溶剂类型对红皮云杉球果多酚类物质的提取及抗氧化能力的影响

郑洪亮，王 萍，高新新，位 珍，王振宇，2，*（.东北林业大学林学院，黑龙江哈尔滨50040；2.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院，黑龙江哈尔滨50086）

溶剂类型对红皮云杉球果多酚类物质的提取及抗氧化能力的影响

郑洪亮1，王 萍1，高新新1，位 珍1，王振宇1，2，*
（1.东北林业大学林学院，黑龙江哈尔滨150040；2.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院，黑龙江哈尔滨150086）

利用不同溶剂提取红皮云杉球果中多酚类化合物并测定了三种酚类化合物（总多酚，黄酮和原花青素）的含量和提取物的抗氧化性能力（清除DPPH自由基，清除羟基自由基和还原力）。结果表明，提取溶剂的差异对红皮云杉球果提取物总多酚，黄酮，原花青素含量和抗氧化活性影响显著。红皮云杉球果中含有较高含量的多酚（88.90± 1.37）mg/g、原花青素（74.26±0.74）mg/g，和相对较低含量的黄酮类化合物（47.80±0.86）mg/g。原花青素是红皮云杉球果提取物中重要的组成部分，并在红皮云杉球果提取物的抗氧化能力中起到了重要作用。实验中鉴定出的含量较高的绿原酸和儿茶素可以极大地促进了提取物的抗氧化活性。

红皮云杉，松多酚，抗氧化，原花青素

合成抗氧化剂由于具有潜在的致癌性，其使用逐渐受到限制。植物中含有丰富的天然活性抗氧化剂，包括维生素，生物碱，酚类化合物和黄酮类化合物[1]。寻找植物来源的天然抗氧化剂成为了目前的趋势。消费者更关注依赖于天然防腐剂从而获得健康的生活方式和营养素[2]。据研究表明，植物成分的抗氧化作用主要归因于多酚类化合物，如黄酮类、酚酸类物质、原花青素和酚类二萜[3]。多酚类物质具有消炎、抗过敏、抗菌、抗致癌和抗病毒的作用[4]，在人类健康中发挥了重要作用。在植物中，这些化合物的抗氧化能力可以防止脂质过氧化和低密度脂蛋白的氧化修饰。

红皮云杉主要应用以其为原料的纸浆工业和建筑业，但球果不能被充分利用，并且关于红皮云杉的化学成分和生物活性的研究很少，特别是对红皮云杉球果中的酚类化合物没有深入的研究报道。由于酚类化合物具有较强的抗氧化能力[5]，大量的提取方法被用来从植物材料提取多酚类物质，包括超临界流体萃取[6]，索氏提取和加压低极性水萃取[7]。然而，提取酚类化合物最常用的方法是利用有机溶剂或含水有机溶剂与植物材料混合一段时间内，以保证完全提取[8]。常用提取酚类化合物的溶剂包括丙酮[9]，乙醇[10]，乙酸乙酯[11]，己烷[12]，甲醇[13]等。

本研究利用正丁醇（100%），乙酸乙酯（100%），蒸馏水，丙酮（20%、40%、60%、80%、100%），乙醇（20%、40%、60%、80%、100%）13种不同极性的溶剂从红皮云杉球果粉末中提取酚类化合物，并测定各种溶剂提取物中三种酚类化合物（总酚，黄酮和原花青素）含量和提取物的抗氧化活性（清除DPPH自由基、清除羟自由基和还原能力），利用RP-HPLC法初步分析鉴定红皮云杉球果提取物。为后续研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

红皮云杉球果 黑龙江省苇河林业局，采集时间为（2011年）9月份，将球果鳞片（去掉中间木质轴）低温干燥后粉碎过80目筛后-20℃密封冷冻，备用；DPPH（2，2-二苯基-1-苦基肼）、2-脱氧-D-核糖、Trolox、没食子酸 均购自Sigma公司；乙酸乙酯、正丁醇、丙酮和乙醇、碳酸钠、福林酚试剂（FC）、盐酸、氮蓝四唑、磷酸氢钠、磷酸氢二钠、氯化铁（III）六水合物、乙二胺四乙酸二钠盐、过氧化氢、抗坏血酸、三氯乙酸、2-硫代巴比妥酸（TBA）、乙二胺四乙酸、FRAP试剂、乙醇 均为分析纯；蒸馏水。

