滇重楼采收期研究

赵庭周，王卜琼，马 青，樊启龙

(云南白药集团 中药材优质种源繁育有限责任公司，云南 武定651600)

重楼以地下根茎入药，性微寒、味苦，归肝经，具有清热解毒、消肿止痛、平喘止咳、凉肝定惊之功效[1]，是宫血宁、热毒清、季德胜蛇药等多种著名中成药的原料。

由于重楼极高的药用价值和旺盛的市场需求，药材价格连续10年持续上涨，目前每千克价格已接近400元。巨大的市场需求加速了重楼资源的迅速减少，也激发了人们的种植热情，也推动了重楼的驯化栽培技术研究[2-4]。但多数研究集中在重楼的繁殖生物学及资源评价方面，鲜见有关重楼药材生产周期方面的详细研究报道[5-7]。一方面，重楼的驯化栽培时间比较短，短期内还没有形成有效的栽培模式；另一方面，重楼的种苗繁育困难，时间较长，种苗获得不易。

每月采集滇重楼地下根茎，按2010版《中华人民共和国药典》一部标准，分析皂苷含量，寻求皂苷含量较高的月份。以滇重楼种子为繁育材料，连续跟踪滇重楼种子幼苗的生长情况、皂苷含量，综合分析滇重楼药用部位的生物积累量和皂苷成分含量，分析滇重楼种植的经济效益，提出滇重楼药材合理的采收周期，促进滇重楼种植产业的健康发展。

1 材料与方法

1.1 材料

重楼种子采自公司2002年建设的资源圃，经中国科学院昆明植物研究所纪运恒鉴定为滇重楼Parispolyphyllavar.yunnanensis(Fr.) Hand.-Mazz.。

滇重楼地下根茎采自公司2007年种植的重楼，已生长6年。

1.2 仪器与试药

WATERS高效液相色谱仪，包括510泵，717自动进样器，996二极管阵列检测器，Millennium2010色谱管理系统。对照用重楼甾体皂苷I、II、Ⅵ、Ⅶ、H和PA购自中国科学院昆明植物研究所，采用HPLC法测定纯度均在99%以上。乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

1.3 方法

1.3.1 滇重楼地下根茎样品的采集

每月15日，随机采挖20株滇重楼，洗净，从地下根茎茎痕(每年地上茎枯萎脱落后，在地下根茎上形成的疤痕，一般一年形成一个茎痕。)处切段，晾干，分别称取各段的重量，记录鲜重。然后，放入烘箱，60 ℃烘干，记录干重。

1.3.2 滇重楼种子幼苗地下根茎生物生长量的测定

12月份，滇重楼种子幼苗地上茎枯萎后，按生长年限(1～8年)分开，每个苗龄随机采挖20株，洗净，晾干，称取重量，记录鲜重。然后，放入烘箱，60 ℃烘干，记录干重。

1.3.3 重楼皂苷的测定

按照药典标准，测定地下根茎中甾体皂苷I、II、Ⅵ、Ⅶ、H和PA的含量。取粉碎混匀后的样品粉末 (过三号筛) 约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，超声处理(功率250 W，频率25 kHz)40 min，自然冷却，再称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为试验样品。

色谱柱：Agilent SB-C18(250 mm×4.6 mm，5 μL) ；以乙腈—水(19∶81)为流动相；检测波长203 nm；流速1.0 mL/min；柱温30 ℃。

2 结果与分析

2.1 滇重楼地下根茎的生长发育规律

滇重楼以地下根茎入药，采收地下根茎是滇重楼人工种植获得收入的主要途径。多年生地下根茎的生长主要是靠顶芽的生长发育来完成的。顶芽的形成按年度循环发生，一般情况下，由顶芽发育而成的地上茎一年生长一次，枯萎一次，地上茎枯萎脱落后在地下根茎上留下一个疤痕，称茎痕。生物量的积累主要反映顶芽发育好，当年地下根茎的生长量就大；顶芽损坏后，地下根茎当年就停止生长。分段取样后，通过比较顶芽占地下根茎的重量比率，了解顶芽的生长发育规律，从而得到滇重楼地下根茎生物量的月度变化规律。

从图1得知，滇重楼地下根茎的生长旺盛期从6月份开始，到10月份达到顶峰。然后，10月至翌年2月份为地下根茎的潜伏期，生长缓慢。2月份以后，由于分化形成第二年的地上茎，消耗了部分地下根茎积累的营养物质，地下根茎的生长量下降。

图1 滇重楼地下根茎的生长发育规律

2.2 滇重楼地下根茎皂苷含量的月度变化规律

滇重楼地下根茎的皂苷含量，7月份最高，6月份最低。具有地上茎叶的月份(7月、8月、9月、10月、11月)比没有地上茎叶的月份(12月、翌年1月、翌年2月、翌年3月、翌年4月)高。9月份以后，重楼皂苷含量下降明显；11月至翌年3月，重楼皂苷含量有细小的变化；3月至6月份，重楼皂苷的含量逐月下降，6月份降到最低。除6月份外，其他月份重楼皂苷的含量都超过了2010年版《中华人民共和国药典》第一部规定的含量标准0.6%。

