.6.2 供试品溶液的配制 取2.1项下各配伍溶液，作为各配伍溶液的供试品溶液。

2.6.3 对照品溶液的配制 取丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、迷迭香酸对照品和丹酚酸B对照品适量，精密称定，加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液制成含丹参素钠0.20 mg/mL、原儿茶醛50 μg/mL、迷迭香酸50μg/mL和丹酸酸B 50μg/mL的混合溶液，取该溶液5 mL，置10 mL量瓶中，加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液至刻度，混匀，即得。

2.6.4 专属性试验 分别取对照品溶液和8种配伍注射液，在上述色谱条件下进样分析，结果表明8种配伍注射液在对照品出峰位置处无干扰，符合方法学要求。

2.6.5 线性关系考察 精密称取丹参素钠对照品59.25 mg、原儿茶醛对照品16.64 mg、迷迭香酸对照品9.38 mg、丹酚酸B对照品10.21 mg，同置10 mL量瓶中加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液，溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，精密量取贮备液0.1、0.5、1.5、2.5、3.5 mL分别置10 mL量瓶中，用0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。各精密量取5μL分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以主峰面积A为纵坐标，溶液浓度C(mg/mL)为横坐标，进行线性回归，得到丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B的回归方程分别为:A=5 486 997.0C+234 865.7，R=0.999 7;A=44 869.0C+496 280.0，相关系数R=0.999 4;A=25 610.4C+223 662.6，相关系数R=0.999 1;A=121 71C－108 78，相关系数R=0.999。线性范围分别为:59.25～2 073.75 μg/mL、16.64～582.4 μg/mL、9.38～328.3μg/mL和10.2144～357.504μg/mL。

2.6.6 精密度和稳定性试验 取原儿茶醛对照品12.24 mg、迷迭香酸对照品12.25 mg、丹酚酸B对照品11.78 mg，同置25 mL量瓶中，用0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液1。取丹参素钠对照品9.70 mg，置50 mL量瓶中，用0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液适量使溶解，取5 mL对照品溶液1置量瓶中，用0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，并分别于0、2、4、6、8、10 h进样分析，4种成分峰面积的RSD分别为1.3%、1.2%、1.2%和1.7%。结果表明，4种成分测定精密度良好，且对照品溶液10 h稳定。

2.6.7 回收率试验 精密量取已知含有量的丹参注射液1 mL、一式6份，分置10 mL量瓶中，精密加入6份对照品混合溶液7 mL，加0.2%冰醋酸的10%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，依法测定，计算回收率，结果见表4。

试验结果显示本测定方法丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B成分回收率良好。

2.6.8 样品测定 于第0、2、4、6 h，分别精密吸取上述对照品溶液和各配伍溶液各5μL进样分析，测定丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B的峰面积，由外标法计算各成分的量，结果见表5，表明，丹参素钠、原儿茶迷迭香酸和丹酚酸B在各配伍溶液中量没有明显变化，即丹参注射液与各注射液配伍溶液稳定。

3 讨论

据文献 ［6-7］报道，10%的葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液与丹参注射液配伍使用时，发生不溶性微粒数增多现象，因此，本实验选择5%葡萄糖注射液作为各配伍溶液的溶媒。

本实验确定了HPLC法测定丹参注射液中丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸和丹酚酸B 4种有效成分的量变化情况，该方法分离度好、灵敏度高、操作简便，能准确测定4种有效成分。丹参注射液成分检测波长为288 nm，这一波长与大部分配伍注射液的检测波长接近［8-10］，因此无法采用紫外－可见分光光度法测定各组分含量。

8种配伍注射液中有4种中药注射液 (血塞通注射液、盐酸川芎嗪注射液、葛根素注射液和脉络宁注射液)，由于中药注射液中成分复杂，配伍药液往往会出现有效成分含有量降低、浑浊沉淀、溶液的颜色改变、紫外吸收值降低、不溶性微粒数剧增、药理配伍禁忌、不良反应增加等［11］。本实验中丹参注射液与各配伍溶液6 h内pH值稳定，不溶性微粒数无明显增加，丹参注射液有效成分的量没有减少，因此临床上可安全使用。

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