常用显现技术对汗潜指印中甲基苯丙胺测定的影响初探

张 婷 杨瑞琴

（中国人民公安大学 北京 100038）

常用显现技术对汗潜指印中甲基苯丙胺测定的影响初探

张 婷 杨瑞琴

（中国人民公安大学 北京 100038）

探讨并比较了汗潜指印显现技术对指印中甲基苯丙胺检测的影响。在对经粉末刷显法、“502”薰显法等6种方法显现后指印中甲基苯丙胺的提取方法和仪器分析条件进行考察基础上，建立了指印显现处理后，其中痕量毒品成分的检签擦拭，超声波液-液提取，液相色谱-质谱法（LC-MS/MS）测定方法。

汗潜指印 显现 甲基苯丙胺 LC-MS/MS

在刑事案件中，发现和提取指纹对于获取案件证据、提供案件线索具有重要意义。现场汗潜指印的发现和提取首先要通过物理法、化学法或激光法等显现方法处理后，并经拍照、胶带转印等方法固定指印物证。但是在一些毒品案件中，对接触毒品的指印除了进行指纹形态比对外，还要进行指印中毒品成分的分析。因此对常见显现技术处理后的指印中毒品成分的分析具有实际应用价值。有资料表明对于可疑现场指印，经茚三酮浸泡或者涂抹处理显现后的牛皮纸袋上的指印中可以继续进行DNA检测。显现技术处理后对指印中甲基苯丙胺分析的影响程度，很少有人进行研究。

常见毒品的分析方法有气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法、光谱法、化学成像和质谱成像法等。这些分析方法均可以对指纹中接触性化学物质进行分析，此研究将在刑事侦查、嫌疑人行为刻画、司法诉讼等领域发挥潜在的重要作用。

1 实验部分

1.1 实验材料

甲醇（色谱纯）购自天津市四友精细化学品有限公司；乙酸铵购自Dima公司；乙酸（分析纯）购自天津市化学试剂六厂；KQ-200VDE型双频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；HC-3018R高速冷冻离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司）。银粉、金粉、磁性粉、502胶水、指印提取胶带均购自公安部物证鉴定中心、二氧化钛纳米粉末由本实验室制备。

1.2 仪器及其设置

液相色谱-电喷雾离子阱质谱系统由Finnigan液相色谱仪（San Jose，CA，USA）和LXQ离子阱质谱仪（Thermo Fisher，USA）组成；色谱柱为Thermo Gold ODS C18（150mm×2.1mm，5μm）；柱温为35℃；流动相为甲醇-0.2%冰乙酸水溶液（含有5mM乙酸铵，pH为4.0）（70∶30，v/v），流速为0.2mL/min；进样量为2μL。

质谱条件：电喷雾离子化源（ESI），正离子方式检测，全离子扫描模式，扫描范围为50～200Da；毛细管温度为350℃，雾化气、加热辅助气和吹扫气流量分别为30.00、8.00和2.00L/min；源电压、毛细管电压和套管透镜补偿电压分别为5.00kv、1.00v和5.00v，多反应监测（MRM）模式。

1.3 实验方法

样品制备：取适量甲基苯丙胺盐酸盐与味素、食盐、砂糖、咖啡因按照一定比例（1∶9，v/v）混合后，研磨成粉末状，得到1号、2号、3号和4号样品。

样品前处理：志愿者手指分别用肥皂、清水清洗干净后，用洁净毛巾擦干后，将其食指在制样品中按捺10s后，用干滤纸擦掉多余的晶体（肉眼观察无晶体可见），随后，将食指捺印在洁净载玻片上30s后用6种常见方法显现潜指印。棉签经100μL水润湿后，擦拭刷显指印30次，将棉签放入塑料离心管中，加入0.25mL甲醇，超声3min，经0.22μm过滤后，供LC-MS/MS分析。

显现潜指印方法：金粉、银粉、二氧化钛粉、磁性粉，用粉刷刷显法；502胶水用滤纸贴附薰显法；胶带直接转印显现潜指印。

空白对照指印：未接触甲基苯丙胺毒品的指印，经显现及处理技术后，供对照实验使用。

2 实验结果

2.1 指印显现结果

含有毒品的汗潜指印在玻璃片上使用常用的指印方法显现后，在自然光下拍照（1200万像素），结果见图1所示。

图1 玻璃上含有毒品的汗指印显现结果

2.2 显现后提取指印中毒品的LC-MS/MS检测

每组含有毒品成分的指印平行进行2次操作，按照“1.3实验方法”显现及处理后，在优化实验条件下进行LC-MS/MS分析后，得到甲基苯丙胺的色谱峰面积，见表1。

3 讨论

3.1 LC-MS/MS分析方法考察

LC-MS/MS分析甲基苯丙胺，在正离子模式下得到准分子离子[M+H]+，m/z为150，将该分子离子进行碰撞诱导解离（CID） 分析，得到二级全扫描质谱，甲基苯丙胺的子离子为m/z119、m/z91、m/z 58，由此确定定性分析离子对为m/z150/119、m/z 150/91，定量离子对为m/z150/119，如图2所示。