SHB－3型循环水多用真空泵 郑州杜甫仪器厂；RE－52A型旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂；TDL－40B－W型台式低速大容量离心机 湖南星科科学仪器有限公司；KQ－500DE型数控超声波清洗机 昆山市超声波仪器有限公司；Agilent 1260型高效液相色谱仪 美国安捷伦科技有限公司，包括四元泵、自动进样器、柱温箱、VWD检测器检测器、DAD二极管阵列检测器和在线脱气机、Sino Chrom ODSBP反向色谱柱（5μm、4.6mm×150mm）。

1.2 实验方法

1.2.1 红皮云杉球果粗提物的制备 准确称量2.000g的红皮云杉球果粉末于250mL锥形瓶中用来提取粗多酚。用N-正丁醇，醋酸乙酯，用蒸馏水，丙酮（20%、40%、60%、80%），丙酮，乙醇（20%、40%、60%、80%）和乙醇做提取剂，以料液比1∶30（mg/mL），温度50℃提取3h。提取得到的混合物在4000r/min离心20min，收集上清液，残渣用相应的试剂提取直到上清液颜色接近无色。收集所有上清液40℃条件下旋转蒸发出去乙醇获得多酚粗提物，4℃储藏于棕色瓶中待用。

1.2.2 多酚含量的测定 多酚的测定方法采用福林酚比色法，参考自Dewanto[14]。建立没食子酸标准曲线y=4.4076x-0.0014（R2=0.9983）。

1.2.3 黄酮含量的测定 黄酮含量的测定方法参考Dewanto[14]。通过儿茶素标准曲线，以儿茶素当量值表示总黄酮含量，儿茶素标准曲线是y=1.1325x-0.0056，（R2=0.9989）。

1.2.4 原花青素含量测定 原花青素的含量的测定采用香草醛法[15]略改。1mL样液中加入2.5mL 4%的香草醛-甲醇溶液和2.5mL 30%的硫酸-甲醇溶液，混匀后37℃避光15min，510nm处测定混合物吸光值。通过儿茶素标准曲线，以儿茶素当量值表示原花青素含量，儿茶素标准曲线是y=2.0437x+0.0078，（R2= 0.9993）。

1.2.5 清除DPPH自由基能力 精确吸取1.000mL的红皮云杉球果多酚提取物溶液（10～250μg/mL），之后加入4.0mL 1×10-4mol/L DPPH溶液（用无水乙醇配制），摇匀后37℃避光反应30min，后于517nm处测定吸光值，用Trolox作阳性对照，同时做平行实验。清除率计算公式如下：

RSA（%）＝[A3-（A1-A2）]/A3×100

式中：A1为红皮云杉球果提取物、Trolox加DPPH溶液；A2为红皮云杉球果提取物或Trolox加无水乙醇；A3为与红皮云杉球果提取物或Trolox等量蒸馏水加DPPH溶液。

1.2.6 清除羟基自由基能力 对羟基自由基的清除作用采用生成硫代巴比妥酸法来测定，用2-脱氧-D-核糖作底物，这个方法来自于Hsu[16]。清除率计算公式如下：

RSA（%）＝[A3-（A1-A2）]/A3×100

式中：A1为红皮云杉球果提取物、Trolox加所有试剂；A2为红皮云杉球果提取物、Trolox加除2-脱氧-D-核糖以外的所有试剂；A3为蒸馏水或者无水乙醇加所有试剂。

1.2.7 铁离子还原能力（FRAP法） 铁离子还原能力测定方法参见文献[17]。

1.2.8 多酚类物质的高效液相色谱初步分析 20mL 60%丙酮（BHT（1g/l））中加入0.500g样品干物质，然后加入10mL 1mol/L的HCl，混匀后离心15min，90℃回流2h，混合物过0.45μm滤膜后吸取5μL注入高效液相色谱分析仪中。洗脱程序为0～11min，95A/5B～ 85A/15B；11～16min，85A/15B～83A/17B；16～23min，83A/17B～78A/22B；23～33min，78A/22B～70A/30B；33～60min，70A/30B～50A/50B；60～65min，50A/50B～ 50A/50B；65～70min，50A/50B～5A/95B。检测波长为280nm，洗脱剂为甲醇-水（0.05%三氟乙酸），流速为1mL/min，柱温为30℃。

