交泰滴丸成型工艺及其中盐酸小檗碱的测定

董小雁， 高文彦， 周春兰， 冯 宁， 魏太明

(哈尔滨医科大学(大庆)，黑龙江 大庆163319)

交泰丸，源自明·韩懋《韩氏医通》，名见清·王士雄《四科简要方》，由黄连、肉桂二味药(10 ∶1)组成。二者配伍独特，寒热相伍，体现清温并用之法，且以清为主，功能清心除烦，引火归元，交通心肾，对心肾不交之失眠有显著疗效。由于交泰丸以生药原粉制成蜜丸，生物利用度较差。将该方剂制成滴丸，滴丸属于固体分散体，具有速效、高效、降低不良反应、提高稳定性、易储存、携带方便等优点。本实验采用固体分散技术，以聚乙二醇4000(PEG4000)和聚乙二醇6000 (PEG6000)为基质，以甲基硅油为冷却剂，采用正交试验设计法对交泰滴丸的最佳成型工艺进行了优选［1］。

交泰丸中的黄连有清热燥湿、泻火解毒的功效。黄连中的主要成分盐酸小檗碱具有抗菌、降压，降血脂，降血糖［2］和治疗高血压、心律失常的作用。盐酸小檗碱也是交泰丸中发挥药效的主要成分［3］。交泰丸中的肉桂有补火助阳，引火归源，散寒止痛，活血通经的功效。交泰丸中肉桂发挥药效的主要成分是肉桂醛，肉桂醛具有降压、解热、镇静、抗炎、抗菌［4］、抗肿瘤、抗血小板聚集和抗凝血等多种药理作用。本实验采用在交泰丸中发挥主要作用的盐酸小檗碱作为定量测定指标，用于控制交泰滴丸提取物的质量。

1 仪器和材料

1.1 仪器 DWJ-2000S-D 多功能滴丸试验机(烟台百药泰中药科技发展有限公司);BJ-Ⅱ智能崩解仪(天津新天光);ESJ200-4 电子天平(沈阳龙腾电子);荸荠型包衣锅(泰州金诚制药机械);ZRS-8 智能溶出试剂仪(天津市天大天发科技);Axiostar 数码显微成像系统，Kodak DCl20 ZOOM Digital Camera，Sartorius sbl 电 子 天 平 (德 国DOLD);Agilent1200 高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司);SHZ-D (Ⅲ)水式真空泵(巩义市予华仪器有限公司);UPK-I-100L 纯化水制备系统(上海优浦科学仪器有限公司);KH3200DE 型数控超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司);玻璃砂芯过滤装置(溶剂过滤器)。

1.2 材料 纯度97%盐酸小檗碱(自制)、肉桂醛99%(金海天然香料油科技有限公司);聚乙二醇4000，6000(PEG4000，PEG6000，天津市大茂化学试剂厂);二甲基硅油(上海九邦化工有限公司)。Eudragit S100 (德闰罗姆公司生产，由上海德国赛公司提供);二氧化钛(湖南湘中精细化学品厂);滑石粉(银汉滑石粉有限公司);乙醇(化学纯，科龙化学试剂有限公司);盐酸小檗碱对照品(批号110713-201212，中国食品药品检定研究院);乙腈(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司);甲醇(色谱纯，天津市大茂化学试剂厂)，其他试剂均为分析纯，水为娃哈哈纯净水。

2 方法与结果

2.1 基质的选择 滴丸剂常用的水溶性基质是聚乙二醇(PEG)类。基于PEG4000 熔点低，具有良好分散能力和较大内聚力，PEG6000 具有能改善滴丸硬度，具有良好的耐热性及流动性［5］的优点，本实验使用PEG4000 和PEG6000 的混合基质。

2.2 混合基质的最佳配比筛选 见表1，PEG4000 ∶PEG6000 =2 ∶3 时，空白基质滴丸的圆整度好，硬度适中，无拖尾、粘连现象。

表1 不同比例PEG4000 和PEG6000 成型情况

2.3 主药与基质的配比筛选 以筛选出的PEG4000 ∶PEG6000 =2 ∶3 为基质，二甲基硅油为冷却剂，进行主药与基质的配比筛选。将药物与基质按1 ∶2、1 ∶2.5、1 ∶3、1 ∶3.5、1 ∶4 的比例进行混合，实验结果(表2 和表3)表明，药物与基质的比例为1 ∶3.5、1 ∶4 时成型都很好，且滴丸在30 min 内全部溶散，符合要求。但考虑到载药量的大小，确定比例为1 ∶3.5，即药物∶PEG4000 ∶PEG6000 =1 ∶1.4 ∶2.1。

