莪术油凝胶剂制备工艺研究*

★ 钟小群 袁海铭 李艳

（江西省药物研究所 南昌 330029）

莪术油是由姜科植物蓬莪术Cumuma phaeocaulis Va1.、广西莪术 Curcunlakwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang 或 温 郁 金 Cumuma．Wenyujin.Y.H.chen et C.Ling的干燥根茎（后者习称“温莪术”）经水蒸汽蒸馏提取的挥发油，中国药典2010年版一部（植物油脂和提取物）有收载[1]。具有活血化瘀、行气破滞、消积止痛之功效，用于抗肿瘤、抗病毒、抗血栓、抗菌、消炎。临床使用越来越广，莪术油以注射、栓塞、保留灌肠、外敷等形式治疗肿瘤、病毒引起的感冒上呼吸道感染、小儿病毒性肺炎、消化道溃疡、甲型病毒性肝炎、小儿病毒性肠炎及病毒性心肌炎脑炎、阴道炎、宫颈糜烂、慢性宫颈炎、盆腔炎、放射性皮炎及多种皮肤溃疡等[2-3]。由于莪术油有较强的抗病毒作用，有报道莪术油在治疗由肠道病毒（以柯萨奇A组16型（CoxA16）、肠道病毒71型（EV71）多见）引起的急性传染病手足口病有明显的效果[4-7]。莪术油上市制剂种类比较少，主要有：注射液（1%）、复方莪术油栓剂（2%）、复方莪术油软膏（4%）等几种，因此莪术油的新剂型及新技术的研发方兴未艾，如将莪术油制成自微乳、亚微乳、纳米粒、微球、微囊、β-环糊精包合物、羟丙基-β-环糊精包合物、喷雾剂等形式[8]等，以提高生物利用度，但尚未有上市品种。基于手足口病多发生于学龄前儿童，根据《手足口病诊疗指南》（2010年版），临床上常采用中西医结合治疗急、重性手足口病患者，然而对在家康复的患者缺少安全有效的针对性药物制剂；另外，手足口病主要症状表现为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹等皮肤溃烂，因此我们拟将莪术油开发成外敷型凝胶剂，用于治疗手足口病所致的各种皮肤溃疡。莪术油凝胶剂是由莪术油与水溶性凝胶基质制备的半固体药物，是一种新型外用剂型，不会污染衣物，运输、储存及使用为方便，患者依从性更高。作者采用先进的凝胶辅料，采用正交设计试验优选工艺，并进行了质量标准研究。本文为首次发表。

1 仪器与试药

仪器：TGL-16G型台式高速离心机（湖南星科科学仪器有限公司）。

对照品：莪术醇（购于中检所。批号：100185-200 506）、莪术二酮（购于中检所。批号：111800-201001）、呋喃二烯（购于中检所。批号：111824-201102）。

原料药：莪术油（购买于中国江西吉水县同仁天然药用油厂符合规定）。

试剂：溶剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 方法

通过药物于辅料相容性试验及预试验结果，课题组采用卡波姆934为凝胶基质，吐温80为乳化剂，甘油-丙二醇（2：1）为增稠剂、尼泊金乙酯为防腐剂。采用4因素3水正交设计试验，以所制备凝胶剂的外观（涂展性）、稳定性（耐热、耐寒、离心）、体外释放时间等为指标进行综合评价，优选最优的载药量、基质量、乳化剂量、增稠剂量及工艺，因素水平表见表1。

表1 正交试验因素水平表

供试品制备：按照正交表头中的处方比例，制备100 g的量，称取卡波姆934、增稠剂甘油-丙二醇（2：1）、水适量，搅拌使溶解，逐渐再加入10%氢氧化钠溶液约适量（每1g卡波姆约用4 mL），加入处方量的乳化剂吐温-80，及足量的水，加热至约70℃；另取表头比例的莪术油原料、相同量的防腐剂尼泊金乙酯，混合均匀，加热至约60℃，搅拌下逐渐加入至上述水相中，65℃保温下搅拌0.5h后再搅拌冷却至室温，灌入软膏管中（10g/管），即得。将所得凝胶样品进行比较：外观、耐热试验、耐寒试验、离心试验、体外释放，分别进行打分，计算总得分。将结果填入上表中，并进行数据统计。