2 结果与讨论

2.1 提取溶剂种类对总酚、总黄酮和原花青素含量影响

2.1.1 总酚含量分析 通常用于提取的溶剂根据提取目的（制备或分析），提取物质的物理化学性质，试剂及设备的可用性，成本和安全问题进行选择[18]。根据所提取溶剂的不同，红皮云杉球果提取物中的总酚含量（TPC）分布在（16.06±1.22）～（88.90±1.37）mg/g，分别为乙酸乙酯和60%的丙酮（图1），由图1可知，60%丙酮具有最佳的提取能力。根据TPC提取率（mg/g），在本研究中所用的溶剂提取效果顺序为：丙酮（60%），丙酮（40%），乙醇（60%），乙醇（40%），乙醇（80%），丙酮（20%），丙酮（80%），乙醇，乙醇（20%），蒸馏水，丙酮，正丁醇，乙酸乙酯。与以前的研究[19]相一致，我们的研究结果同样发现TPC提取效果因提取溶剂不同而异。Zielinski&Kozlowska[20]的研究表明，80%的丙酮提取谷类种子中多酚最有效。同样，Zhou&Yu[21]研究表明，50%丙酮的小麦提取物含有最高的TPC。在另一项研究中发现，从花生壳中提取总酚，80%乙醇和80%的甲醇比水更有效。

2.1.2 总黄酮含量分析 红皮云杉球果提取物中总黄酮含量从（3.23±0.45）～（47.80±0.86）mg/g变化，分别为乙酸乙酯和60%乙醇。实验中使用的溶剂对总黄酮的提取效果顺序与总多酚含量顺序基本相似。Zielinski&Kozlowska[20]研究也表明，从谷物种子中提取黄酮类化合物，80%的丙酮是一种有效的提取溶剂。同样，有研究证明，有机溶剂（尤其是丙酮或乙醇）加入一定比例水能明显改进黄酮类化合物的提取产率[22]。

2.1.3 原花青素含量分析 松科植物含有大量原花青素[23]，我们的研究结果证实了这一点。提取物中原花青素的含量（PC）从（3.97±0.56）～（74.26±0.74）mg/g分布，分别是乙酸乙酯和60%的丙酮。从提取效率的角度来看，用60%丙酮提取时原花青素含量最高（平均（75.4±1.42）mg/g，其次是60%乙醇（平均（68.54± 0.95）mg/g）。Chavan等[24]研究表明，从不同的豌豆中提取原花青素，70%的丙酮（加酸或者无酸）的提取效果都要比100%的丙酮溶液提取效果好。选择含水丙酮做为提取溶剂，是因为它是提取富含原花色素样品的最有效的媒介[25]。

图1 红皮云杉球果不同提取物中酚类物质含量Fig.1 Phenolic contents of different solvent extracts of Picea koraiensis Nakai’s cones

2.2 提取溶剂种类对提取物抗氧化能力的影响

2.2.1 清除DPPH自由基的能力 为了确定最合适的提取溶剂，清除DPPH自由基实验用于评估提取物的抗氧化能力（如表1所示）。由表1可知，提取溶剂的类型对提取物的总抗氧化能力有显著的影响。提取物的抗氧化IC50值由（28.272±0.67）μg/mL（60%丙酮提取物），到（103.134±0.77）μg/mL（乙酸乙酯提取物）。60%的丙酮提取物表现出最高的清除能力，其次是Trolox，IC50值分别为（28.272±0.67）μg/mL和（29.103±0.78）μg/mL。60%的乙醇也具有较好的提取效果（IC50值为（34.367±2.01）μg/mL），其次是80%丙酮（IC50值为（36.243±2.03）μg/mL）。用正丁醇，乙酸乙酯，蒸馏水，丙酮，乙醇做为提取剂时，IC50值较高，抗氧化能力较差。其中乙酸乙酯提取物的抗氧化能力最差（IC50值分别为（103.134±0.77）μg/mL）（见表1）。此外，研究发现有机溶剂的水溶液相对于纯有机溶剂表现出显著的抗自由基活性。这些结果表明，有机溶剂的水溶液能更有效的从红皮云杉球果中提取出有效清除DPPH自由基的化合物。此外，提取物间抗氧化能力的显著差异，本质上是由于提取溶剂极性的差异，使提取出的抗氧化化合物含量的存在差异[26]。研究表明，溶剂的极性能够引起植物中的多酚类化合物提取含量的显著差异[27-28]。