表2 不同药物与基质配比下的外观和溶散时限情况

表3 不同药物与基质配比下的外观质量和溶散时限情况结果表

2.4 成型工艺的正交试验优选

2.4.1 正交试验优选 在优选出药物和基质的最佳比例基础上，以滴距、药料温度、冷却剂温度等3 因素采用L9(34)正交表设计试验，对各条件进行优选(见表4)。成型情况以外观(硬度、圆整度、粘连、拖尾)和丸重变异系数作为考察指标，权重系数分别为0.4 和0.6，对正交滴丸样品进行评价并作统计学分析，以确定最佳工艺条件［6］。硬度、圆整度、粘连、拖尾由差到好各分为1 ～4级，由多个人来主观判断。丸重变异系数按《中国药典》2010 年版项下丸剂重量差异限度方法来测定。随机取20丸称重，计算变异系数。

2.4.2 正交试验结果 由表5、表6 可知，FA＞F0.05，P ＜0.05，有显著性影响。FC＞F0.05，P ＜0.05，有显著性影响。FB＜F0.05，P ＞0.05，无显著性影响。因素A (滴距)和因素C (冷却液温度)对滴丸成型有显著性影响，因素B (料温)对滴丸成型影响不大。3 个因素影响滴丸成型的主次因素顺序为A ＞C ＞B。最佳工艺为A2B2C2，考虑到高温下挥发油易挥发且因素料温(B)是非主要因素，因此料温选80 ℃。即在PEG4000 ∶PEG6000 =2 ∶3 的基础上，当滴距为9 cm，药料温度为80 ℃，冷却液温度为5 ～8 ℃时，滴丸成型效果最好。

表4 滴丸成型因素水平

表5 交泰滴丸成型正交试验结果

表6 方差分析

2.5 交泰滴丸包衣工艺筛选结果 经反复预示得出包衣倾角为40°，转速为23.6 r/min 时，滴丸能充分翻转。由于滴丸遇热易熔化，所以在包衣过程中温度不能太高。控制进风温度在35 ℃，进风流量适宜，物料表面温度在32 ～33 ℃，既能保证包衣液溶剂的及时挥发，便于成膜，又能保证滴丸在包衣过程中不会受热变形。雾化压力试验表明，当雾化压力在1.5 kg/cm 时，喷出的液滴大小合适。所得包衣滴丸表面均匀，释放稳定性好。根据喷雾体积流量预试情况，将喷液体积流量定4.475 mL/min，不产生嚣丸现象，较为理想。在以上包衣条件下，喷入含聚合物5%的乙醇包衣液，使滴丸增重3%。即得。

2.6 工艺验证试验 通过滴丸滴制和包衣筛选的最佳工艺进行验证性试验，结果满意，指标符合制剂要求。每丸丸重0.03 g，每丸盐酸小檗碱实测量为6.08 mg。

2.7 交泰滴丸中盐酸小檗碱测定

2.7.1 色谱条件［7］伊利特hypersil ODS2 色谱柱;流动相为乙腈-0.05 mol/L 磷酸二氢钾溶液(50 ∶50)(每100 mL 中加十二烷基硫酸钠0.4 g，在以磷酸调节pH 值为4.0);检测波长为345 nm，柱温室温，体积流量1.0 mL/min，进样量20 μL。理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5 000。

2.7.2 对照品溶液制备 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇溶解，制成每1 mL 含75 μg 的溶液。

2.7.3 供试品溶液的制备 取交泰滴丸20 粒，研细，称量0.06 ɡ，精密称定，置10 mL 定量瓶中，加甲醇定容，超声处理30 min，用甲醇弥补减失的量，0.45 μm 的微孔滤膜进行过滤，取续滤液1 mL，置10 mL 定量瓶中，用甲醇定容到刻度。

2.7.4 盐酸小檗碱的线性关系考察 精密量取制备好的对照品溶液1、2、3、4、5 mL，分别置10 mL 量瓶中，用甲醇定容，制成7.5、15、22.5、30、37.5 μg/mL 的一系列溶液，依次精密量取系列溶液各20 μL 进样。以质量浓度X (μg/mL)为横坐标，峰面积Y 为纵坐标，进行线性回归，回归方程为Y =90 616X -16 239，r =0.999 85。结果表明，盐酸小檗碱进样量在7.5 ～37.5 μg/mL 范围内与峰面积之间成良好的线性关系。

