麻黄多糖发汗、止咳与利尿活性研究

赵云生，毛福英，姚海花，白长财，赵启鹏

(1.宁夏医科大学 药学院，宁夏 银川 750004；2.宁夏回药现代化工程技术研究中心，宁夏 银川 750004；3.汾阳市畜牧技术推广站，山西 汾阳 032200)



麻黄多糖发汗、止咳与利尿活性研究

赵云生1,2，毛福英1,2，姚海花3，白长财1,2，赵启鹏1,2

(1.宁夏医科大学 药学院，宁夏 银川 750004；2.宁夏回药现代化工程技术研究中心，宁夏 银川 750004；3.汾阳市畜牧技术推广站，山西 汾阳 032200)

目的：研究麻黄多糖的发汗、止咳与利尿活性。方法：采用氨水引咳法、着色法与滤纸法检测比较未给药的对照组小白鼠和给予麻黄多糖的实验组小白鼠的镇咳率、发汗点数和排尿量。结果：高剂量(132mg/kg)与低剂量麻黄多糖(66mg/kg)的发汗、止咳作用均显著优于蒸馏水，但利尿作用低于蒸馏水。结论：麻黄多糖具有发汗与止咳功效，是麻黄的重要有效成分。

麻黄多糖；发汗；止咳；利尿

麻黄(Herba Ephedrae)药用历史悠久，始载于《神农本草经》，历代本草书籍均有收载，在中医药中占有重要地位。2010年版中国药典收载的麻黄为麻黄科植物草麻黄EphedrasinicaStapf.、中麻黄EphedraintermediaSchrenk et C.A.Mey.或木贼麻黄EphedraequisetinaBge.的干燥草质茎，具有发汗散寒、宣肺平喘、利水消肿的功效[1]。商品麻黄多是草麻黄、木贼麻黄和中麻黄的混合品，以草麻黄产量最高[2]。通常认为麻黄碱、挥发油等为麻黄的主要有效成分，近年研究发现麻黄多糖具有免疫调节[3]、清除氧自由基[4]、降血脂[5]等多种药理活性。本研究针对药典收载麻黄的临床功效，对麻黄多糖的发汗、止咳与利尿作用进行研究，以期为麻黄的药效物质基础研究作一补充。

1 材料与试剂

1.1 药材

麻黄：购自宁夏医科大学中医学院门诊部，由笔者鉴定为草麻黄(EphedrasinicaStapf.)的干燥草质茎。

1.2 动物

实验动物：清洁级昆明小鼠，雌雄各半，(20.0±2.0)g，由宁夏医科大学动物实验中心提供，合格证号：SCXK(宁)2011-001。

1.3 试剂

磷酸可待因(香港澳美制药厂)、毛果芸香碱(西安永屹生物技术有限公司，Sigma-S0130)、蓖麻油(湖北科田药业有限公司)。浓氨水、无水乙醇、碘、淀粉均为分析纯。

2 样品制备

2.1 麻黄多糖制备

取麻黄饮片200g，过60目药典筛，以95%乙醇1 000mL超声脱脂40min，舍弃乙醇脱脂液。将剩余残渣加2 000mL水超声提取3次，每次60min，合并水提液，浓缩至小体积后加无水乙醇，使乙醇浓度至85%，醇沉24h抽滤，沉淀减压干燥，得麻黄多糖样品。精密称取60℃干燥至恒重的麻黄多糖1 320mg，加水溶解后定容至100mL容量瓶，备用[6-7]。

2.2 和田-高垣氏试剂制备

A液：取2g碘溶于100mL无水乙醇中，备用。

B液：取可溶性淀粉50g、蓖麻油100mL，混合均匀，备用。

3 分组与给药方法

3.1 氨水引咳法[8]

选取健康昆明小鼠40只，按体重随机均分为四组：①蒸馏水阴性对照组：给予等体积蒸馏水0.1mL/10g；②磷酸可待因阳性对照组：腹腔注射可待因30mg/kg；③麻黄多糖低剂量组：给予麻黄多糖66mg/kg；④麻黄多糖高剂量组：给予麻黄多糖132mg/kg。

小鼠灌胃给药1h或腹腔注射可待因0.5h后，放入含100mL浓氨水浸湿棉花的250mL广口瓶内，关闭瓶盖lmin，打开瓶盖，取出小鼠2min，共3min，观察小鼠表现，以腹肌收缩，同时张开大口，有时可有咳声为指标，记为咳嗽1次。记录小鼠咳嗽潜伏期(放入广口瓶至第1次咳嗽的时间)、2min内咳嗽次数，若2min内出现3次以上典型咳嗽动作者为有咳嗽，否则算作无咳嗽。 观察小鼠咳嗽潜伏期和2min咳嗽次数，计算镇咳率。