表1 不同溶剂提取物清除DPPH·能力Table 1 DPPH·scavenging activity of different solvent extracts

表2 不同溶剂提取物清除OH·能力Table 2 OH·scavenging activity of different solvent extracts

实验结果表明，将水添加到有机溶剂（尤其是丙酮和乙醇）中能显著的改进提取能力和提取物的抗氧化活性[29]。大麦利用丙酮/水（8∶2）的溶剂系统提取后可以获得具有最高的抗氧化活性。建立相同的溶剂系统，通过比较泰国土著植物中酚类和DPPH自由基清除能力的研究中也得出了这一结论[26]。综上，有机溶剂的水溶液提取多酚的能力和提取物清除DPPH自由基的能力比其他提取溶剂更强。

2.2.2 清除羟基自由基的能力 在活性氧自由基中，羟基自由基是最活泼的有氧代谢过程中产生的主要的内源性自由基[30]，通常利用2-脱氧-D-核糖方法来评价提取物清除这些自由基的能力。结果表明，所有红皮云杉球果提取物均具有一定清除活性羟基自由基的能力（如表2所示）。提取物中IC50值最低的是60%丙酮的提取物（50.408±1.38）μg/mL，其次是60%乙醇提取物（56.166±1.67）μg/mL。然而，所有的提取物清除羟基自由基的能力明显低于抗氧化对照品Trolox（IC50值为（44.085±1.12）μg/mL）。

2.2.3 铁离子还原能力（FRAP法） 采用了FRAP法来评价提取溶剂对红皮云杉球果提取物的抗氧化能力的影响（如表3所示）。所有提取物表现出相对较高的抗氧化活性，但60%的丙酮以（5.59±0.38）mmol/L FeSO4当量表现出最高还原能力，其次是40%丙酮和60%乙醇，FeSO4当量分别为（5.30±0.07）mmol/L和（5.02±0.47）mmol/L。所有提取物还原能力的强弱趋势，类似清除DPPH自由基和羟基自由基能力的趋势。在三个抗氧化指标中，60%丙酮的提取物的抗氧化活性均为最高的。还原能力可以作为抗氧化能力测定的重要指标[31]。这可能是由于60%丙酮提取物中的总酚含量较高的原因。有研究称，提取溶剂的极性和提取物中抗氧化物质的不同都会影响提取物的抗氧化能力[25]。还原酮，如抗坏血酸可以通过打破自由基链促进还原反应的发生，还可以与过氧化物或者某些过氧化物的前体直接反应，从而防止了过氧化氢的形成[32]。

2.3 相关性分析

利用SPSS13.0软件分析球果中活性物质的含量与提取物的抗氧化能力的相关性。

SPSS分析结果表明（见表4），总黄酮、原花青素和总酚类物质的含量的相关系数为0.897和0.955，t检验的显著性概率均小于0.01，表明两种物质和多酚之间显著相关，且红皮云杉球果多酚中的原花青素含量较高。三个抗氧化指标的相关性分析，t检验的显著性概率为0.000＜0.01，拒绝零假设，表明三种指标之间相关性分析显著，且三种活性物质都显示出较好的抗氧化效果。根据相关系数，在抗氧化指标中原花青素的相关性系数均高于黄酮仅次于多酚，表明原花青素在粗提物总体抗氧化中发挥了主导作用。综上，由于红皮云杉球果中原花青素含量较高且抗氧化能力较强，对于红皮云杉球果中原花青素的进一步研究和分析是必要的。

表3 不同溶剂提取物还原能力（相当于FeSO4的量/mmol/L）Table 3 Reducing powers of different solvent extracts

