溴甲酚绿与溴甲酚紫法测定白蛋白的差异比较

黄小华， 方照舟， 黄益楚， 许金春

(1.湖州市南浔区中西医结合医院检验科，浙江湖州313009;2.湖州市南浔区中西医结合医院内科，浙江湖州313009;3.湖州市南浔区中西医结合医院外科，浙江湖州313009)

目前，用于白蛋白(albumin，Alb)测定的方法主要有溴甲酚绿(bromcresol green，BCG)法和溴甲酚紫(bromcresol purple，BCP)法。但BCP法和BCG法测定血清Alb在结果上有一定的差异，会引起Alb及白/球蛋白(A/G)比值的不一致，给临床应用带来了很大的困扰。为此，我们比较了2种方法测定不同年龄段血清Alb的差异。

一、材料和方法

1.检查对象 选取湖州地区企业与事业单位干部、职工、教师、军人、学生及农民，经体检无心、肺、肝、肾等主要脏器疾病，脑血管病、高血压病、糖尿病等代谢内分泌病;剔除脂血、溶血、黄疸样本，共入选1 496名，其中男805名，女691名;从1岁起间隔10岁分组，男、女性各7组。空腹抽血，当日分离血清，置－20℃保存待测。

2.仪器与试剂 贝克曼DXC800生化分析仪(简称DXC800)，配套的总蛋白(TP)试剂(双缩脲法)、白蛋白试剂(BCP法)、液体型校准物及3个水平定值质控血清。日立7080生化分析仪(简称日立 7080)、罗氏 Alb 试剂(BCG 法)、c.f.a.s校准物及2个水平定值质控血清。

3.方法 在测定样本前用配套校准液校准仪器，并测定配套定值质控血清Alb浓度。然后用双缩脲法测定TP、BCP法和BCG法分别测定Alb浓度;球蛋白浓度=TP－Alb，计算A/G比值，同时测定各自配套的定值质控血清。

4.方法的准确性 DXC800及日立7080的当日室内质控均无失控;参加浙江省临床检验中心的室间质控，5份质控品(20100201～20100205)VIS 值依次为DXC800 TP:7、23、27、10、2，平均为14 分，全省 =60.24，实测 =60.57;Alb(BCP 法):23、6、3、8、3，平均为9 分，全省 =38.24，实测 =37.98;Alb(BCG 法):9、10、11、13、31，平均为15 分，全省 =37.76，实测 =37.68。

5.检验重复性 用BCP法及BCG法分别测定Alb浓度29.6和48.8 g/L的血清样本，批内精密度(CV)分别为0.65%、0.74% 和0.73%、0.75%，批间CV分别为1.91%、1.99% 和1.95%、1.97%。测定TP浓度分别为53.8 和72.4 g/L血清样本，批内 CV分别为0.95%、0.98%，批间CV分别为1.86%、1.90%。

6.统计学方法 用SPSS10.0软件对数据作统计学处理，计算出各组均值()及标准差(s)，正态性检验用D检验法，不同年龄组及同组男女均数比较用t检验，总体参考范围由±2s得出。

二、结果

1.定值质控血清标本测定 定值质控血清的TP及Alb结果见表1。测定结果与靶值非常接近。

2.各年龄段2种方法测定血清Alb及A/G比值结果 血清TP、Alb浓度及A/G值均呈正态分布。BCP法测定值及A/G比值的Alb明显低于BCG法(P＜0.01)。根据±2s可计算出总体参考范围为BCP 法 Alb 35.5～48.3 g/L，A/G 比值1.07～1.79;BCG 法 Alb 40.9～52.5 g/L，A/G比值1.32～2.36。

表1 定值质控血清的TP及Alb结果 (g/L)

表2 各年龄组TP、Alb和A/G结果比较(±s)

表2 各年龄组TP、Alb和A/G结果比较(±s)

注:与BCG法比较，*P＜0.01

31～40 男 111 74.6±4.7 43.3±3.4* 48.4±2.3 1.37±0.18* 1.83±0.33女 121 75.9±4.5 42.0±3.4* 46.6±2.6 1.26±0.14* 1.67±0.27 41～50 男 123 73.3±4.5 42.2±3.0* 46.9±2.9 1.36±0.13* 1.80±0.31女 121 75.4±4.4 42.3±2.9* 46.4±2.2 1.28±0.13* 1.62±0.22 51～60 男 100 73.5±4.6 41.8±3.3* 46.4±3.1 1.32±0.14* 1.79±0.32女 104 74.8±4.9 39.9±3.1* 45.3±3.0 1.29±0.12* 1.60±0.31＞ 60 男 117 71.5±4.6 41.1±3.3* 45.7±3.2 1.32±0.15* 1.73±0.35女 111 72.9±4.7 39.5±3.1* 44.8±2.6 1.30±0.12* 1.63±0.33合计 1 496 73.9±5.1 41.9±3.2* 46.1±3.2 1.43±0.18*1.84±0.26

三、讨论

目前，同时拥有BCP法和BCG法测定血清Alb的实验室越来越多，2种方法测定结果的差异引起了临床的重视。传统的BCG法测定血清Alb会受到非Alb类蛋白质的非特异性干扰［1］。BCP法反应最适pH值为5.20，接近α和β-球蛋白的等电点，抑制了这2种球蛋白与BCP的非特异性反应，故对测定白蛋白具有高特异性。此外，BCP与Alb的反应为即时完全反应，不受时间和温度变化的影响［2］。BCP法兼有BCG法的主要优点，克服了BCG法的多数缺点，与火箭电泳法结果相一致，线性范围可达10～80 g/L，比传统的BCG法更宽，而且不易受溶血、黄疸和脂血等临床常见干扰因素的干扰，成为测定血清Alb染料结合法中较好的一个方法。

近几年也有一些学者报道了BCP法和BCG法测定Alb结果的差异。陈智平等［3］报道BCP法比BCG法测定结果偏低约3.2 g/L。康金锁等［4］报道2种方法的差异可利用校正公式:BCG校正值=1.149× BCG检测值－9.514 9 来实现统一。本研究得出BCP法测定的Alb浓度比BCG法平均低4.2 g/L。因为缺乏可供比较的“金标准”，本研究的结果并不能说明BCG法的结果偏高、BCP法结果偏低，抑或两者皆有。国外学者的观点也不尽相同，这也许与各自所采用的标准不同有关。在短时间内，大家不可能接受单一的测定Alb的方法为最终标准方法，更不可能在临床上都应用1种方法。这2种方法在临床上都广为应用，尽管有人提出放弃BCG法，但这种观点并未被普遍接受。因此，BCP法和BCG这2种测定Alb的方法在相当一段时间内仍将共存。

本研究结果表明，BCP法Alb及A/G比值明显低于BCG法(P＜0.01)。根据±2s可计算出总体参考范围 BCP法 Alb 35.5～48.3 g/L，A/G比值1.07～1.79;BCG 法 Alb 40.9～52.5 g/L，A/G 比值1.32～2.36。

［1］陈惠黎.生物生化检验技术［M］.北京:人民卫生出版社，1996:211.

［2］罗 侃.临床化学方法学评价［M］.兰州:兰州大学出版社，1996:113-114.

［3］陈智平，秦 雪，陈兴财，等.溴甲酚绿法与溴甲酚紫法检测血清清蛋白的结果比较［J］.国际检验医学杂志，2009，30(10):940-941.

［4］康金锁，戴树民，刘 哲，等.两种方法检测清蛋白结果的偏差分析［J］.现代检验医学杂志，2010，25(4):113-115.