外观（涂展性）：观察上述9种供试品，为乳液型凝胶剂，均是光滑、细腻的，但其稠度或涂展性不一样，因此测定涂展性[9]：取上述9种供试品各3份，每份10 g，置清洁的5×20cm玻璃板一端1cm处，均匀涂布在5cm×1cm内的面积内（必要时在冰箱内进行，便于固定），然后将玻璃板置于40℃恒温箱中并倾斜至30°角，使凝胶能顺着玻璃板自由流动涂展下来。计算10min内供试品流下距离及面积，距离小于4cm者得1分、5-8cm者得3分，大于8cm者得2分，将平均值填入正交表头。

耐热实验：取上述9种供试品各3份，每份10 g，置试管中，于80℃恒温箱内保存24 h，取出，放至室温，记录产生分层的时间：未冷却至室温即分层得分为0，24h内分层得1分，24h外得分2分，将平均值填入正交表头。

耐寒实验：取上述9种供试品各3份，每份10 g，置试管中，于-10℃条件下冷藏24 h，取出，放至室温，记录产生分层的时间：未至室温即分层得分为0，24h内分层得1分，24h外得分2分，将平均值填入正交表头。

离心实验：取上述9种供试品各3份，每份10 g，装于离心管中，在6 000 r/min条件下，30min内分层得0分，60min内分层得1分，60min外分层得2分，将平均值填入正交表头。

体外释放时间测定[11]：取上述9种供试品各3份，每份10 g至玻璃管中（一端开口，一端固定一张相同大小0.45μm的有机膜），将有机膜端浸于装有1mL无水乙醇称量皿中，分别于1、2、3h末各吸取无水乙醇25μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，以莪术醇、莪术二酮、呋喃二烯对照品的石油醚（30-60℃）溶液（制成每1mL各含0.5mg的溶液）为对照品溶液。以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-冰醋酸（60：5：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供该品色谱色谱中，能在1h内出现与对照品相同斑点供试品得3分，2小时出现着得2分，3h后尚未出现斑点得1分。将平均值填入正交表头。

2.2 结果

2.2.1 正交试验结果及方差分析 结果见表2、3。

表2 L9（34）正交设计表

表3 正交试验结果方差分析

结果显示：因素A、B、C对凝胶剂的质量有显著的影响。

2.2.2 正交试验直观分析 按照所选用的评定指标综合得分来看，所选4个因素中A、B、C因素影响比较大，最优工艺为A2B2C3D2，即载药量为10%，卡波姆凝胶基质为3%，乳化剂为2.4%，增稠剂为10%。根据因素C2及C3结果差异不大及考虑到真实皮肤的需求（不能有大多的滑腻感），乳化剂的比例选择为C2，即用1.6%的吐温-80。最优处方为A2B2C22D2。

2.2.3 正交验证试验 将上述最优工艺A2B2C3D2进行验证，制备1 000g的量，并进行质量标准研究，结果重复性好，可操作性强。

3 讨论

3.1 凝胶基质的选择

本品主药为莪术油，在基质选择中考察过油溶性基质及水溶性基质，由于油溶性基质（如液体石蜡与聚氧乙烯或脂肪油与胶体硅或铝皂、锌皂等）所制备凝胶剂油性较强，不易清洗，因此选择水溶性基质，水溶性基质主要有纤维素衍生物类（甲基纤维素、羧甲基纤维素钠及羟丙甲纤维素等）、卡波姆（型号有934、940、941）、壳聚糖基质、泊洛沙姆（型号常有407、188）、海藻酸钠、西黄耆胶、明胶、淀粉、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、天然树胶等。根据不同基质与药物的相容性试验（是否能成型）结果，发现卡波姆934能与药物相容，形成比较光滑、均匀的凝胶，因此选此基质。

3.2 正交设计试验检测指标的选择

凝胶剂的判断指标常有外观（是否光滑、透明、均匀，粘度、涂展性是否适宜）、稳定性（耐寒、耐热、耐离心）、体外释放速率测定等，多为定性指标（主观指标），体外释放度实验确定工艺虽然比较准确，但操作实为不便，特别是针对中药类的外用制剂，成分复杂，可被检测的成分含量甚微，虽然可用GC或HPLC法测定某一些含量大的成分，如文献[10-13]等所述，但是单一成分的体外释放并不能代表整个中药的释放情况，因此本课题组选用的薄层鉴别法测定凝胶剂的体外释放速率，可操作性强，可被检测的指标多，更能代表中药的体外释放情况，在工艺研究中可以起到更好的控制作用，有很强的推广价值。

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