高效液相色谱法检测食品接触材料中三聚氰酸的残留量*

陈旻实，吕水源，李小晶，曾树金，郑思远

(1.福建出入境检验检疫局技术中心，福建省检验检疫技术研究重点实验室，国家消费品安全检测重点实验室，福州 350001 ；2.泉州出入境检验检疫局，泉州 362000)

三聚氰酸（Cyanuric Acid，CYA）是三聚氰胺的水解产物，毒性较小，但与三聚氰胺同时被人体摄入后，通过分子间的氢键结合形成网状三聚氰胺氰尿酸盐（Melamine cyanurate，MCA），该晶体难溶于水，易在肾脏中积聚形成结石，堵塞肾小管，最终导致肾衰竭［1］。原材料中三聚氰酸含量的多少，直接影响三聚氰酸在成型品中的迁移量。通过建立可靠的三聚氰酸残留量检测方法，筛选出合格原料，从源头把关产品品质，进而达到限制三聚氰酸在食物中的迁移量的目的。

目前，国内外有关饲料和食品中三聚氰酸检测的报道较多［2-5］，而有关食品接触材料的报道则较少［6-8］，且主要是对成型品在水、4%乙酸、10%乙醇等食品模拟物中迁移量的测定，对原料和成型品中的单体残留量的测定尚未见报道。笔者用乙醇溶液作为提取液，建立了以高效液相色谱检测食品接触材料（包括原料和成型品）中三聚氰酸残留量的简便、快速、准确、可靠的方法。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

高效液相色谱仪：1100型，配有二极管阵列检测器（DAD），美国Agilent公司；

超声波清洗器：KQ250E型，中国昆山仪器公司；

分析天平：AB204-L型，德国赛多利斯仪器公司；

研磨机：HY98-A型，中国南昌红燕公司；

三聚氰酸标准品：纯度大于99.0%，德国Dr. Ehrenstorfer公司；

三聚氰酸标准储备液：准确称取三聚氰酸标准品100 mg，置于100 mL容量瓶中，用水超声溶解并定容，浓度为1 000 mg／L，置于冰箱中保存，使用时用水稀释成需要浓度的三聚氰酸标准工作液；

乙腈：色谱纯，德国Meker公司；

乙醇：分析纯，上海试一化学试剂公司；

磷酸盐（PBS）缓冲溶液：5 mmol／L，pH 6.5。

1.2 样品制备

将原料树脂或成型品样品制成1 cm×1 cm大小，然后用研磨机破碎成粒径小于0.2 mm大小颗粒。称取0.5 g（精确到0.1 mg）均质样品颗粒于50 mL带盖离心管中，加入10 mL 10%乙醇溶液，涡旋混匀，超声振荡20 min，以转速2 500 r／min离心5 min。取1 mL上清液，过0.45 μm滤膜，上机测定。

1.3 色谱条件

色谱柱：Phenomenex Luna 氨基柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），美 国Phenomenex公 司；检 测器：DAD；检测波长：214 nm；柱温：30℃；进样量：5 μL；流动相：乙腈-PBS缓冲溶液（体积比为75∶25）；洗脱方式：等度洗脱；流速：1.0 mL／min。

2 结果与讨论

2.1 提取条件的优化

2.1.1 提取液

三聚氰酸微溶于水(20℃下溶解度为5 g／L)，溶于热水、热醇、吡啶，也溶于氢氧化钠和氢氧化钾水溶液，属于极性化合物，提取溶剂一般选用稀酸溶液、有机溶剂与水的混合溶液、极性较强的有机溶剂或缓冲溶液［4］。先选用常见有机溶剂甲醇、乙醇、乙腈为提取液，考察同一提取方式下，不同有机溶剂对三聚氰酸的提取，结果见表1。由表1可知，甲醇和乙醇的提取效率相近，且明显优于乙腈，因此选用乙醇作为提取液有机溶剂。

表1 不同有机溶剂提取三聚氰酸的质量浓度

选用体积分数分别为10%，20%，50%的乙醇溶液和乙醇为提取液，考察不同提取液对三聚氰酸的提取效果，结果见表2。由表2可知，10%乙醇溶液的提取效率最高，因此选用10%乙醇溶液作为提取液。

表2 不同浓度乙醇溶液提取所得三聚氰酸的浓度

2.1.2 提取方式

分别考察了涡旋混合提取、振荡提取、超声提取、索氏回流提取等提取方式，结果表明索氏回流提取和超声提取的效率较高，振荡提取和涡旋混合提取效率低。由于索氏回流耗时长且操作较繁琐，因此选用超声提取方式。

2.1.3 提取时间

以超声提取为提取方式，以10%乙醇溶液为提取液，对同一份均质样品，考察不同超声时长的提取效果，结果见图1。由图1可知，超声时间超过20 min，样品中的三聚氰酸已基本提取完全。因此，超声时间选择20 min。

图1 不同超声时间三聚氰酸的提取浓度

2.2 色谱条件的选择

色谱条件参照三聚氰胺及其衍生物迁移量的研究中所建立的方法［1］，具体参数见1.3。

2.3 线性范围及检出限

配制三聚氰酸系列浓度的标准工作溶液，按照选用的色谱条件进行测定。以质量浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，得三聚氰酸的检出限为0.1 mg／L，线性方程为Y=56.12X +11.63，线性范围为0.5～50 mg／L，相关系数为0.999 4。结果表明三聚氰酸的标准曲线线性范围宽、检出限低，可以满足定量分析的要求。

2.4 精密度与回收率

将适量三聚氰酸标品与三聚氰胺树脂混匀，使得混匀后的三聚氰酸含量为0.1%。将混匀后的树脂原料压制成密胺餐盘，作为阳性样品备测。将密胺餐盘破碎成粒径小于0.2 mm的颗粒与树脂原料混合后按本方法进行提取和测定，同时对未添加样品进行空白测试。重复试验6次，扣除空白平均值，考察方法的精密度和回收率，结果列于表4。由表4可知，三聚氰酸含量测定结果的相对标准偏差（RSD）为1.36%～2.54%，回收率在80%～93%之间，表明该方法精密度和准确度良好。

表4 食品接触材料中三聚氰酸单体残留量回收率

2.5 残留量与迁移量的关系

将不同量的三聚氰酸标准品与三聚氰胺树脂混匀，使得混匀后三聚氰酸含量分别为0.1%和0.2%。将混匀后的树脂原料分别压制成10只密胺餐盘。将树脂原料按本研究所建立的方法进行提取和残留量测定，同时将压制成型的密胺餐盘用于三聚氰酸迁移量测定（食品模拟物为10%乙醇溶液，浸泡温度为70℃，浸泡时间为4 h），结果见图2。

图2 原料中三聚氰酸残留量与其成型品中三聚氰酸迁移量的对应关系

由图2可知，三聚氰酸迁移量随着原料中残留量的增大而增大，呈现正相关关系，因此可以认为质控原料三聚氰酸残留量是降低成型品三聚氰酸迁移量、提升产品品质的有效途径。

3 结语

建立了用液相色谱技术检测食品接触材料中三聚氰酸残留量的方法，该方法灵敏度好，检出限低，适用线性范围广，前处理简单，揭示了原料三聚氰酸残留量与成型品三聚氰酸迁移量的正相关关系，满足我国对食品接触材料中污染物残留监控和检测的要求。

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