图2 滇重楼地下根茎皂苷含量月度变化规律

图3 滇重楼种子幼苗地下根茎的年生长量

2.3 滇重楼种子幼苗地下根茎的年生长变化规律

滇重楼种子幼苗地下根茎前三年生长缓慢，第四年后进入快速生长期。到第八年，生长快速的根茎质量可达100 g以上，每公顷产鲜品药材30 t左右；而生长缓慢的重楼，根茎质量仅有50多克，每公顷产鲜品药材15 t多。

2.4 滇重楼种子幼苗地下根茎皂苷的积累规律

分析滇重楼种子(0年苗)及各苗龄的地下根茎重楼皂苷的含量，结果见表1。随着栽培年限的增加，重楼皂苷的含量逐年增多。到第七年，重楼进入生殖生长，开花后，重楼皂苷的含量达到最高。按照2010版《中华人民共和国药典》第一部的标准，重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量达到0.6%，即达到药材标准。滇重楼种子幼苗经过4年的生长，就能符合要求。

表1 滇重楼不同苗龄幼苗地下根茎的皂苷含量

2.5 滇重楼种植的最佳采收期

滇重楼地下根茎的生长发育表明，6月至10月是根茎的快速生长期，10月份达到顶点，10月至翌年2月份是根茎生长的潜伏期，根茎的重量几乎不增加。因此，从地下根茎生物量的积累规律看，滇重楼的最佳采收时间应以10月至翌年2月为宜。

重楼皂苷分析结果表明，滇重楼地下根茎的皂苷含量7月份最高，其次是9月份。9月份以后，皂苷含量明显下降。11月至翌年3月，皂苷含量变化不大。因此，仅仅以皂苷含量为标准，滇重楼的最佳采收时间以7月至9月为宜。

综合滇重楼地下根茎的生长量和含量因素，结合滇重楼生长缓慢的特性，滇重楼种植的最佳采收期为10月份。滇重楼种子幼苗根茎发育及含量分析表明，以种子苗生产重楼药材，第七年采收药材比较好。

3 讨 论

重楼是云南的道地药材，虽然有10多年的种植历史，但产出的药材很少，主要是因为多数的滇重楼种植以生产种源(种子)为主。为了正确和规范引导滇重楼的人工种植产业，需要对重楼药材的生产周期做系统的研究。

药材的最佳采收期应该是药用部位生物量最大，含量最高的月份。滇重楼地下根茎生物量的积累，到10月份达到最大。地下根茎的皂苷含量最高却在7月份。这是和滇重楼的生长发育特性是相关的。滇重楼一般在5月～6月出苗，6月至7月是授粉期，7月至9月是果实发育期，9月份至11月份是裂果期(果实成熟期)，11月份以后，地上植株开始枯萎，进入倒苗期。在这个过程中，生殖生长的不同阶段消耗的养分是不同的，授粉期间消耗的养分是最少的，随着种子的发育，果实的膨大，养分的消耗逐步加大，地下根茎皂苷的含量也逐步下降。地下根茎皂苷的月度变化规律，正好反映了重楼果实的发育历程。也间接说明，在滇重楼的种植过程中，如果摘除子房，将有利于重楼皂苷的积累，也能促进地下根茎的增重。

尽管数据表明，滇重楼种植的最佳采收期为10月份。然而，由于滇重楼的种源价格较贵(鲜种子每千克2 000元)，销售种子是种植利润的主要来源。因此，在实际的操作规程中，以重楼种子采收完成后的11月份为采收期更切合实际。以商品种苗(滇重楼3年生种子苗，单株质量5克以上)生产商品重楼，种植5年采挖比较合适。

参考文献：

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

[2] 黄玮，孟繁蕴，张文生,等.滇重楼种子休眠机理研究[J].植物生理科学，2008，24(12)：242-246.

[3] 王丽萍.云南重楼野生驯化及栽培技术研究初探[J].中国野生植物资源，2002，21(1)：62-63.

[4] 李绍平，杨丽英，杨斌，等.滇重楼高效繁育和高产栽培研究[J].西南农业学报，2008，21(4)：956-959.

[5] 崔宝禄，唐德华，王兴贵.重楼无性繁殖研究进展[J].河北林果研究，2009，24(4)：399～411.

[6] 何俊，张舒，王红,等.滇重楼植物的研究进展[J].云南植物研究，2006，28(3)：271-276.

[7] 田振华，许召林.贵州省重楼属药用植物资源及分布状况调查[J].安徽农业科学，2010，38(14)：7339-7340.