Survivin、Livin、CD44v6在宫颈癌以及癌前病变中的表达及其临床意义

吴晓梅 袁 涛

(云南省第一人民医院妇科，云南 昆明 650032)

宫颈癌是女性生殖道常见肿瘤，好发于绝经后妇女，宫颈上皮内瘤变(CIN)是宫颈癌的癌前病变〔1〕。人乳头瘤病毒(HPV)感染、细胞癌基因的激活、抑癌基因的失活和细胞凋亡的抑制等与CIN及宫颈癌的发生与发展有很大联系〔2～4〕。近年来有研究发现细胞凋亡抑制蛋白在细胞凋亡的调控中发挥重要的作用，已发现的抑制蛋白有神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、细胞凋亡抑制蛋白(cIAP)、cIAP-2、生存素(Survivin)、Apollon、伊利诺斯低蛋白(ILP-2)和活素(Livin)，其中Survivin、Livin由于发现得晚、作用强而成为近年临床上对癌症治疗的关注热点。而肿瘤细胞的浸润及转移过程又涉及细胞黏附、细胞外基质降解及细胞运动等很多因素，细胞黏附分子CD44v6是作用于肿瘤细胞转移过程的细胞黏附方面〔5〕。本次研究旨在探讨老年宫颈癌及CIN中Survivin、Livin及CD44v6的表达情况，为临床上宫颈癌及CIN的诊疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 按知情同意原则选取2012年1月至2013年5月于我院就诊的60例宫颈癌患者的宫颈标本，年龄60～78岁，其中原位癌32例，浸润癌28例；65例CIN患者的宫颈标本，年龄61～77岁，Ⅰ级24例，Ⅱ级28例，Ⅲ级13例；同期正常体检者的正常宫颈组织标本80例，年龄65～80岁。三组患者年龄无统计学意义(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1链酶菌生物素蛋白(SP)免疫组化法 取下标本后石蜡包埋备用，苏木素-伊红(HE)染色。石蜡标本连续性切片(每份标本取3份切片)，切片厚4 μm，常规脱蜡、水化。行微波抗原修复处理，分别加入一抗后4℃过夜，加入二抗后常温孵育30 min，加入二氨基联苯胺(DBA)显色液进行显色再用苏木精进行复染。

1.2.2观察指标 在400倍光镜下观察记录结果，每份切片取10个高倍镜视野采取双人双盲计数〔6〕，记录切片中阳性细胞占同类观察细胞总数的百分比及其着色强度。Suvivin及Livin定位于胞质，CD44v6定位于细胞膜或细胞质中，分为4种等级：阳性细胞数少于观察细胞总数的10%计为阴性(-)；着色为浅黄色，且染色细胞数占观察细胞数10%～30%计为阳性(+)；着色为黄色，染色细胞数占观察细胞数30%～60%计为中度阳性()；细胞着色为棕黄色，染色细胞数占观察细胞数60%以上计为强阳性()。

1.3统计学方法 应用SPSS18.0软件进行分析，采用秩和检验、t检验及方差分析。

2 结 果

2.1Survivin、Livin及CD44v6在不同病理组织中的表达情况 Survivin、Livin及CD44v6的表达阳性率均在宫颈癌患者中最高，CIN患者次之，正常组织最低，差别均有统计学意义(均P<0.05)。见表1。

2.2Survivin、Livin及CD44v6的表达与宫颈癌患者临床病理指标的关系 宫颈癌Ⅰ、Ⅱ期患者Survivin、Livin及CD44v6的表达阳性率均低于Ⅲ、Ⅳ期(P<0.05)；病理分级低分化患者Survivin、Livin及CD44v6的表达阳性率均高于高分化及中分化(P<0.05)；有淋巴结转移患者Survivin、Livin及CD44v6的表达阳性率均高于无淋巴结转移患者(P<0.05)；鳞癌患者Survivin、Livin及CD44v6的表达阳性率均高于腺癌患者(P<0.05)。见表2。

表1 Survivin、Livin及CD44v6在不同病理组织中的表达情况(n)

