不同外植体激素对引鸟花楸组培繁育的影响

王喆,卢正茂

(1.辽宁省林业基金管理总站,辽宁 沈阳110036;2.辽宁省森林经营研究所,辽宁 丹东118002)

引鸟花楸(Sorbus aucuparia),亦称欧洲花楸,蔷薇科(Rosaceae)花楸属(Sorbus)乔木,高可达5 m,广散分布于北温带,因果形美观而栽作观赏植物,是最常见的栽培品种之一。[1]由于近几年花楸市场供不应求,繁殖手段多样导致市场苗木质量差别很大,组培是一种无性繁殖的生物技术,能较好地保持原种的优良经济性,繁殖系数高,便于工厂化生产和集约化经营[2]。近年来在园林和花卉产业等领域得到了广泛的应用,并收到了巨大的经济效益和社会效益。为提高引鸟花楸育苗质量和速度,本文着重对花楸组培中不同外植体的分化情况、污染情况进行逐一论述,并对不同培养基中瓶苗的生长状况进行调查,为以后的生产提供借鉴。

1　试验材料

试验外植体于2008年12月中旬采自辽宁省本溪县偏岭镇新农村(123°57′E,41°24′N)多年生引鸟花楸成熟母树,取回后直接洗净树干,贮藏于室内水培1个月,嫩枝在自来水下冲洗2 h,无菌操作台内用0.1%的HgCl溶液消毒8 min,用无菌水漂洗5次,取出外植体直接接种于MS和WPM启动培养基中,培养30 d后便已萌出新鲜生长点,这时进行转瓶繁殖,在已形成完整植株的情况下选出达到下述各要求的外植体进行试验：(1)具3片淡绿色叶片,1支主脉;(2)基部没有愈伤组织形成;(3)生长体长度均为0.1～0.5 cm。本次试验每瓶均放置2个外植体,每个处理接种10瓶且培养4个周期。

2　试验方法

2.1　生长素和分裂素浓度调试

各外植体接种完成后带到培养室观察,包括外植体颜色、长、宽、愈伤组织质量等。培养基的处理按在 MS培养基中分别添BA0.1、0.2、0.3、0.4、0.5和 KT0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg L-1[3],编号A1～A50,B1～B50共100个处理。处理用的白糖浓度均为20 mg L-1,p H值5.8,光照为1 600 lx,温度为20℃的环境培养,培养时间设置为21 d,相对湿度70%～80%,空调房育苗,精心管护。

2.2　不同外植体培养设计

设置的不同外植体均来自同一株母树的不同位置材料,分别采腋芽、顶芽、嫩枝和叶片,设置MS+BA0.5培养基,p H值5.8,砂糖浓度20 mg L-1,琼脂8 g L-1,乙烯膜封口,温度为20℃的环境培养。

2.3　数据处理

试验数据利用Excel2003进行数据归集处理：

分化率=(诱导出的丛生芽数/接种外植体总数)×100%

污染(褐化)苗发生率=污染(褐化)发生苗/该外植体诱导出的不定芽总数×100%

3　结果与分析

3.1　启动培养基不同繁殖速度不同

本试验中分别设置MS和WPM培养基为基本培养基,培养过程中发现WPM培养基的萌发速度和MS培养基要相差8 d左右,得到的分化芽统计表明,MS和WPM几乎没有差别,培养基中大量元素的分量对引鸟花楸的组织还是有影响的。所以从繁殖效率的角度考虑,生产中用MS作为启动培养基有利于提高生产率。

3.2　不同的培养材料结果不同

组织培养过程中以MS+BA0.5培养基为基质,设置了4种不同位置的培养外植体,分别观察瓶苗的分化率、分化周期、污染率和褐化率,每个周期培养25 d,4个周期后调查结果如表1。

表1　不同培养材料的培养结果

由表1可见：分化率最好的是顶芽,其次是腋芽、嫩枝和叶片;分化周期最短的是腋芽,但各部位的外植体经过启动后,其生长速率几乎差不多,只是平均分化周期中启动时间长短不一而已;污染率最低的是顶芽;褐化率最高的是嫩枝[4]。

3.3　不同外源激素对花楸组培苗的影响

花楸组培苗在添加不同激素以后的生长表现如表2。MS培养基在添加BA和ZT后的生长表现各有不同,如添加BA0.1以后的分化率为67%,在添加0.2～0.3以后的分化率在逐次下降,试验证明BA0.5的分化率最高,达到90%;而添加ZT培养基的生长表现不如BA好,证明只有添加最适浓度的培养基其生长状态才能达到最佳。

表2　不同外源激素瓶苗的生长表现

4　结论与讨论

4.1引鸟花楸的组织培养,最适合的启动培养基为MS培养基,WPM培养基的萌分速度和MS培养基要相差8 d左右,培养基中大量元素的分量对引鸟花楸的组织还是有影响的。所以从繁殖效率的角度考虑,生产中用MS作为启动培养基有利于提高生产率。

4.2不同位置的培养外植体,分化率最好的是顶芽,其次是腋芽、嫩枝和叶片;分化周期最短的是腋芽,但各部位的外植体经过启动后,其生长速率几乎差不多,只是平均分化周期中启动时间长短不一而已;污染率最低的是顶芽;褐化率最高的是嫩枝。生产中采用顶芽有利于提高生产率。

4.3不同外源激素对花楸组培苗有不同的影响,实验证明,花楸组培苗在MS培养基上以添加BA,BA0.5的分化率最高,达到90%,而添加ZT培养基的生长表现不如BA好,证明只有添加最适浓度的培养基其生长状态才能达到最佳。

参考文献：

[1]余治家,于澎涛,王绪芳,等.多用途树种欧洲花楸及其引种[J].中国城市林业,2007,5(6)：56-58

[2]刘玮,李长海,庄倩,等.欧洲花楸引种及生物学特性[J].东北林业大学学报,2007,35(2)29-30

[3]高晔华,郭朋伟,吴荣哲.黑果腺肋花楸组培苗增殖的初步研究[J].北方园艺,2012(17)：119-121

[4]赵春莉,李金英.植物组织培养中污染原因及其控制方法[J].吉林农业科学,2010,35(6)：11-13