镇咳率(%) = (用药组咳嗽潜伏期-蒸馏水阴性对照组咳嗽潜伏期) / 蒸馏水阴性对照组咳嗽潜伏期×100%。

3.2 着色法发汗[9]

取体重相近的40只小鼠，首先观察其足底部有无污物，如有污物，用棉签蘸取无水乙醇轻轻擦洗干净。将其随机分为四组，每组10只，雌雄各半：①蒸馏水阴性对照组：给予等体积蒸馏水0.1mL/10g；②毛果芸香碱组阳性对照组：腹腔注射毛果芸香碱溶液35mg/kg；③麻黄多糖低剂量组：给予麻黄多糖66mg/kg；④麻黄多糖高剂量组：给予麻黄多糖132mg/kg。

给药后分别置于小鼠固定器内，仰位固定，暴露双后肢。给药30min后，用干棉签轻轻拭干40只小鼠足趾部原有和挣扎所致的汗液。然后分别于每只小鼠足趾部皮肤涂上和田-高垣氏试剂A液，待充分干燥后，再薄薄涂上B液，然后用放大镜仔细观察着色点颜色(深紫色着色点)及汗点出现的时间、颜色和数量，待汗点出现后，连续观察30min，每10min记录1次。

3.3 滤纸法利尿实验[10]

选取6～8周龄健康昆明小鼠30只，禁食不禁水8～12h，称体重后(实验前体重)，随机分成三组：①空白对照组：腹腔注射生理盐水0.1mL/10g；②麻黄多糖低剂量组：腹腔注射麻黄多糖66mg/kg；③麻黄多糖高剂量组：腹腔注射麻黄多糖132mg/kg。

实验前先轻压每只小鼠下腹排尽余尿，各用lmL生理盐水灌胃作水负荷，给药后分别将三组小鼠罩在铺有数层滤纸，直径为240mm的干燥大烧杯中(滤纸置于烧杯底部支架上，支架下放置约100mL水以减少尿液挥发)，烧杯口盖以铁网罩，每小时换1次滤纸，换滤纸后立即称量出滤纸增加重量作为小鼠排尿量，共观察3h。

3.4 统计学分析

采用Excel软件整理实验数据，采用SPSS15.0软件计算平均数、标准差，并进行方差分析，P<0.05为差异具有统计学意义。

4 结果

4.1 麻黄多糖止咳作用

与蒸馏水阴性对照组相比，磷酸可待因阳性对照组、麻黄多糖低剂量组、麻黄多糖高剂量组小鼠咳嗽率均明显降低。麻黄多糖高剂量组小鼠镇咳率显著高于低剂量组，且二者具有量效关系，但麻黄多糖低或高剂量组小鼠镇咳率均低于本实验剂量的磷酸可待因组。

与蒸馏水阴性对照组相比，磷酸可待因阳性对照组、麻黄多糖低或高剂量组小鼠咳嗽次数均明显减少，咳嗽潜伏期变长；麻黄多糖高剂量组与磷酸可待因阳性对照组小鼠咳嗽次数相差不大，但其咳嗽潜伏期显著短于可待因阳性对照组；麻黄多糖高剂量组小鼠咳嗽潜伏期长于低剂量组，咳嗽次数少于低剂量组，说明麻黄多糖具有减少小鼠咳嗽次数，延长咳嗽潜伏期的作用。实验结果见表1。

表1 麻黄多糖止咳实验结果

4.2 麻黄多糖发汗作用

与蒸馏水阴性对照组相比，毛果芸香碱阳性对照组、麻黄多糖低剂量组、麻黄多糖高剂量组小鼠发汗能力明显增强；麻黄多糖高剂量组小鼠的发汗作用强于麻黄多糖低剂量组，且二者具有量效关系，但麻黄多糖低或高剂量组小鼠的发汗能力均不如本实验剂量的毛果芸香碱组强。采用SPSS软件进行方差分析，结果显示，与蒸馏水阴性对照组相比，麻黄多糖对小鼠的发汗作用达极显著水平(P<0.01)，说明麻黄中除生物碱外，多糖亦具有发汗功效，实验结果见表2。