表2 Survivin、Livin及CD44v6的表达与宫颈癌患者临床病理指标的关系(n)

3 讨 论

宫颈癌的形成、浸润和转移是非常复杂的病变过程，与很多抑癌基因和癌基因的表达、调控及细胞凋亡有关〔7〕。宫颈上皮内不典型增生致CIN至宫颈原位癌再发展为宫颈浸润癌是宫颈癌变的基本过程，临床上有研究发现，有凋亡抑制蛋白家族及细胞黏附分子等在其中发挥了重要作用〔8〕。Survivin是近几年发现的一种特异性的凋亡抑制基因，在多种癌变组织中呈特异性高表达，而在正常组织中几乎不表达，具有抑制细胞凋亡、调节细胞分化及参与血管形成的作用。因此，Survivin 的表达与癌变的关系密切，可在临床上作为肿瘤诊断与治疗的一个靶点〔9〕。Livin基因是2000年发现的细胞凋亡抑制蛋白家族的一个新成员〔10〕。CD44 基因是位于 11 号染色体的短臂上的一种生成跨膜糖蛋白的基因，主要有细胞黏附作用，增强细胞转移能力，参与淋巴细胞激活等重要作用。CD44v6 是CD44 的一种拼接变异体，是一种细胞基质透明质酸受体，可以改变肿瘤细胞表面黏附分子的功能和构成，其特异性高表达与多种恶性肿瘤的发生发展及侵袭转移有密切关系〔11,12〕。

本研究与施铮铮及蔡旺等〔13,14〕研究成果相近，提示这三种生物学指标在宫颈癌及其癌前病变的发生及发展过程中有重要的作用，可在临床上用于诊断宫颈癌及其癌前病变，且根据其具体水平来预测宫颈癌及其癌前病变的预后。宫颈癌患者病理等级越高其Survivin、Livin及CD44v6的阳性程度也越高，说明可通过检测患者Survivin、Livin及CD44v6的水平来确定患者的肿瘤恶化程度。

4 参考文献

1赵春兰,王 建,张会辰.宫颈癌及癌前病变筛查的现状和研究进展〔J〕.河北医药,2012；34(2):259-61.

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3吕红梅,魏双梅.Tiam1和CD44v6在宫颈癌中的表达及其相互关系研究〔J〕.当代医学,2012；18(17):32-4.

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5徐雅会,王德华.Survivin与Ki67在宫颈癌中的表达及相关性研究〔D〕.天津：天津医科大学妇产科学(硕士论文),2010.

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7Patrawala L,Calhoun T,Schneider-Broussard R,etal.Highly purified CD44 + prostate cancer cells from xenograft human tumors are enriched in tumorigenic and metastatic progenitor cells〔J〕.Oncogene,2006；25(12):1696-708.

8徐 飞,吴 强,孙志华,等.宫颈癌中Ezrin和CD44v6的表达及其相关性〔J〕.江苏医药,2010；36(21):2494-6.

9Gotte M,Yip GW.Heparanase，hyaluronan，and CD44 in cancers：a breast carcinoma perspective〔J〕.Cancer Res，2006；66(21):10233-7.

10张 蓉,侯文静.CD44v6在宫颈腺癌中的表达及临床意义〔J〕.山东医药,2009；49(40):41-2.

11衷筱琴,蔡红平,肖 雯,等.CD44v6和MMP-9过表达与宫颈癌浸润转移的关系〔J〕.中国妇幼保健,2009；24(34):4900-3.

12刘海英,江忠清.Ezrin、E-Cad及CD44v6在子宫颈上皮内瘤变组织的表达及临床意义〔D〕.福州：福建医科大学妇产科学(妇科肿瘤学)(硕士论文),2010.

13施铮铮,朱 华,郑飞云,等.Livin,Survivin及HPV16/18在宫颈癌及癌前病变中的表达和相关性研究〔J〕.温州医学院学报,2009；39(3):230-3.

14蔡 旺,齐 茹.CD44v6、MUC1在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达及其相关性〔J〕.中国老年学杂志,2012；32(16):3407-8.