七味铁屑胶囊制备工艺与含量测定

★ 林艳

(中山市人民医院 广东 中山 528403)

藏药有着悠久应用历史，是医药宝库的重要组成部分。《中国药典》2010年版一部中的藏药七味铁屑丸[1]始载于藏医名家米彭朗杰嘉措的《集药利乐库》[2]，由铁屑(诃子制)、北寒水石(奶制)、藏木香等七味组成，具有行气活血、平肝清热止痛之功效，主治肝区疼痛、肝脏肿大病症，临床研究表明其在治疗脂肪肝方面疗效显著。但传统七味铁屑丸制剂为水泛丸，味苦而粒径较大，使用时需将其研碎，患者服用不便，且无法进行崩解度、溶出度等现代药品质量检测要求，不利于该制剂的市场推广和发展，不能更好的为临床需求服务。

本课题组采用快速搅拌制粒方法制备颗粒灌装胶囊，提高生产效率，并方便患者服用，适应现代药品质量监测体系。同时，应用高效液相色谱法，建立方中主要药效成分羟基红花黄色素A的含量测定方法，并进行方法学考察，为七味铁屑胶囊的制剂工艺改革和质量标准的建立提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 KJZ-10/200LB型快速搅拌制粒机(上海宏声制药机械厂)；DZF-6050型干燥箱(上海博讯实业有限公司)；LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津)；SPD-20A紫外检测器(日本岛津)；KQ5200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 药材与试剂 铁屑(诃子制)、北寒水石(奶制)、藏木香、木香、甘青青蓝、红花、五灵脂膏(由藏医学院藏药厂提供)，羟基红花黄色素A(中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号：111637-200704)；甲醇、乙腈为色谱纯，磷酸等为分析纯，纯化水(自制)。

2 七味铁屑胶囊的制备工艺研究

2.1 制备工艺过程 五灵脂水提，浓缩至一定浓度，备用。将铁屑(诃子制)、北寒水石(奶制)、藏木香、木香、甘青青蓝、红花药材粉碎成细粉，过100目筛，置于快速搅拌制粒锅内，开启搅拌桨，混匀。喷入五灵脂浸膏混均，开启制粒切割桨制粒，经过一定时间后，出料，60℃干燥60min，整粒，进行相关评价，灌装胶囊。

2.2 考察指标确定

2.2.1 颗粒得率 采用筛析法，将干燥整粒后的颗粒进行筛分，以40～60目筛之间的颗粒所占比例为成品颗粒得率。

2.2.2 休止角的测定 将三只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上3cm高处，将各组颗粒样品分别沿漏斗倒入最上方的漏斗中使其自然流下，并在水平面形成圆锥体，直至圆锥体尖端接触到最下面的漏斗为止。由坐标纸测出颗粒圆锥底部的直径，计算出休止角[3]。

2.2.3 综合评分 设定优质颗粒得率(Y1)与休止角(Y2)的权重系数分别为60%和40%。经过预实验，该制剂工艺所制备颗粒的休止角范围在30°～60°之间，休止角越小颗粒的流动性、填充性越好，因此设定综合评分计算公式为：

2.3 试验安排与结果

2.3.1 搅拌桨和切割桨转速的确定 设定开始喷入五灵脂浸膏后搅拌制粒20min，比较搅拌桨和切割桨转速设定对制粒效果的影响，结果如表1所示，表明当搅拌桨位于慢速档，切割桨位于快速时，得到的颗粒更符合胶囊剂的生产需要，因此确定为慢速搅桨，快速切桨。

表1 搅拌桨和切割桨转速对制粒效果的影响

2.3.1 制粒时间的确定 设定慢速搅桨，快速切桨，考察不同时间对制粒效果的影响，当制粒时间为30min时，优质颗粒收率为84.5%，休止角为37.2°，综合评分最高，制得的颗粒最符合生产需要。因此确定最佳制粒时间为30min。

表2 搅拌时间对制粒效果的影响

2.4 工艺验证实验 对优选工艺进行三批验证实验，结果见表3。三批实验结果综合评分的RSD为0.807%，表明该处方制剂稳定、可行。

表3 优选工艺验证实验结果

3 HSYA含量测定

3.1 色谱条件与系统适应性实验 色谱柱：Shim-Pack C18柱(150mm×4.6mm，5μm)，Shim-Pack C18预柱(100mm×4.6mm，5μm)，柱温25℃；流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26∶2∶72)，检测波长为402nm，流速为1.0 mL/min，柱温25℃，理论塔板数不低于3500，HSYA峰的拖尾因子为1.03[4,5]。

