CYP3A5*3多态性与髓系白血病风险关系的Meta分析

刘洪超 马利敏 周 茹 阮林海

髓系白血病(myeloid leukemia，ML)是以髓系造血细胞异常增殖、分化障碍、凋亡受阻为特征的恶性克隆性疾病，是成人白血病中最常见的类型，其普遍存在获得性遗传学改变，在临床及遗传学上均表现高度异质性［1］。白血病的病因及发病机制至今尚未完全清楚，目前认为其发生是外界环境因素与内在遗传因素相互作用的结果。研究发现部分患者在分子遗传学水平存在异质性，包括基因突变、基因表达谱异常、DNA甲基化等，存在一定的遗传易感性，而机体内代谢酶系统的差异则是影响白血病易感性的重要基础之一［2，3］。

细胞色素P450酶系(cytochrome P450，CYPs)是自然界中含量最丰富、分布最广泛、底物谱最广的代谢酶系统。CYPs中含量最丰富的是CYP3A亚家族，参与约60%的处方药、环境前致癌物、类固醇激素等的代谢。它主要包括4种成员:CYP3A4、CYP3A5、CYP3A7和CYP3A43，它们串联排列于染色体7q22．1上约231kb的基因座内［4］。CYP3A5基因在10% ～97%的人群中表达，其表达及活性存在广泛的个体间、种族间差异，被认为是个体间CYP3A代谢活性差异的最主要因素［5～7］，而 CYP3A5活性的差异主要是由单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)所致，其中位于第3号内含子的6986密码子 A＞G(CYP3A5*3)是决定人群CYP3A5表达与活性的最主要因素，CYP3A5*3突变引起mRNA剪接发生改变，终止密码子提前，蛋白质截短，导致CYP3A5酶活性降低或缺乏［7～9］。国内外已有较多探索CYP3A5*3多态性与髓系白血病发生风险关系的研究，但各研究结果存在一定争议。本研究采用Meta分析定量综合评估CYP3A5*3多态性与髓系白血病易感性的关系，为髓系白血病的早期诊断提供循证医学依据。

资料与方法

1．检索文献:全面检索PubMed、中国生物医学文献数据库(CBM)、中文期刊全文数据库(CNKI)和万方数据库，获取探索CYP3A5*3多态性与髓系白血病发生风险关系的文献。检索使用的中文关键词包括:CYP3A5基因，基因多态性，白血病;英文检索词包括:Cytochrome P4503A5 or CYP3A5，polymorphism or variant，myeloid or myelogenous，leukemia。检索时间截止2013年9月20日，检索语种不限。各纳入文献有用的参考文献亦作为本研究入选文献。病例报道、评论、综述、系统评价类文献不作为纳入文献。

2．文献纳入标准:纳入Meta分析的文献均符合以下标准:①原始资料为已公开发表的文献;②病例—对照研究方法;③病例组诊断明确，符合ML诊断标准;④病例组和对照组各基因型例数表达明确。两位研究者独立评价纳入文献质量，并提取文献基本资料，包括第一作者、出版年份、基因分型方法、样本量、病例组与对照组各基因型分布情况。如有争议则共同复查原文后协商决定。

3．统计学方法:本研究以CYP3A5*1/*1基因型频率为参考，以病例组和对照组CYP3A5*3基因型分布的OR值为效应指标，对各纳入研究的原始数据进行合并分析。Q检验评估纳入研究间的异质性，检验水准α=0．05，如各研究间无显著异质性(P＞0．05)则采用固定效应模型;如存在显著异质性(P＜0．05)则采用随机效应模型合并数据。漏斗图评估发表性偏倚。应用RevMan 5．2软件进行上述统计分析。

结 果

1．纳入文献的基本情况:经过文献检索和严格筛选，最终共纳入5个病例对照研究，包括ML患者929例，对照1080例。5个研究均以亚洲人群为研究对象，均采用 PCR-RFLP 基因分型方法［10～14］。Rao等［13］和 Sailaja 等［14］研究中对照组 CYP3A5*3 基因型分布不符合Hardy-Weinberg平衡。各纳入文献基本特征和原始数据见表1。