表4 红皮云杉球果不同提取物的酚类物质含量和抗氧化能力相关性分析表Table 4 Correlation analysis of the content and antioxidant activities of different solvent extracts of Picea koraiensis Nakai’s cones

2.4 红皮云杉球果提取物的高效液相色谱初步分析

酚类物质主要以苷元，甙类，酯类的形式存在于植物或细胞壁上。因此，糖苷配基一般用酸性水解来释放。利用RP-HPLC通过DAD多波长检测器，根据样品峰的保留时间和光谱特性，与标准峰比对后，11种酚类化合物被初步鉴定出。红皮云杉球果提取物的色谱图确定出9种酚类化合物：没食子酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、香豆酸、白藜芦醇、芦丁、肉桂酸、槲皮素（图2）。此外，由图2可知，绿原酸、儿茶素是红皮云杉球果提取物中含量较高的酚类化合物。如表4所示，总酚含量和抗氧化活性之间的相关性较高可能是由于这两种物质含量较高的原因。已有研究表明抗氧化剂能猝灭自由基、单线态氧和过氧化氢。因此，很多的食品科学家和医疗专业人员都对天然的抗氧化剂感兴趣，如多酚类物质[33-34]。

图2 红皮云杉球果酚类物质高效液相色谱分析图。Fig.2 RP-HPLC Chromatographic profiles of phenolic standards，and Picea koraiensis Nakai’s cones extract

虽然抗氧化剂往往被添加到食品中保持食品稳定性，防止出现异味，但其医疗效果已引起了广泛的兴趣。绿原酸和咖啡酸在芳香族残基上有邻羟基能清除活性氧（ROS），因此它们具有抗突变，抗癌和体外抗氧化活性[35]。儿茶素是黄酮类化合物，黄酮类化合物因其相对较高的抗氧化能力和在人类饮食的丰富含量而备受关注，潜在抗氧化能力说明在饮食中摄取和治疗中使用儿茶素可以显著的促进健康[36-37]。

如图2所示，出峰时间在43.768min附近的未知峰的化合物是红皮云杉球果HPLC图谱中的主要物质之一，含量很高，并可能具有很强的抗氧化活性。它的结构目前正在调查中。其他含量较小的酚类化合物也不容忽视，因为生物活性是通过不同的化学物质之间的协同工作实现的。

3 结论

综上，从红皮云杉球果提取多酚类化合物时，提取溶剂（纯有机溶剂或者有机溶剂的水溶液）极性的差异对活性物质含量和提取物的抗氧化活性影响显著不同。研究后可以得出结论：极性较高的溶剂比低极性的溶剂提取效果更好。一定比例的丙酮和乙醇水溶液可以提高提取能力和抗氧化活性。研究可知：丙酮/水（6∶4）最适合提取红皮云杉球果的酚类物质（总酚得率为（88.90±1.37）mg/g）且提取物抗氧化能力最强；原花青素含量与总酚类物质的含量相关系数高达0.955，是红皮云杉球果多酚的主要组成部分；与提取物清除DPPH·、OH·能力和还原力相关系数分别为0.936、0.903、0.940，说明在提取物的整体抗氧化活性起到主导作用。此外，初步鉴定出的绿原酸和儿茶素是红皮云杉球果提取物中含量较高的酚类化合物，可促进了提取物的抗氧化活性。这些结果表明，从天然来源的生物中选择性提取高活性物质，适当的选择提取溶剂很重要。松多酚具有较高的抗氧化活性，并且它可作为一种天然抗氧化剂，广泛应用于食品、化妆品、功能性食品和医疗领域的。

[1]张桂芝，耿莎，杨海燕，等.植物抗氧化成分的研究进展[J].食品科学，2007，12：551-553.

[2]龚艳振，徐亚健，刘华巍，等.天然抗氧化剂复配研究进展[J].食品科技，2012（6）：264-267，272.

[3]Pietta PG.Flavonoids as antioxidants[J].Journal of Natural Products，2000，63（7）：1035-1042.

[4]Medina I，Gallardo JM，Gonzaalez MJ，et al.Effect of molecular structure of phenolic families as hydroxylcinnamic acids and catechins on their antioxidant effectiveness in minced fish muscle[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2007，55（10）：3889-3895.

