小儿健胃糖浆的质量标准研究

郑荣波　宋丽莉

[摘要] 目的 研究制订小儿健胃糖浆的质量标准。 方法 对山楂、麦冬药材进行薄层色谱鉴别；高效液相法采用双波长、梯度洗脱，同时测定白芍和牡丹皮中的芍药苷、陈皮药材中的橙皮苷含量。 结果 薄层色谱鉴别分离度好，专属性强，方法可行；含量测定在检测波长芍药苷（230 nm）、橙皮苷（283 nm）条件下，分别在7.68～491.76、7.66～491.72 μg呈良好的线性关系，回归方程为Y=11.305X-21.52、R2=0.9995（n=7），Y=16.843X+6.952、R2=0.9999（n=7），平均回收率为99.14%，RSD=1.99%、99.85%，RSD=2.57%。 结论 本方法操作简单、数据精确、专属性强，可为提高小儿健胃糖浆质量标准提供合理依据。

[关键词] 小儿健胃糖浆；山楂；麦冬；陈皮、白芍；薄层色谱法；双波长高效液相法。

[中图分类号] R927.11 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）03（a）-0008-04

小儿健胃糖浆是由山楂、麦冬、陈皮、白芍、牡丹皮等11味药材组成的中药制剂，具有健脾消食，清热养阴之功效，主要用于脾胃阴虚所致的食欲减退、消化不良。该处方于1995年收载于原卫生部《药品标准》中药成方制剂第10册[1]，是本公司主要品种之一。由于历史原因，该质量标准仅有糖浆剂的常规检查项目，不符合目前药品质量标准的要求。本实验是在原质量标准的基础上进行提高与完善、研究与探索，同时增加薄层色谱鉴别和高效液相含量测定检验项目，以力求科学、客观地评价新质量标准的可行性和适用性。

1 仪器、试剂与药品

高效液相色谱仪：Agilent 1100型号，DAD检测器；电子天秤：Sartorius-CPA225D，十万分之一；CMAG REPROSTARⅡ型号成像系统；硅胶G板（Merck薄层板，德国进口）；乙腈（色谱纯），水（超纯水）；C18固相萃取小柱（Water Sep-pak）；其余试剂均为分析纯；麦冬和山楂对照药材（中国药品生物制品检定所，批号：121013-201009、1138-20000，供鉴别用），芍药苷和橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-201035、110721-201014，供含量测定用）；小儿健胃糖浆和缺麦冬、山楂、陈皮、白芍和牡丹皮阴性样品（由广州王老吉药业股份有限公司提供）。

2 实验方法与结果

2.1 麦冬薄层色谱鉴别

取本品50 ml，加水40 ml、盐酸0.5 ml，乙醚30 ml，加热回流30 min，放冷，分取乙醚液，酸水层再用乙醚萃取2次，每次20 ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯1 ml溶解。作为供试品溶液[2-4]。取麦冬对照药材2 g，加甲醇15 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml溶解，自“盐酸0.5 ml……”起，同法制成对照药材溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各6 μl，分别条状点样于同一硅胶G板上，以二氯甲烷-甲醇（40∶1）为展开剂，展开，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，放冷。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性无干扰。结果具体见图1。

2.2 山楂薄层色谱鉴别

取“2.1”项下的样品作为供试品溶液。另取山楂对照药材2 g，加1%盐酸乙醇液30 ml，超声处理30 min，滤过，蒸干，残渣加无水乙醇1 ml溶解，作为对照药材溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各8 μl，分别条带状点样于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-二氯甲烷-甲酸（5∶5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，于105℃加热15 min，喷以溴酚蓝试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点[5]。阴性无干扰。结果具体见图2。

2.3 白芍、牡丹皮、陈皮含量的测定

2.3.1 色谱条件及系统适应性试验

色谱柱：Phenomenex Luna柱（250 mm×4.6 mm×5 μm）；以乙腈为流动相A，0.1%磷酸溶液为流动相B；流动相设置具体见表1。按表1中的规定进行梯度洗脱；流速为1 ml/min，检测波长：230 nm（芍药苷）、283 nm（橙皮苷）；柱温为35℃。理论板数以芍药苷计算应≥3000，芍药苷与相邻峰之间的分离度均>1.5。

2.3.2 检测波长的确定

高效液相色谱仪：Agilent 1100，DAD检测器，对芍药苷、橙皮苷对照溶液进行光谱扫描，波长范围为200～400 nm，结果芍药苷在230 nm处有最大吸收，橙皮苷在283 nm处有最大吸收。结果具体见图3、图4。

