马铃薯立枯丝核菌致病力及其生物防治初探

杨月+郭春兰+王介夫+肖亚静+孙冬梅

摘要：选取2种马铃薯立枯丝核菌，分别对7个不同马铃薯品种的块茎进行致病率试验，研究了不同生防菌对病原菌的抑制能力。结果表明，马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强；7个品种的马铃薯中，早大白与K18对供试病原菌比较敏感，兴佳2、中暑5抗病性比较强。接菌前喷7种生防菌剂对病原菌有一定抑制作用，但7种生防菌剂的抑病率稍有差别，2种混菌发酵液的抑病效果要好于单菌发酵液的抑病效果，3种混菌发酵液的效果最好。接完丝核菌菌丝块2 d后再进行喷菌处理虽有一定抑菌作用，但当病原菌已侵入后再进行抑菌治疗不能起到明显效果。

关键词：立枯丝核菌；马铃薯；生物防治

中图分类号：S435.32 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0129-02

丝核菌是一类在自然界中广泛存在的真菌，在全世界的耕作、非耕作土壤中均有分布，许多丝核菌很容易从染病植株及土壤中分离得到。丝核菌的寄主范围极广，可侵染43科200余种植物^[1]。丝核菌是一种土传植物病原真菌，容易引起植物烂种、苗期猝倒。丝核菌在土壤中的腐生竞争力强，存活时间长，被认为是最具破坏力的土传植物病原菌之一^[2]。丝核菌在菌丝分枝发生点附近缢缩，分枝点附近形成隔膜，菌丝经常呈直角或锐角分枝。生物防治主要是利用微生物之间的拮抗作用，选择对农作物不造成危害的微生物抑制病原菌的生长^[3]。细菌、放线菌、真菌在植物病害生物防治中开发应用前景良好，生防菌剂的研究及开发有着重要的现实意义^[4]。微生物源农药是目前应用最广、发展最快、最有前途的一类生物农药，是解决我国当前农业环境问题的主要突破口之一^[5-6]。

1 材料与方法

1.1 材料

2种马铃薯立枯丝核菌、细菌、放线菌、霉菌均由笔者所在实验室提供。早大白、尤金、兴佳2、中暑5、荷兰十五、K18、K13等7个马铃薯品种购自本地市场。供试培养基：马铃薯培养基（PDA）、查氏培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基。

1.2 方法

1.2. 1 试验菌种准备

将马铃薯立枯丝核菌接种于PDA培养基中，置28 ℃恒温箱中活化并扩大培养3 d，至菌落满皿，在菌落同心圆环处用解剖刀切取大小相等的菌丝块，备用。

1.2.2 马铃薯块茎的准备

将7个马铃薯品种均切成2 cm厚的块茎切片，备用。

1.2.3 马铃薯块茎接种

将切好的菌丝块置于马铃薯切片中心，每处理重复10次，置于28 ℃恒温箱中培养，接种3 d后记录病级。

1.2.4 马铃薯块茎病斑的分级标准

0级：没有晕圈；1级：有浅色的晕圈，或褐色小晕圈；2级：出现颜色稍深晕圈，晕圈较小，有浅色水珠；3级：出现褐色大晕圈；4级：出现褐色晕圈，且有褐色水珠，出现腐烂现象。

1.2.5 生防菌发酵液的获得

以牛肉膏蛋白胨培养基为液体培养基，分装于250 mL锥形瓶中，将供试细菌接于液体培养基中，置于摇床摇2 d，发酵液待用。以查氏培养基为液体培养基，250 mL锥形瓶中装液量为100 mL，孢悬液浓度为 106个/mL 接种5 mL，将供试霉菌接于液体培养基中，置于摇床摇7 d，发酵液待用。以高氏1号培养基为液体培养基，分装于250 mL锥形瓶中，将供试放线菌接于液体培养基中，置于摇床摇7 d，发酵液待用。