2.7.5 盐酸小檗碱的精密度考察 精密吸取盐酸小檗碱对照品20 μL，连续进样5 次，计算峰面积的RSD。结果RSD为0.6%，以上数据表明仪器精密度良好。

2.7.6 盐酸小檗碱的重复性考察 取同一批样品，按供试品溶液的方法平行制备5 份，再分别吸取2 mL 置10 mL 量瓶中，用甲醇定容。在上述色谱条件下，精密量取20 μL分别进样，测定每份样品中的量，考察其重复性。结果RSD为0.4%，表明盐酸小檗碱的重复性考察合格。

2.7.7 盐酸小檗碱的稳定性考察 供试品溶液来自“2.7.3”项下，在上述色谱条件下，每次进样20 μL，在0、2、4、6、8、12 h 测定样品中盐酸小檗碱，考察其稳定性。RSD 为1.0%，表明样品中盐酸小檗碱在12 h 内含有量稳定，无变化。

2.7.8 盐酸小檗碱的加样回收率考察 取已知含有量的交泰滴丸9 份，按供试品溶液的方法进行制备，分别加盐酸小檗碱对照品适量，在上述色谱条件下，每次进样均为20 mL，加样回收率考察，由表7 可知，平均回收率为100.8%，RSD 为1.3%。

2.7.9 测定结果 每丸丸重0.03 g，每丸盐酸小檗碱实测量为6.08 mg。

3 讨论

交泰丸原方剂在临床应用和生产中有一定的缺点［8］。而目前还没有把交泰丸做成一定剂型的报道，且滴丸的诸多优点也为交泰滴丸的新剂型研究提供依据。

滴丸的成丸情况和质量受多因素影响，基质的选择、用量比例和主要活性成分含有量对滴丸的成型和原料药影响很大。而滴距、料温、冷却液温度等因素则对滴丸的外观和丸重变异系数有影响。本实验利用单因素选择和正交试验考察和筛选了影响交泰滴丸成型的工艺条件，制备出了符合《中国药典》要求的滴丸。选择合适的包衣材料并对包衣工艺进行筛选。在此基础上采用高效液相对交泰滴丸中盐酸小檗碱进行定量测定。本研究与文献［9］主要区别在于:一是使用原料不同，即黄连用盐酸小檗碱代替，肉桂用桂皮醛代替，药效学实验也证明显著有效，为今后的中药现代化打下基础。二是使用了水溶性包衣材料和技术，遮盖了小檗碱的苦味，也避免了肉桂醛的散失。三是进行了成分定量测定，方法可靠可行。结果显示，该法灵敏度高、重复性好、稳定性好、操作简单可行，可用于交泰滴丸中盐酸小檗碱的质量控制。经过滴丸滴制、包衣、定量测定试验，三部分试验能统一保证制剂稳定、质量安全、可控。

表7 盐酸小檗碱回收率实验结果

致谢： 感谢上海卡乐康包衣技术有限公司协助包衣。

［1］ 高 静，曲韵智，潘 辉，等. 仙灵骨葆滴丸的制备工艺［J］. 中国实验方剂学杂志，2010，16 (5):25-27.

［2］ 国家医药局中草药情报中心站. 植物药有效成分手册［M］北京:人民卫生出版社，1986.

［3］ 李 莉，曾艺玲. 古方交泰丸镇静催眠有效部位配比研究［J］. 亚太传统医药，2008，4 (10):28.

［4］ 铭 清. 中草药有效成分理化与药理特性［M］. 长沙:湖南科技出版社，1979.

［5］ 黄绳武，吴智慧. 安心康滴丸成型工艺研究［J］. 中国现代应用学，2006，23 (6):472.

［6］ 滕海英，祝国强，黄 平，等. 正交试验设计实例分析［J］. 药学服务与研究，2008，8 (1):75-76.

［7］ 国家药典委员会. 中华人民共和国药典:2010 年版一部［S］. 北京:中国医药科技出版社，2010:285-286.

［8］ 陈 茜. 利尔眠滴丸及其制备方法:中国，1990011 ［P］.2007-07-04.

［9］ 张坤水，陈逸生，申 楼. 交泰安神滴丸的成型工艺参数优化［J］. 中成药，2011，33 (7):1249-1252.