2.3.3 专属性试验

2.3.3.1 对照品溶液的配制 取芍药苷和橙皮苷对照品各适量，精密称定，加甲醇制成每毫升各含30 μg的混合溶液，摇匀，即得（图5）。

2.3.3.2 供试品溶液的配制 精密量取本品10 ml，通过已处理好的C18小柱（规格：500 mg，先用甲醇10 ml冲洗，再用水10 ml冲洗，备用），依次用水、5%甲醇、60%甲醇各15 ml进行洗脱，收集60%甲醇洗脱液，蒸干，残渣用60%甲醇溶解并转移至5 ml量瓶中，用60%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（图6）。

2.3.3.3 阴性对照溶液的制备 ①取缺白芍和牡丹皮药材的处方制剂，按一定的比例制成阴性样品、再按供试品溶液的配制方法制成缺白芍和牡丹皮阴性对照溶液；②取缺陈皮药材的处方制剂，按一定的比例制成阴性样品、再按供试品溶液的配制方法制成缺陈皮阴性对照溶液。

2.3.3.4 将以上3种溶液分别注入高效液相色谱仪中，得色谱图（图7、图8）。结果：白芍和牡丹皮、陈皮均阴性无干扰，该方法专属性强。

2.3.4 线性关系的考察

2.3.4.1 芍药苷 取芍药苷对照品适量，分别配制成每毫升各含7.68、15.37、30.74、61.47、122.94、245.88、481.76 μg溶液，进样量为10 μl。以对照品量（μg）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线；芍药苷的线性方程：Y=11.305X-21.52，R2=0.9995。结果芍药苷在7.68～491.76 μg范围内呈良好的线性关系。

2.3.4.2 橙皮苷 取橙皮苷对照品适量，分别配制成每毫升各含7.66、15.33、30.67、61.34、122.68、245.36、481.72 μg溶液，进样量为10 μl。以对照品量（μg）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线；橙皮苷的线性方程：Y=16.843X+6.952，R2=0.9999。结果橙皮苷在7.66～491.72 μg范围内呈良好的线性关系。

2.3.5 重复性试验

取同一批号样品6份，精密量取，按供试品溶液制备方法，测定，计算。芍药苷含量的RSD=1.26%；橙皮苷含量的RSD=0.69%。

2.3.6 稳定性试验

取同一供试品溶液，在0、2、4、8、16、24、48 h分别进样，测定，计算，结果芍药苷含量的RSD=1.78%；橙皮苷含量的RSD=0.44%，说明供试品溶液至少在48 h内稳定。

2.3.7 精密度考察

取对照品溶液10 μl，连续进样5次，测定芍药苷和橙皮苷峰面积值，分别计算得RSD=0.72%、0.33%。结果所建立方法具有良好的精密度。

2.3.8 加样回收率考察

精密量取样品5 ml（已知含量），分别精密加入一定量的芍药苷和橙皮苷对照品，测定，计算回收率，结果见表2、表3。

3 讨论

小儿健胃糖浆对于婴幼儿的脾胃阴虚所致的食欲减退、消化不良有良好的治疗作用，本研究在原质量标准的基础上，增加了麦冬和山楂的薄层鉴别，白芍和牡丹皮、陈皮的含量测定。

处方中的白芍具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能；陈皮具有理气和中，燥湿化痰，利水通便的功能[6]，均为处方中的主要成分，曾有许多文献分别报道了检测白芍和陈皮含量的方法[7-9]。但本实验采用双波长，梯度洗脱方法测定白芍和陈皮的含量，达到减少实验时间的目的。

橙皮苷同时在波长230 nm和283 nm处有吸收峰，但230 nm波长，有干扰而分离度差，283 nm无干扰、分离度好，并与《中国药典》中“陈皮”药材的质量标准所规定的吸收波长一致[10]，故该方法中陈皮的吸收波长确定为283 nm。

由于该制剂为糖浆剂，曾采用正丁醇萃取、D101大孔树脂柱分离法、固相萃取法等三种方法，分别同时提取白芍和牡丹皮中的芍药苷和陈皮中的橙皮苷，再采用双波长检测、梯度洗脱，进行含量测定，结果三种提取方法数据基本一致，重现性好，数据精确，但是固相萃取法操作简单，方便快捷。

[参考文献]

[1] 卫生部.药品标准——中药成方制剂（第10册）[M].北京：人民卫生出版社，1995：11.

[2] 张砾岩，潘蓉.麦冬与山麦冬的薄层色谱及紫外光谱鉴别[J].新疆中医药，2006，24（4）：56-57.

[3] 熊银鹰，赵冰清.麦冬与山麦冬的鉴别[J].湖南中医杂志，2003，19（1）：53.

[4] 潘会朝，邓戈.麦冬类药材的薄层色谱与紫外光谱鉴别[J].世界最新医学信息文摘，2003，2（5）：838.

[5] 国家药典委员会.中国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2010：611、附录ⅥB、ⅥD.