1.2.6 不同施用方法对立枯丝核菌的防治效果

喷雾后接种的防治效果：采用细菌、放线菌、霉菌的单菌发酵液，两两混菌发酵液及3种菌混合发酵液7种生防菌剂分别对早大白、K18这2个马铃薯品种的块茎进行定量喷雾，随后立即接丝核菌菌丝块，每处理重复3次，置于28 ℃恒温箱中培养，以只接病原菌不喷生防菌剂的马铃薯切片为对照，以只喷生防菌剂的马铃薯切片为参考，3 d后观察并记录病级。接菌2 d后喷雾的防治效果：对早大白、K18这2个不同马铃薯品种的块茎接完丝核菌菌丝块后，28 ℃ 培养2 d，再用7种生防菌剂分别进行定量喷雾处理，每处理重复3次，以只接病原菌不喷生防菌剂的马铃薯切片为对照，以只喷生防菌剂的马铃薯切片为参考，培养1 d后观察并记录病级。

2 结果与分析

2.1 立枯丝核菌对马铃薯块茎的致病率

由表1可知马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强，马铃薯丝核菌2对马铃薯块茎的致病力稍弱。7个马铃薯品种中，早大白与K18的抗病性比较弱，兴佳2、中暑5抗病性比较强。

3 结论与讨论

本研究表明，马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强；7个品种的马铃薯中，早大白与K18对供试病原菌比较敏感，兴佳2、中暑5抗病性比较强，应选择抗病性较强的马铃薯品种进行栽种。用7种不同的生防菌剂分别对早大白与K18这2个马铃薯品种的块茎进行定量喷雾处理后马上接丝核菌菌丝块，接菌前喷用7种生防菌剂对病原菌有一定的抑制作用，但7种生防菌剂的抑病率稍有差别，2个混菌发酵液的抑病效果要好于单菌发酵液的抑病效果，3种混菌发酵液的效果最好。2个不同马铃薯品种的块茎接种丝核菌菌丝块培养2 d后，用7种不同生防菌剂分别进行定量喷菌处理，再培养1 d，结果表明，接完丝核菌菌丝块2 d后再进行喷菌处理虽有一定的抑菌作用，但当病原菌已侵入后再进行抑菌治疗不能起到明显的效果。

参考文献：

[1]Suwannarach N，Kumla J，Bussaban B，et al. Biocontrol of rhizoctonia solani AG-2，the causal agent of damping-off by Muscodor cinnamomi CMU-Cib 461[J]. World Journal of Microbiology & Biotechnology，2012，28（11）：3171-3177.

[2]刘 力，葛起新. 华东地区立枯丝核菌融合群鉴定[J]. 浙江农业大学学报，1987，13（3）：3-9.

[3]张天晓，张志光. 立枯丝核菌Rhizoctonia solani Kühn的研究[J]. 湖南师范大学自然科学学报，1986，9（1）：76-82.

[4]郝建军，康宗利，于 洋，等. 植物生理学实验技术[M]. 北京：化学工业出版社，2007：98-101.

[5]陈立杰，董 健，朱晓峰，等. 生防放线菌Snea253代谢产物的理化性质[J]. 农药，2010，49（1）：26-28.

[6]周德庆. 微生物学实验手册[M]. 上海：上海科学技术出版社，1986：342-345.

摘要：选取2种马铃薯立枯丝核菌，分别对7个不同马铃薯品种的块茎进行致病率试验，研究了不同生防菌对病原菌的抑制能力。结果表明，马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强；7个品种的马铃薯中，早大白与K18对供试病原菌比较敏感，兴佳2、中暑5抗病性比较强。接菌前喷7种生防菌剂对病原菌有一定抑制作用，但7种生防菌剂的抑病率稍有差别，2种混菌发酵液的抑病效果要好于单菌发酵液的抑病效果，3种混菌发酵液的效果最好。接完丝核菌菌丝块2 d后再进行喷菌处理虽有一定抑菌作用，但当病原菌已侵入后再进行抑菌治疗不能起到明显效果。

关键词：立枯丝核菌；马铃薯；生物防治

中图分类号：S435.32 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0129-02

丝核菌是一类在自然界中广泛存在的真菌，在全世界的耕作、非耕作土壤中均有分布，许多丝核菌很容易从染病植株及土壤中分离得到。丝核菌的寄主范围极广，可侵染43科200余种植物^[1]。丝核菌是一种土传植物病原真菌，容易引起植物烂种、苗期猝倒。丝核菌在土壤中的腐生竞争力强，存活时间长，被认为是最具破坏力的土传植物病原菌之一^[2]。丝核菌在菌丝分枝发生点附近缢缩，分枝点附近形成隔膜，菌丝经常呈直角或锐角分枝。生物防治主要是利用微生物之间的拮抗作用，选择对农作物不造成危害的微生物抑制病原菌的生长^[3]。细菌、放线菌、真菌在植物病害生物防治中开发应用前景良好，生防菌剂的研究及开发有着重要的现实意义^[4]。微生物源农药是目前应用最广、发展最快、最有前途的一类生物农药，是解决我国当前农业环境问题的主要突破口之一^[5-6]。

