885例遗传咨询者的细胞遗传学分析＊

肖文珺，高振奎，李 莉，李 佳，张 曼

（首都医科大学附属北京市世纪坛医院检验科 100038）

染色体数目或结构异常所致的疾病称为染色体病，是一种常见的遗传病。染色体病可导致各种先天性智力低下、发育迟缓、多发畸形及性分化异常，同时也是导致流产、死胎、畸胎、不孕、不育等疾病的重要原因，越来越受到临床工作者的重视。对这类患者进行外周血淋巴细胞染色体核型分析，可以为患者的临床诊断和治疗提供遗传学依据。通过对这些染色体核型分析和总结，探索异常核型与临床症状的联系，可以提高对染色体病的诊断、咨询能力，对染色体病的防治有重要的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2006年1月至2013年4月，来自北京世纪坛医院门诊及住院部进行遗传咨询的患者共885人，进行细胞遗传学检查。其中，年龄最小者0d，最大者为50岁，男457例，女428例。主要临床表现为不良妊娠史、产前筛查为高危或疑为先天畸形的新生儿、智力／性发育迟缓等。

1.2 方法 用肝素抗凝，取外周血2mL，接种于1640培养基，37℃培养72h，终止培养前40min加秋水仙素至终浓度0.5μg／mL，收获。常规制片显带，每个患者计数20个染色体中期分裂象，经染色体分析软件分析5个核型，如果怀疑有镶嵌现象，至少总共计数30～50个细胞，并增加分析细胞数目。根据ISCN（2009）人类细胞遗传学国际命名体制命名。

2 结 果

本院近7年共进行885例染色体核型分析，其中，产科新生儿脐血染色体核型分析324例，发现异常37例，异常率11.42%。37例中，染色体数目和结构异常14例，占45.95%。外周血核型分析561例，其中，0d至22岁之间患者69例，发现异常14例，异常率达20.29%，其中，性染色体结构和数目异常7例，占50%。大于22岁患者492例，发现异常65例，异常率13.21%。其中，以多态性为主，占78.46%；常染色体结构异常14例，占21.54%，见表1。

表1 各年龄组染色体异常及构成

续表1 各年龄组染色体异常及构成

3 讨 论

3.1 染色体核型分析对于产前诊断的重要意义 近6年来，本院共进行的324例产科新生儿脐血核型分析，申请遗传学检查的原因主要为：（1）孕期唐氏综合征筛查高危；或由于是多胎妊娠不适宜唐氏综合征筛查，但拒绝抽取羊水或错过羊水染色体核型分析时机，待胎儿娩出后，申请取脐血进行染色体核型分析确认是否异常。（2）出生后体检怀疑异常。（3）家族中曾有生育缺陷儿史。染色体数目异常，尤其是唐氏综合征是出生缺陷最常见的病因之一。本研究共检出21－三体综合征9例，占2.78%，高于中国活产婴儿中21－三体综合征的发生率（0.5‰～0.6‰），可能与标本主要来源于唐氏综合征筛查高危产妇有关。21－三体综合征对家庭和社会的危害极大，血清学唐氏综合征筛查法和B超等无创伤性检查方法，是预防唐氏综合征出生的主要方法，已经得到广泛开展，但血清学唐氏综合征筛查法目前只适用于单活胎，且假阳性高，只能依靠产前诊断进行最终确诊，而羊水细胞染色体核型分析是产前诊断的金标准［1］。本研究还检出导致新生儿严重畸形和智力低下的13－三体综合征1例和性发育异常的特纳综合征1例。如果在孕期进行羊水细胞染色体核型分析，做出准确及时的诊断，将避免此类缺陷儿的出生。因此进一步加强和推广产前诊断工作迫在眉睫。