[6] 王玉琴.小儿止咳糖浆的药理研究[J].黑龙江科技信息，2012，（10）：64.

[7] 严玉平，由会玲，李国川，等.芍药及不同炮制品中在芍药甘草汤中芍药苷含量的差异研究[J].中国药房，2009， 20（6）：463-465.

[8] 梁晨，徐思思，聂诗明.高效液相色谱法测定香砂养胃丸中橙皮苷的含量[J].数理医药学杂志，2012，（6）：688-690.

[9] 刘志才.平胃胶囊中橙皮苷的含量测定[J].黑龙江医药，2003，16（5）：437-438.

[10] 项菲，肖燕.高效液相色谱法测定小儿止咳糖浆橙皮苷的含量[J].中国民族民间医药杂志，2008，17（7）：31-32.

（收稿日期：2014-01-02 本文编辑：林利利）

2.3.4 线性关系的考察

2.3.4.1 芍药苷 取芍药苷对照品适量，分别配制成每毫升各含7.68、15.37、30.74、61.47、122.94、245.88、481.76 μg溶液，进样量为10 μl。以对照品量（μg）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线；芍药苷的线性方程：Y=11.305X-21.52，R2=0.9995。结果芍药苷在7.68～491.76 μg范围内呈良好的线性关系。

2.3.4.2 橙皮苷 取橙皮苷对照品适量，分别配制成每毫升各含7.66、15.33、30.67、61.34、122.68、245.36、481.72 μg溶液，进样量为10 μl。以对照品量（μg）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线；橙皮苷的线性方程：Y=16.843X+6.952，R2=0.9999。结果橙皮苷在7.66～491.72 μg范围内呈良好的线性关系。

2.3.5 重复性试验

取同一批号样品6份，精密量取，按供试品溶液制备方法，测定，计算。芍药苷含量的RSD=1.26%；橙皮苷含量的RSD=0.69%。

2.3.6 稳定性试验

取同一供试品溶液，在0、2、4、8、16、24、48 h分别进样，测定，计算，结果芍药苷含量的RSD=1.78%；橙皮苷含量的RSD=0.44%，说明供试品溶液至少在48 h内稳定。

2.3.7 精密度考察

取对照品溶液10 μl，连续进样5次，测定芍药苷和橙皮苷峰面积值，分别计算得RSD=0.72%、0.33%。结果所建立方法具有良好的精密度。

2.3.8 加样回收率考察

精密量取样品5 ml（已知含量），分别精密加入一定量的芍药苷和橙皮苷对照品，测定，计算回收率，结果见表2、表3。

3 讨论

小儿健胃糖浆对于婴幼儿的脾胃阴虚所致的食欲减退、消化不良有良好的治疗作用，本研究在原质量标准的基础上，增加了麦冬和山楂的薄层鉴别，白芍和牡丹皮、陈皮的含量测定。

处方中的白芍具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能；陈皮具有理气和中，燥湿化痰，利水通便的功能[6]，均为处方中的主要成分，曾有许多文献分别报道了检测白芍和陈皮含量的方法[7-9]。但本实验采用双波长，梯度洗脱方法测定白芍和陈皮的含量，达到减少实验时间的目的。

橙皮苷同时在波长230 nm和283 nm处有吸收峰，但230 nm波长，有干扰而分离度差，283 nm无干扰、分离度好，并与《中国药典》中“陈皮”药材的质量标准所规定的吸收波长一致[10]，故该方法中陈皮的吸收波长确定为283 nm。

由于该制剂为糖浆剂，曾采用正丁醇萃取、D101大孔树脂柱分离法、固相萃取法等三种方法，分别同时提取白芍和牡丹皮中的芍药苷和陈皮中的橙皮苷，再采用双波长检测、梯度洗脱，进行含量测定，结果三种提取方法数据基本一致，重现性好，数据精确，但是固相萃取法操作简单，方便快捷。

[参考文献]

[1] 卫生部.药品标准——中药成方制剂（第10册）[M].北京：人民卫生出版社，1995：11.

[2] 张砾岩，潘蓉.麦冬与山麦冬的薄层色谱及紫外光谱鉴别[J].新疆中医药，2006，24（4）：56-57.

[3] 熊银鹰，赵冰清.麦冬与山麦冬的鉴别[J].湖南中医杂志，2003，19（1）：53.

[4] 潘会朝，邓戈.麦冬类药材的薄层色谱与紫外光谱鉴别[J].世界最新医学信息文摘，2003，2（5）：838.

[5] 国家药典委员会.中国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2010：611、附录ⅥB、ⅥD.

[6] 王玉琴.小儿止咳糖浆的药理研究[J].黑龙江科技信息，2012，（10）：64.

[7] 严玉平，由会玲，李国川，等.芍药及不同炮制品中在芍药甘草汤中芍药苷含量的差异研究[J].中国药房，2009， 20（6）：463-465.