[5]Nazaruk J.Antioxidant activity and total phenolic content in Cirsium five speciesfrom northeastregion ofPoland[J]. Fitoterapia，2008，79（3）：194-196.

[6]Palanisamy U，Cheng HM，Masilamani T，et al.Rind of the rambutan，Nephelium lappaceum，a potential source of natural antioxidants[J].Food Chemistry，2008，109（1）：54-63.

[7]Karacabey E，Mazza G，Bayindirli L，et al.Extraction of bioactive compounds from milled grape canes（Vitis vinifera）using a pressurized low-polarity water extractor[J].Food and Bioprocess Technology，2012（5）：359-371.

[8]Alothman M，Bhat R，Karim A.Antioxidant capacity and phenolic content of selected tropical fruits from Malaysia，extracted with different solvents[J].Food Chemistry，2009，115（3）：785-788.

[9]Chen LG，Yang LL，Wang CC.Anti-inflammatory activity of mangostins from Garcinia mangostana[J].Food and Chemical Toxicology，2008，46（2）：688-693.

[10]Destandau E，Toribio A，Lafosse M，et al.Centrifugal partition chromatography directly interfaced with mass spectrometry for the fast screening and fractionation of major xanthones in Garcinamangostana[J].Journal of Chromatography，2009，1216（9）：1390-1394.

[11]Chaivisuthangkura A，Malaikaew Y，Chaovanalikit A，et al. Prenylated xanthone composition of Garcinia mangostana（mangosteen）fruit hull[J].Chromatographia，2008，69（3-4）：315-318.

[12]Sakagami Y，Iinuma M，Piyasena KG，et al.Antibacterial activity ofalpha-mangostin againstvancomycin resistant Enterococci（VRE） and synergism with antibiotics[J]. Phytomedicine，2005，12（3）：203-208.

[13]Chairungsrilerd N，Furukawa KI，Ohta T，etal. Pharmacological properties of α-mangostin，a novel histamine H1 receptor antagonist[J].European Journal of Pharmacology，1996，314（3）：351-356.

[14]Dewanto V，Wu X，Adom K，et al.Thermal processing enhances the nutritional value of tomatoes by increasing total antioxidant activity[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2002，50（10）：3010-3014.

[15]Shan B，Cai YZ，Sun M，et al.Antioxidant capacity of 26 spice extracts and characterization of their phenolic constituents [J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2005，53（20）：7749-7759.

[16]Hsu B，Coupar MI，NG K.Antioxidant activity of hot water extract from the fruit of the Doum palm，Hyphaene the baica[J]. Food Chemistry，2006，98（2）：317-328.

[17]栾德仕，王玉洁，王萍.pH、温度对笃斯越橘花色苷粗提物抗氧化活性的影响[J].食品工业科技，2013（8）：142-146，149.

[18]Yu L，Haley S，Perret J，et al.Antioxidant properties of hard winter wheat extracts[J].Food Chemistry，2002，78（4）：457-461.

[19]Turkmen N，Sari F，Velioglu YS.Effects of extraction solvents on concentration and antioxidant activity of black and black mate tea polyphenols determined by ferrous tartrate and Folin-Ciocalteu methods[J].Food Chemistry，2006，99（4）：835-841.

[20]Zielinski H，Kozlowska H.Antioxidant activity and total phenol in selected cereal grains and their different morphological fractions[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2000，48（6）：2008-2016.

[21]Zhou K，Yu L.Effects of extraction solvent on wheat bran antioxidant activity estimation[J].Lebensmittel-Wissenschaft& Technologie，2004，37（7）：717-721.

[22]Robards K，Antolovich M.Analytical chemistry of frit bioflavonoids-a review[J].Analyst，1997，122：11R-34R.

[23]Maimoona A，Naeem I，Saddiqe Z，et al.A review on biological，nutraceutical and clinical aspects of French maritime pine bark extract[J].Journal of Ethnopharmacology，2011，133（2）：261-277.

[24]Chavan UD，Shahidi F，&Naczk M.Extraction of condensed tannins from beach pea（Lathyrus maritimus L.）as affected by different solvents[J].Food Chemistry，2001，75（4）：509-512.