1 材料与方法

1.1 材料

2种马铃薯立枯丝核菌、细菌、放线菌、霉菌均由笔者所在实验室提供。早大白、尤金、兴佳2、中暑5、荷兰十五、K18、K13等7个马铃薯品种购自本地市场。供试培养基：马铃薯培养基（PDA）、查氏培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基。

1.2 方法

1.2. 1 试验菌种准备

将马铃薯立枯丝核菌接种于PDA培养基中，置28 ℃恒温箱中活化并扩大培养3 d，至菌落满皿，在菌落同心圆环处用解剖刀切取大小相等的菌丝块，备用。

1.2.2 马铃薯块茎的准备

将7个马铃薯品种均切成2 cm厚的块茎切片，备用。

1.2.3 马铃薯块茎接种

将切好的菌丝块置于马铃薯切片中心，每处理重复10次，置于28 ℃恒温箱中培养，接种3 d后记录病级。

1.2.4 马铃薯块茎病斑的分级标准

0级：没有晕圈；1级：有浅色的晕圈，或褐色小晕圈；2级：出现颜色稍深晕圈，晕圈较小，有浅色水珠；3级：出现褐色大晕圈；4级：出现褐色晕圈，且有褐色水珠，出现腐烂现象。

1.2.5 生防菌发酵液的获得

以牛肉膏蛋白胨培养基为液体培养基，分装于250 mL锥形瓶中，将供试细菌接于液体培养基中，置于摇床摇2 d，发酵液待用。以查氏培养基为液体培养基，250 mL锥形瓶中装液量为100 mL，孢悬液浓度为 106个/mL 接种5 mL，将供试霉菌接于液体培养基中，置于摇床摇7 d，发酵液待用。以高氏1号培养基为液体培养基，分装于250 mL锥形瓶中，将供试放线菌接于液体培养基中，置于摇床摇7 d，发酵液待用。

1.2.6 不同施用方法对立枯丝核菌的防治效果

喷雾后接种的防治效果：采用细菌、放线菌、霉菌的单菌发酵液，两两混菌发酵液及3种菌混合发酵液7种生防菌剂分别对早大白、K18这2个马铃薯品种的块茎进行定量喷雾，随后立即接丝核菌菌丝块，每处理重复3次，置于28 ℃恒温箱中培养，以只接病原菌不喷生防菌剂的马铃薯切片为对照，以只喷生防菌剂的马铃薯切片为参考，3 d后观察并记录病级。接菌2 d后喷雾的防治效果：对早大白、K18这2个不同马铃薯品种的块茎接完丝核菌菌丝块后，28 ℃ 培养2 d，再用7种生防菌剂分别进行定量喷雾处理，每处理重复3次，以只接病原菌不喷生防菌剂的马铃薯切片为对照，以只喷生防菌剂的马铃薯切片为参考，培养1 d后观察并记录病级。

2 结果与分析

2.1 立枯丝核菌对马铃薯块茎的致病率

由表1可知马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强，马铃薯丝核菌2对马铃薯块茎的致病力稍弱。7个马铃薯品种中，早大白与K18的抗病性比较弱，兴佳2、中暑5抗病性比较强。

3 结论与讨论

本研究表明，马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强；7个品种的马铃薯中，早大白与K18对供试病原菌比较敏感，兴佳2、中暑5抗病性比较强，应选择抗病性较强的马铃薯品种进行栽种。用7种不同的生防菌剂分别对早大白与K18这2个马铃薯品种的块茎进行定量喷雾处理后马上接丝核菌菌丝块，接菌前喷用7种生防菌剂对病原菌有一定的抑制作用，但7种生防菌剂的抑病率稍有差别，2个混菌发酵液的抑病效果要好于单菌发酵液的抑病效果，3种混菌发酵液的效果最好。2个不同马铃薯品种的块茎接种丝核菌菌丝块培养2 d后，用7种不同生防菌剂分别进行定量喷菌处理，再培养1 d，结果表明，接完丝核菌菌丝块2 d后再进行喷菌处理虽有一定的抑菌作用，但当病原菌已侵入后再进行抑菌治疗不能起到明显的效果。