3.2 染色体异常与发育迟缓 幼儿至青少年时期出现性发育异常，如原发性闭经，外生殖器异常等及发育迟缓（包括身材矮小，智力发育迟缓等）在临床也较为常见，是0～22岁年龄段就诊的主要原因。其中，发现染色体异常14例，其中，性染色体结构和数目异常7例，占其中的50%，说明性染色结构和数目异常是性／智力发育迟缓的重要原因，应加强此类疾病中染色体核型的排查工作。其中，克氏综合征（核型47，XXY）和特纳综合征（核型45，X0；46，X，i（Xq）等）最为常见。虽然在现有科学技术水平上，此类染色体病仍无法根治，但通过长期乃至终身的激素替代治疗可以促进患者的第二性征发育，增加社会适应能力，改善精神状态，提高生活质量并预防并发症［2－3］。近期一项关于特纳综合征的研究显示，通过低剂量的雌激素和生长激素的联合治疗，能使接受治疗时年龄在5～12.5岁之间的特纳综合征患者的成年时期身高平均增高5cm之多，同时还能改善智力和行为方面的症状［3－4］。而且，低剂量的生长激素并未对心血管系统造成远期的不利影响［5］。然而不论是克氏综合征还是特纳综合征，这些性染色体疾病往往在青春期之前无任何症状，青春期症状也不典型，甚至有的患者仅以神经精神方面症状为最初表现［6］，拖延了确诊时间，从而延误了最佳的治疗期（11～12岁）。因此，普及染色体病基础知识，加强此类疾病的早期筛查工作的任务非常迫切。

值得注意的是，这一组中，作者检出6例多态性和1例常染色体易位。这些异常是否与患者性发育／智力发育迟缓的症状有联系还有待进一步研究。

3.3 染色体异常与不良孕产史 大于22岁年龄段患者主要因不良孕产史（不明原因流产史或不育）就诊，其中，发现异常65例，异常率13.21%，以染色体多态性为主，构成比达78.46%。染色体多态性为各个体之间的正常变异，表现为同源染色体结构和带纹强度的差异，一般存在遗传上不活跃的含高度重复DNA序列的结构异染色质区。有研究认为，染色体多态性可能引起流产、死胎、等不良妊娠结局［7－9］，但具体原因尚有待进一步研究。

常染色体结构异常主要以平衡易位和倒位为主，在不良孕产史夫妇中比率为2.85%，文献报道约为2%～6%［10－11］，而且随流产次数增多，异常率增高［12］。但染色体结构异常易导致患者在减数分裂过程中形成不平衡配子，受精后形成染色体部分单体和／或部分三体的合子从而导致胚胎畸形、死亡，危害严重。由于并无基因的丢失，这类患者极有可能是表型正常的携带者，无法通过其他检测方法检查出来。因此，对于有不良孕产史的夫妇，尤其是反复多次不明原因流产史的患者，夫妻双方都进行外周血染色体核型分析是非常必要的。对于发现的携带者，遗传工作者可以通过提供遗传咨询进行生育指导［13］。传统遗传学认为，平衡易位患者形成完全正常和与患者相同平衡易位核型的平衡型配子的概率各为1／18，总概率为1／9；而现代研究认为，两条染色体平衡易位携带者理论上可产生36种不同的配子类型，但临床上其正常配子或平衡型配子的比例从1／3～1／2不等［14］。因此，在遗传咨询时应结合患者性别、参与易位的染色体及易位位点、形成的四射体构象等具体因素，为其提供更科学的咨询信息。作者认为对这类患者的遗传咨询有两大原则：（1）告知自然受孕出现流产，胎停育等的危险。不论概率是1／9，还是1／2，这类患者自然流产率都远远高于正常人群。（2）如果坚持自然受孕，孕期必须进行产前诊断。因为这类患者即使孕期没有出现流产等情况，也不能排除胚胎染色体核型为部分单体或三体的可能，出生缺陷儿的可能性远高于正常人群。（3）如果采取人工授精方式，必须进行胚胎植入前诊断［15］，以提高胚胎存活率及避免缺陷儿的出生。

通过对以上资料的总结回顾，说明染色体异常是出生缺陷、智力低下，原发、继发闭经，性发育异常；不良孕产史等疾病的常见原因，不同人群中，染色体异常的类型、比例也不同。对这类疾病常规进行细胞遗传学分析，有助于明确诊断，指导正确的诊疗措施及时实施，对临床的正确诊断和治疗具有重要的意义。

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