[25]Naczk M，Shahidi F.Extraction and analysis of phenolics in food[J].Journal of Chromatography，2004，1054（1-2）：95-111.

[26]Maisuthisakul P，Suttajit M，Pongsawatmanit R.Assessment of phenolic content and free radical-scavenging capacity of some Thai indigenous plants[J].Food Chemistry，2007，100（4）：1409-1418.

[27]Parida AK，Das AB，Sanada Y，et al.Effects of salinity on biochemical components of the mangrove，Aeceras corniculatum [J].Aquatic Botany，2004，80（2）：77-87.

[28]Galvez CJ，Martin-Cordero PA，Houghton M.Antioxidant activity of methanol extracts obtained from Plantago species[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry，2005，53（6）：1927-1933.

[29]Zhao H，Dong J，Lu J，et al.Effect of extraction solvent mixtures on antioxidant activity evaluation and their extraction capacity and selectivity for free phenolic compounds in barley（Hordeum vulgare L.）[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2006，54（19）：7277-7286.

[30]Waling C.Fenton’s reagent revisited[J].Accounts of Chemical Research，1975（8）：125-131.

[31]Tanaka MC，Kuie W，Nagashima Y，et al.Application of antioxidative Maillard reaction products from histidine and glucose to sadine products[J].Nippon Suisan Gakkaishi，1998，54（26）：1409-1410.

[32]Shimada K，Fujikawa K，Nakamura T.Antioxidative properties of xanthan on the autoxidation of soybean oil in cyclodextrin emulsion[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，1992，40：945-948.

[33]Bourgou S，Ksouri R，Bellila A，et al.Phenolic composition and biological activities of Tunisian Nigella sativa L.shoots and roots[J].Comptes Rendus Biologies，2008，331（1）：48-55.

[34]Chiou A，Karathanos VT，Mylona A，et al.Currants（Vitis vinifera L.）content of simple phenolics and antioxidant activity [J].Food Chemistry，2007，102（2）：516-522.

[35]Blache D，Durand P，Prost M，et al.（+）-Catechin inhibits platelet hyperactivity induced by an acute iron load in vivo[J]. Free Radical Biology and Medicine，2002，33（12）：1670-1680.

[36]Havsteen BH.The biochemistry and medical significance of the flavonoids[J].Pharmacology&Therapeutics，2002，96（2-3）：67-202.

[37]Basu A，Lucas EA.Mechanisms and effects of green tea on cardiovascular health[J].Nutrition Research Reviews，2007，65（8）：361-375.

Effect of extraction solvents on phenolic contents and antioxidant activities of Picea koraiensis Nakai’s cones

ZHENG Hong-liang1，WANG Ping1，GAO Xin-xin1，WEI Zhen1，WANG Zhen-yu1，2，*
（1.College of Forestry，Northeast Forestry University，Harbin 150040，China；2.College of Food Science and Engineering，Harbin Institute of Technology，Harbin 150086，China）

The antioxidant properties and contents of phenolic compounds from Picea koraiensis Nakai’s cones were examined.Three phenolic compounds parameters（total phenols，flavonoids and proanthocyanidins）and three antioxidant properties parameters（scavenging DPPH radicals，scavenging hydroxyl radicals and reducing power）were measured.The results showed that the extracting solvents significantly effected the contents of total polyphenol，flavonoids，proanthocyanidins and antioxidant activities in Picea koraiensis Nakai’s cones. Picea koraiensis Nakai’s cones contained high contents of total phenol（88.90±1.37）mg/g and proanthocyanidins（74.26±0.74mg/g），relatively low flavonoids（47.80±0.86）mg/g.Proanthocyanidins was the major important component of pine polyphenols and played an important role in the antioxidant activities.The chlorogenic acid and catechin identified in Picea koraiensis Nakai’s cones extractation might contribute greatly to the high antioxidant activities of the extracts.

Picea koraiensis Nakai；pine polyphenols；antioxidant；proanthocyanidins

TS201.1

A

1002-0306（2014）12-0127-06

10.13386/j.issn1002-0306.2014.12.018

2013－09－26 *通讯联系人

郑洪亮（1987-），男，硕士研究生，研究方向：功能性植物资源的开发与利用。

国家自然基金资助项目（31170510）。