表1 纳入Meta分析文献的基本特征

2．CYP3A5*1/*3基因型与ML关系:异质性检验结果P＜0．0001，表明纳入研究间存在显著异质性，采用随机效应模型合并数据，合并OR及95%CI为1．45(0．91 ～ 2．32)。Z=1．54，P=0．120，表明CYP3A5*1/*3基因型与ML发生无关(图1)。

图1 CYP3A5*1/*3基因型与ML关系分析

3．CYP3A5*3/*3基因型与ML关系:异质性检验结果P＜0．00001，说明纳入研究间存在显著异质性，采用随机效应模型合并数据，合并OR及95%CI为1．60(0．89 ～ 2．85)，Z=1．58，P=0．11，表明CYP3A5*3/*3基因型与ML发生无关(图2)。

4．CYP3A5(*1/*3+*3/*3)基因型与 ML关系:异质性检验结果P＜0．00001，采用随机效应模型合并数据，合并 OR及 95%CI为 2．69(0．86～8．38)，Z=1．71，P=0．09，表明 CYP3A5(*1/*3+*3/*3)基因型与ML发生无关(图3)。

图3 CYP3A5(*1/*3+*3/*3)基因型与ML关系分析

5．发表性偏倚与敏感度分析:RevMan5．2软件分析漏斗图中各点分布基本对称，表明不存在显著发表性偏倚(漏斗图结果未示)。在敏感度分析过程，通过删除 Rao等［13］和 Sailaja等［14］研究，依据异质性检验结果重新合并分析，结果显示与删除之前一致，说明目前所得结果是稳定的(敏感度分析结果未示)。

讨 论

CYP3A亚家族是机体内底物谱最广、含量最多的Ⅰ相代谢酶，亦是药物代谢反应中最主要的限速酶。CYP3A5是CYP3A亚家族中主要的肝外分布形式，如在肠壁、肾、前列腺和肺组织中表达。CYP3A5基因位于人类第 7号染色体 q21．1，基因全长31．8kb，含有13个外显子，编码蛋白含502个氨基酸［4］。CYP3A5基因的表达与活性具有高度多态性，存在广泛的个体及种族间差异，提示CYP3A5基因的遗传变化可能是CYP3A介导的药物代谢及反应中出现个人、种族间差异最重要原因。CYP3A5*3多态性是指在第3号内含子6986位点出现A＞G突变，从而出现1个隐含的受体剪接位点，该位点促使基因内假外显子序列插入成熟mRNA，随后外显子缺失和(或)其他基因内序列插入，这些异常剪接导致终止密码子提前出现［8］。变异型CYP3A5*3 mRNA不稳定而迅速降解，CYP3A5酶活性降低或缺乏，因此CYP3A5*3多态性可能与人类肿瘤的发生相关。

国内外已有较多探索CYP3A5*3多态性与髓系白血病发生风险关系的研究，但各研究结果存在一定差异。Meta分析通过增大样本含量，提高了检验效能和效应量估计精度，定量综合不一致的研究结果，得出更全面、更可靠的结论。本研究最终共纳入5篇文献包括ML患者929例，对照1080例。异质性检验结果表明纳入研究间存在显著异质性，采用随机效应模型合并数据。目前的 Meta分析结果显示，CYP3A5 基因*1/*3、*3/*3、(*1/*3+*3/*3)的合并 OR 及 95%CI分别为 1．45(0．91 ～2．32)、1．60(0．89 ～2．85)和2．69(0．86 ～8．38)，对应 P 值分别为0．12、0．11 和 0．09，表明 CYP3A5*3 多态性与髓系白血病发生风险无显著关联。

总之，本研究表明CYP3A5*3多态性与髓系白血病发生风险无相关性，且漏斗图未检测出显著性发表性偏倚，敏感度分析结果说明目前的结论是可靠的。需要指出的是，本研究纳入文献较少，在Meta分析过程中可能存在混杂因素等，会在一定程度上影响Meta分析结果。因此将来需要开展大样本量、多中心、设计良好的临床研究，及时全面收集最新研究资料，定期更新系统评价。

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