图2 甲基苯丙胺的SRM图

3.2 提取条件考察

取浓度为5μg/mL的甲基苯丙胺标准溶液10μL，添加在湿润的棉签上后，将棉签转移至塑料管中加入0.25mL甲醇，考察超声波提取条件。通过正交实验设计L（33），对超声时间（1min，3min和10min）、超声温度（15℃、25℃、35℃）和超声频率（2000w、1600w、1000w）进行了考察。结果表明：温度对提取率影响较大，温度高则提取效率高，超声时间对提取率影响也较大，超声时间较长时提取率有降低，最佳提取条件为35℃，2000W，超声3min。

为了考察指印提取材料的影响，实验中选择10μg/mL甲基苯丙胺标准溶液，添加在比色白瓷板孔中5μL，待溶液自然干燥后，用滤纸、棉签、湿巾、一次性PCE塑料4种提取材料，在6种状态下提取毒品，经超声波提取、离心、过膜后，取上清液进LC-MS/MS分析。同样浓度的甲基苯丙胺标准溶液直接添加在提取材料上，经超声提取等操作后，LC-MS/MS分析计算峰面积。根据孔板中擦拭与直接添加测得的峰面积相比，计算各种提取材料的提取效率，见表2。

表2 不同提取材料的提取效率（添加浓度50ng，n=2）

擦拭或者塑料薄膜静电吸附在提取能力上差别很大。干燥材料擦拭发的提取率不到7%，因此后来采用去离子水润湿滤纸和棉签擦拭的方法，其中提取率最高的为湿润滤纸，其次为湿巾、湿润棉签，但从实践的方便性上选择湿润棉签擦拭法。

3.3 显现方法考察

本文选取了6种常用指印显现方法，均是最为常用的物理显现法和化学显现法，其中物理显现法通过粉末与汗液中的多种成分发生吸附作用而显现指印，“502”化学显现法通过502的主要成分α-氰基丙烯酸乙酯与指印中的水进行聚合，形成固体状的聚合物从而显现指印。这些显现方法显现指印后，提取与处理指印后，进行液相色谱-质谱联用分析，结果见表1。结果表明：选用的6种显现材料和显现方法对指印接触性甲基苯丙胺成分的定性测定无影响。

3.4 基质效应考察

为了考察指印汗液的基质效应，本文首先分别在含有空白指印痕量汗液的湿棉签上添加浓度为10μg/mL的甲基苯丙胺标准溶液0.5μL和1μL，同样在不含有指印汗液的湿棉签上添加同样量的甲基苯丙胺标准溶液，通过比较有汗液棉签和无汗液棉签两种情况下甲基苯丙胺含量测定是否有影响。结果表明：指印痕量汗液中的干扰杂质很少，不影响分析检测。另外，显现材料在湿棉签擦拭的前处理过程中，经过高速离心和过膜处理后，不影响分析检测。

3.5 指印捺印次数考察

选择光滑玻璃作为指印承载体，分别以指印样本按压单次和连续按压5次后的样品作为分析对象。将潜指印按照1.3的指纹显现和检材前处理方法进行操作，经LC-MS/MS检测，以回收率作为纵坐标，如图3所示。

图3 连续5次捺印并显现后的甲基苯丙胺检测变化

4 结论

汗潜指印中毒品及其代谢物成分的检测可通过灵敏的分析仪器实现。本研究发现：汗潜指印经过显现后毒品的量均减少，但通过与空白指印样本的比较，即使少量的接触性毒品成分的指印与空白指印也是有非常显著的差异。本文分析方法在公共安全、边防检查、刑事案件侦查等领域具有潜在且重要的应用价值。本文所建立的方法，准确性高、灵敏度好，同时具有分析时间短、操作简便的优点。

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（责任编辑：于 萍）

D918.39

A

2014-4-25

张婷（1975-），女，辽宁沈阳人，中国刑警学院法化学系讲师，中国人民公安大学2012级博士研究生，主要从事毒物及毒品方面的教学、科研和鉴定工作。