表2 麻黄多糖对小鼠足趾部汗液分泌影响

注：与对照组比较，**P<0.01。

4.3 麻黄多糖利尿作用

麻黄多糖高、低剂量组小鼠3h内排尿总量均明显低于蒸馏水阴性对照组，说明麻黄多糖利尿作用不强；麻黄多糖高、低剂量组相比，高剂量组小鼠的利尿作用明显强于低剂量组，但仍显著低于阴性对照组。对不同处理方式小鼠的平均排尿量进行方差分析，结果表明，低剂量组小鼠的3h排尿量显著低于对照组(P<0.05)，而高剂量组小鼠3h排尿量与对照组无显著差异。实验结果见表3。

表3 麻黄多糖利尿作用实验结果

注：与对照组比较，*P<0.05。

5 讨论

与蒸馏水相比，低、高剂量麻黄多糖均具有发汗与止咳的功效，说明麻黄多糖与麻黄中其它药效物质一样，具有药材麻黄的部分功效。

本研究中麻黄多糖低、高剂量组与阳性对照组相比，止咳与发汗活性均较低，这种现象与磷酸可待因与毛果芸香碱的给药剂量有关，其对于麻黄多糖的镇咳、发汗功效评价并无影响。本实验中毛果芸香碱溶液的配制浓度不能过大，否则会导致小鼠过量发汗而死。

本研究表明，麻黄多糖利尿作用不强，说明麻黄利水消肿的功效可能是由其它药效物质作用的结果。造成麻黄多糖组小鼠排尿量不及阴性对照组的原因也可能为麻黄多糖的发汗作用。在试验过程中，麻黄多糖低、高剂量组小鼠均表现出明显的发汗作用，小鼠体内水分可能更多地从汗腺分泌，而不是经尿道排泄。综上所述，麻黄多糖具有明显发汗与止咳功效，但利尿作用不显著，是麻黄的重要有效成分。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:300-381.

[2] 张恩厚,常峰.内蒙古麻黄属的分类及经济利用浅析[J].内蒙古草业,2000(4):35-39.

[3] 孟达理,严士海,许芝银.麻黄多糖对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响[J].江苏大学学报:医学版,2007,17(5):379-380,385.

[4] 张连茹,邹国林,杨天鸣.麻黄水溶性多糖的提取及其清除氧自由基作用的研究[J].氨基酸和生物资源,2000,22(3):24-26.

[5] 何翔.麻黄多糖抗高血脂活性物质的研究[D].武汉:湖北中医药大学,2010:4-24.

[6] 夏永刚,梁军,杨炳友,等.苯酚-硫酸法测定麻黄多糖含量研究[J].中医药信息,2011,28(1): 33-35.

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[8] 葛斌,王巧明,许爱霞,等.甘肃栽培麻黄镇咳、平喘、抗炎、利尿作用研究[J].中国药房, 2006,17(5):334-336.

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[10] 赵杰,徐文杰,方芳,等.麻黄-甘草药对的抗炎、利尿作用研究[J].中药药理与临床,2012, 28(3):12-14.

(责任编辑：尹晨茹)

Study on Diaphoresis, Antitussive and Diuresis of Polysaccharide fromEphedrasinicaStapf.

Zhao Yunsheng1,2, Mao Fuying1,2, Yao Haihua3, Bai Changcai1,2, Zhao Qipeng1,2

(1.Ningxia Medical University Pharmacy College , Ningxia 750004,China;2.Ningxia Research Center of Modern Hui Medicine Engineering and Technology, Yinchuan 750004,China;3.Animal Husbandry Technical Advice Station of Fenyang County, Fenyang 032200,China)

Objective:Study on the diaphoresis, antitussive and diuresis activity of polysaccharide fromEphedrasinicaStapf. Methods:Ammonia water induced cough model, mice colouring method, and filter paper method were used to detect the cough relieving rate, sweating colouring points and urine output. Results:The polysaccharide high (132mg/kg) or low (66mg/kg) dose group had higher activity of diaphoresis and antitussive than the distilled water negative control group, but had lower diuresis activity than the distilled water negative control group. Conclusion:The polysaccharide has the activity of diaphoresis and antitussive, and is a part of effective components ofEphedrasinicaStapf.

EphedrasinicaStapf.; Polysaccharides; Diaphoresis; Antitussive; Diuresis

2014-05-08

国家自然科学基金项目(81160505)

赵云生(1974-)，男，博士，宁夏医科大学副教授，硕士生导师，研究方向为中药品质与资源。

R285.5

A

1673-2197(2014)16-0011-03