[8] 梁晨，徐思思，聂诗明.高效液相色谱法测定香砂养胃丸中橙皮苷的含量[J].数理医药学杂志，2012，（6）：688-690.

[9] 刘志才.平胃胶囊中橙皮苷的含量测定[J].黑龙江医药，2003，16（5）：437-438.

[10] 项菲，肖燕.高效液相色谱法测定小儿止咳糖浆橙皮苷的含量[J].中国民族民间医药杂志，2008，17（7）：31-32.

（收稿日期：2014-01-02 本文编辑：林利利）

2.3.4 线性关系的考察

2.3.4.1 芍药苷 取芍药苷对照品适量，分别配制成每毫升各含7.68、15.37、30.74、61.47、122.94、245.88、481.76 μg溶液，进样量为10 μl。以对照品量（μg）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线；芍药苷的线性方程：Y=11.305X-21.52，R2=0.9995。结果芍药苷在7.68～491.76 μg范围内呈良好的线性关系。

2.3.4.2 橙皮苷 取橙皮苷对照品适量，分别配制成每毫升各含7.66、15.33、30.67、61.34、122.68、245.36、481.72 μg溶液，进样量为10 μl。以对照品量（μg）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线；橙皮苷的线性方程：Y=16.843X+6.952，R2=0.9999。结果橙皮苷在7.66～491.72 μg范围内呈良好的线性关系。

2.3.5 重复性试验

取同一批号样品6份，精密量取，按供试品溶液制备方法，测定，计算。芍药苷含量的RSD=1.26%；橙皮苷含量的RSD=0.69%。

2.3.6 稳定性试验

取同一供试品溶液，在0、2、4、8、16、24、48 h分别进样，测定，计算，结果芍药苷含量的RSD=1.78%；橙皮苷含量的RSD=0.44%，说明供试品溶液至少在48 h内稳定。

2.3.7 精密度考察

取对照品溶液10 μl，连续进样5次，测定芍药苷和橙皮苷峰面积值，分别计算得RSD=0.72%、0.33%。结果所建立方法具有良好的精密度。

2.3.8 加样回收率考察

精密量取样品5 ml（已知含量），分别精密加入一定量的芍药苷和橙皮苷对照品，测定，计算回收率，结果见表2、表3。

3 讨论

小儿健胃糖浆对于婴幼儿的脾胃阴虚所致的食欲减退、消化不良有良好的治疗作用，本研究在原质量标准的基础上，增加了麦冬和山楂的薄层鉴别，白芍和牡丹皮、陈皮的含量测定。

处方中的白芍具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能；陈皮具有理气和中，燥湿化痰，利水通便的功能[6]，均为处方中的主要成分，曾有许多文献分别报道了检测白芍和陈皮含量的方法[7-9]。但本实验采用双波长，梯度洗脱方法测定白芍和陈皮的含量，达到减少实验时间的目的。

橙皮苷同时在波长230 nm和283 nm处有吸收峰，但230 nm波长，有干扰而分离度差，283 nm无干扰、分离度好，并与《中国药典》中“陈皮”药材的质量标准所规定的吸收波长一致[10]，故该方法中陈皮的吸收波长确定为283 nm。

由于该制剂为糖浆剂，曾采用正丁醇萃取、D101大孔树脂柱分离法、固相萃取法等三种方法，分别同时提取白芍和牡丹皮中的芍药苷和陈皮中的橙皮苷，再采用双波长检测、梯度洗脱，进行含量测定，结果三种提取方法数据基本一致，重现性好，数据精确，但是固相萃取法操作简单，方便快捷。

[参考文献]

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[4] 潘会朝，邓戈.麦冬类药材的薄层色谱与紫外光谱鉴别[J].世界最新医学信息文摘，2003，2（5）：838.

[5] 国家药典委员会.中国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2010：611、附录ⅥB、ⅥD.

[6] 王玉琴.小儿止咳糖浆的药理研究[J].黑龙江科技信息，2012，（10）：64.

[7] 严玉平，由会玲，李国川，等.芍药及不同炮制品中在芍药甘草汤中芍药苷含量的差异研究[J].中国药房，2009， 20（6）：463-465.

[8] 梁晨，徐思思，聂诗明.高效液相色谱法测定香砂养胃丸中橙皮苷的含量[J].数理医药学杂志，2012，（6）：688-690.

[9] 刘志才.平胃胶囊中橙皮苷的含量测定[J].黑龙江医药，2003，16（5）：437-438.

[10] 项菲，肖燕.高效液相色谱法测定小儿止咳糖浆橙皮苷的含量[J].中国民族民间医药杂志，2008，17（7）：31-32.

（收稿日期：2014-01-02 本文编辑：林利利）