参考文献：

[1]Suwannarach N，Kumla J，Bussaban B，et al. Biocontrol of rhizoctonia solani AG-2，the causal agent of damping-off by Muscodor cinnamomi CMU-Cib 461[J]. World Journal of Microbiology & Biotechnology，2012，28（11）：3171-3177.

[2]刘 力，葛起新. 华东地区立枯丝核菌融合群鉴定[J]. 浙江农业大学学报，1987，13（3）：3-9.

[3]张天晓，张志光. 立枯丝核菌Rhizoctonia solani Kühn的研究[J]. 湖南师范大学自然科学学报，1986，9（1）：76-82.

[4]郝建军，康宗利，于 洋，等. 植物生理学实验技术[M]. 北京：化学工业出版社，2007：98-101.

[5]陈立杰，董 健，朱晓峰，等. 生防放线菌Snea253代谢产物的理化性质[J]. 农药，2010，49（1）：26-28.

[6]周德庆. 微生物学实验手册[M]. 上海：上海科学技术出版社，1986：342-345.

摘要：选取2种马铃薯立枯丝核菌，分别对7个不同马铃薯品种的块茎进行致病率试验，研究了不同生防菌对病原菌的抑制能力。结果表明，马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强；7个品种的马铃薯中，早大白与K18对供试病原菌比较敏感，兴佳2、中暑5抗病性比较强。接菌前喷7种生防菌剂对病原菌有一定抑制作用，但7种生防菌剂的抑病率稍有差别，2种混菌发酵液的抑病效果要好于单菌发酵液的抑病效果，3种混菌发酵液的效果最好。接完丝核菌菌丝块2 d后再进行喷菌处理虽有一定抑菌作用，但当病原菌已侵入后再进行抑菌治疗不能起到明显效果。

关键词：立枯丝核菌；马铃薯；生物防治

中图分类号：S435.32 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0129-02

丝核菌是一类在自然界中广泛存在的真菌，在全世界的耕作、非耕作土壤中均有分布，许多丝核菌很容易从染病植株及土壤中分离得到。丝核菌的寄主范围极广，可侵染43科200余种植物^[1]。丝核菌是一种土传植物病原真菌，容易引起植物烂种、苗期猝倒。丝核菌在土壤中的腐生竞争力强，存活时间长，被认为是最具破坏力的土传植物病原菌之一^[2]。丝核菌在菌丝分枝发生点附近缢缩，分枝点附近形成隔膜，菌丝经常呈直角或锐角分枝。生物防治主要是利用微生物之间的拮抗作用，选择对农作物不造成危害的微生物抑制病原菌的生长^[3]。细菌、放线菌、真菌在植物病害生物防治中开发应用前景良好，生防菌剂的研究及开发有着重要的现实意义^[4]。微生物源农药是目前应用最广、发展最快、最有前途的一类生物农药，是解决我国当前农业环境问题的主要突破口之一^[5-6]。

1 材料与方法

1.1 材料

2种马铃薯立枯丝核菌、细菌、放线菌、霉菌均由笔者所在实验室提供。早大白、尤金、兴佳2、中暑5、荷兰十五、K18、K13等7个马铃薯品种购自本地市场。供试培养基：马铃薯培养基（PDA）、查氏培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基。

1.2 方法

1.2. 1 试验菌种准备

将马铃薯立枯丝核菌接种于PDA培养基中，置28 ℃恒温箱中活化并扩大培养3 d，至菌落满皿，在菌落同心圆环处用解剖刀切取大小相等的菌丝块，备用。

1.2.2 马铃薯块茎的准备

将7个马铃薯品种均切成2 cm厚的块茎切片，备用。

1.2.3 马铃薯块茎接种

将切好的菌丝块置于马铃薯切片中心，每处理重复10次，置于28 ℃恒温箱中培养，接种3 d后记录病级。

1.2.4 马铃薯块茎病斑的分级标准

0级：没有晕圈；1级：有浅色的晕圈，或褐色小晕圈；2级：出现颜色稍深晕圈，晕圈较小，有浅色水珠；3级：出现褐色大晕圈；4级：出现褐色晕圈，且有褐色水珠，出现腐烂现象。