3.2 溶液的制备

3.2.1 对照品溶液的制备 精密称取HSYA对照品适量，置25mL容量瓶中，加入30%(体积分数)甲醇10mL，超声溶解后，用30%甲醇稀释至25mL，摇匀，制得质量浓度为0.10mg/mL的对照品溶液，备用。

3.2.2 样品溶液的制备 取“2.4”项下所制备七味铁屑胶囊适量，去壳，研细。精密称取粉末1.5g，置于具塞锥形瓶中，加入30%甲醇50mL，精密称定，超声提取30min，放冷，再称重，用30%甲醇补足损失质量，摇匀，过滤。

3.2.3 阴性样品溶液的制备 按七味铁屑胶囊处方比例制成不含红花的阴性对照样品，依“3.2.2”项方法制得阴性供试品溶液。

3.3 专属性实验 分别取对照品溶液、样品溶液和阴性对照供试品溶液10μL进样分析，在色谱条件下进行测定，结果表明阴性样品无干扰，见图1。

a.HSYA对照品；b.样品溶液；c.阴性样品

3.4 线性范围实验 精密吸取“3.2.1”项对照品溶液0.5，1.0，2.0，4.0，8.0mL，置10mL容量瓶中，以30%甲醇稀释至刻度，摇匀，制得系列浓度对照品溶液。分别进样10μL，测定峰面积。以对照品进样量(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，计算回归方程为：Y=3560293.34X+68152.25，r=0.9999，结果表明HSYA在1.0～80μg范围内与峰面积具有良好的线性关系。

3.5 精密度实验 分别精密吸取同一批HSYA对照品溶液10μL，按“3.1”项下色谱条件进样，平行测定6次，测得平均峰面积RSD为0.79%。

3.6 稳定性实验 取同一供试品溶液(批号：101101)，分别于0，4，8，16，32h进样10μL，测定峰面积RSD为1.29%，表明供试品溶液在32h内稳定。

3.7 重复性实验 取同一批供试品(批号：101101)，精密称定6份，按“3.2.2”项制备供试品溶液，分别进样10μL，测定峰面积并计算样品中HSYA的质量浓度RSD为1.39%，表明样品处理方法重复性良好。

3.8 加样回收率实验 精密称定已知含量的供试品(批号：101101)9份，分别精密加入HSYA对照品溶液适量，照“3.2.2”项方法制备供试品溶液，进样10μL测定峰面积，计算HSYA的回收率，结果见表4。

表4 HSYA加样回收试验结果

3.9 样品含量测定 取3批七味铁屑胶囊，按照前述方法制备供试品溶液，取供试品溶液10μL进样分析，记录峰面积，测定HSYA含量，结果见表5。

表5 样回含量测定结果(n=3)

4 讨论

七味铁屑丸处方中药材具有一定密度差，因此采用流化床制粒等现代工艺可能导致颗粒色泽不均匀，含量均匀度差异大等问题。而挤压式制粒工艺繁琐，操作流程多，不利于提高生产效率。快速搅拌制粒技术具有工艺简单，操作方便，生产效率高等特点，在混合室内可较好地完成捏合、制粒操作，物料混合均匀，色泽一致。

本工艺采用处方组成成分五灵脂浸膏为黏合剂，药辅同源，不引入其他辅料，保证了较低的生产成本。

课题组在预实验中比较了超声和回流提取七味铁屑胶囊颗粒中HSYA的方法，结果表明二者提取效果相同，且前者操作方便，因而确定含量测定样品采用超声提取方法制备。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典·一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：425-426.

[2]德吉，白玛，索朗，等.藏药七味铁屑胶囊治疗脂肪肝的临床研究[J].中国民族医药杂志，2011，7(7)：3-6.

[3]危华玲，黄延，卢文胜.复方野葛根胶囊剂的成型工艺研究[J].时珍国医国药，2008，19(8)：1996.

[4]黄志芳，刘云华，陈燕，等.RP-HPLC法测定如意珍宝丸中红花黄色素A的含量[J].中国中药杂志，2007，32(2)：148.

[5]陈卉，陈燕忠，谢清春，等.舒胸脉冲控释滴丸中阿魏酸和羟基红花黄色素A的测定[J].中国实验方剂学杂志，2013，19(10)：92-94.