1.2.5 生防菌发酵液的获得

以牛肉膏蛋白胨培养基为液体培养基，分装于250 mL锥形瓶中，将供试细菌接于液体培养基中，置于摇床摇2 d，发酵液待用。以查氏培养基为液体培养基，250 mL锥形瓶中装液量为100 mL，孢悬液浓度为 106个/mL 接种5 mL，将供试霉菌接于液体培养基中，置于摇床摇7 d，发酵液待用。以高氏1号培养基为液体培养基，分装于250 mL锥形瓶中，将供试放线菌接于液体培养基中，置于摇床摇7 d，发酵液待用。

1.2.6 不同施用方法对立枯丝核菌的防治效果

喷雾后接种的防治效果：采用细菌、放线菌、霉菌的单菌发酵液，两两混菌发酵液及3种菌混合发酵液7种生防菌剂分别对早大白、K18这2个马铃薯品种的块茎进行定量喷雾，随后立即接丝核菌菌丝块，每处理重复3次，置于28 ℃恒温箱中培养，以只接病原菌不喷生防菌剂的马铃薯切片为对照，以只喷生防菌剂的马铃薯切片为参考，3 d后观察并记录病级。接菌2 d后喷雾的防治效果：对早大白、K18这2个不同马铃薯品种的块茎接完丝核菌菌丝块后，28 ℃ 培养2 d，再用7种生防菌剂分别进行定量喷雾处理，每处理重复3次，以只接病原菌不喷生防菌剂的马铃薯切片为对照，以只喷生防菌剂的马铃薯切片为参考，培养1 d后观察并记录病级。

2 结果与分析

2.1 立枯丝核菌对马铃薯块茎的致病率

由表1可知马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强，马铃薯丝核菌2对马铃薯块茎的致病力稍弱。7个马铃薯品种中，早大白与K18的抗病性比较弱，兴佳2、中暑5抗病性比较强。

3 结论与讨论

本研究表明，马铃薯立枯丝核菌1对马铃薯块茎的致病力最强；7个品种的马铃薯中，早大白与K18对供试病原菌比较敏感，兴佳2、中暑5抗病性比较强，应选择抗病性较强的马铃薯品种进行栽种。用7种不同的生防菌剂分别对早大白与K18这2个马铃薯品种的块茎进行定量喷雾处理后马上接丝核菌菌丝块，接菌前喷用7种生防菌剂对病原菌有一定的抑制作用，但7种生防菌剂的抑病率稍有差别，2个混菌发酵液的抑病效果要好于单菌发酵液的抑病效果，3种混菌发酵液的效果最好。2个不同马铃薯品种的块茎接种丝核菌菌丝块培养2 d后，用7种不同生防菌剂分别进行定量喷菌处理，再培养1 d，结果表明，接完丝核菌菌丝块2 d后再进行喷菌处理虽有一定的抑菌作用，但当病原菌已侵入后再进行抑菌治疗不能起到明显的效果。

参考文献：

[1]Suwannarach N，Kumla J，Bussaban B，et al. Biocontrol of rhizoctonia solani AG-2，the causal agent of damping-off by Muscodor cinnamomi CMU-Cib 461[J]. World Journal of Microbiology & Biotechnology，2012，28（11）：3171-3177.

[2]刘 力，葛起新. 华东地区立枯丝核菌融合群鉴定[J]. 浙江农业大学学报，1987，13（3）：3-9.

[3]张天晓，张志光. 立枯丝核菌Rhizoctonia solani Kühn的研究[J]. 湖南师范大学自然科学学报，1986，9（1）：76-82.

[4]郝建军，康宗利，于 洋，等. 植物生理学实验技术[M]. 北京：化学工业出版社，2007：98-101.

[5]陈立杰，董 健，朱晓峰，等. 生防放线菌Snea253代谢产物的理化性质[J]. 农药，2010，49（1）：26-28.

[6]周德庆. 微生物学实验手册[M]. 上海：上海科学技术出版社，1986：342-345.