超高效液相色谱高分辨四级杆飞行时间质谱法快速筛查乳制品中磺胺类与氟喹诺酮类药物

孟哲+石志红+吕运开等

摘要：利用超高效液相色谱高分辨四级杆飞行时间质谱联用技术， 建立了一种快速筛查乳制品中8种氟喹诺酮5种磺胺类药物及其4种乙酰化代谢物的新方法。采用乙腈20%三氯乙酸溶液（100∶1， V/V， pH 20）作溶剂和Oasis HLB固相萃取载体作吸附剂，实现了牛奶样品中17种目标物的同时提取和有效净化。利用MassLynx Chromlynx软件建立了这17种分析物的数据库。以Full Scan/MSE进行定性筛查和定量检测。4种代谢物在10～2000 μg/L范围内和其它分析物在05～100 μg/L范围内，其基质匹配内标校准曲线呈现良好的线性（R2>0983）。氟喹诺酮的定量限为05～08 μg/kg，磺胺类药物及代谢物的定量限为05～130 μg/kg。在3个添加水平分析物的平均回收率（69%～92%） 在职业分析化学家协会（AOAC）提出的允许范围之内，相对标准偏差均小于15%。本方法快速而灵敏，成功用于乳制品中抗生素及其代谢物的筛查、确认和定量分析。所研究的每种药物及代谢物残留均低于有关的最高残留限量（MRLs）， 但某些乳制品中其总残留量已超过最高残留限量。

1引言

磺胺类（Sulfonamides，SAs）和氟喹诺酮类（Fluoroquinolones，FQs）同属合成抗菌药物，广泛用于畜牧业中。由于抗生素的联合用药，导致多种抗生素在动物组织、器官或可食性产品（如蛋、奶）中的残留和代谢。牛奶中抗生素及其代谢物的残留已引起人们的关注。SAs代谢物乙酰化磺胺在尿中溶解度低，析出结晶质对肾脏损害较大。FQs药物对人体也有一定副作用。许多国家和国际组织制定了SAs和FQs的最大允许残留限（Maximum residue limits，MRL） [1～3]。我国规定牛奶中磺胺二甲嘧啶不得超过0025 mg/kg[3]。但关于抗生素代谢物的残留问题还未引起足够重视。

食品中兽药残留检测已从单一化合物向多种类、多化合物及其代谢物的同时定性和定量分析发展[4]。测定动物性食品中SAs或FQs残留的液相色谱质谱分析方法[5～7]，已经不适用实际样品快速筛查的需要。超高效液相色谱，具有更强的分离能力、样品通量和灵敏度。电喷雾离子源高分辨飞行时间质谱在MassLynx软件的支持下，可以提供母离子和碎片离子的精确质量数，准确推算可能的分子式，从而进一步对化合物的结构和裂解规律加以确证。超高效液相色谱与高分辨四级杆飞行时间质谱联用，不仅提高了抗生素及其代谢物残留快速定性筛查的可靠性，同时可以获得较高灵敏度的定量结果[8，9]。目前采用该技术进行快速筛查的研究已有报道[10～12]，但关于牛奶中抗生素及其代谢物同时筛查及确认的研究报道较少。

本研究以8种FQs和5种SAs及其4种代谢物为对象，利用高分辨四级杆飞行时间质谱，旨在建立牛奶中FQs和SAs及其代谢物快速筛查的方法。

摘要：利用超高效液相色谱高分辨四级杆飞行时间质谱联用技术， 建立了一种快速筛查乳制品中8种氟喹诺酮5种磺胺类药物及其4种乙酰化代谢物的新方法。采用乙腈20%三氯乙酸溶液（100∶1， V/V， pH 20）作溶剂和Oasis HLB固相萃取载体作吸附剂，实现了牛奶样品中17种目标物的同时提取和有效净化。利用MassLynx Chromlynx软件建立了这17种分析物的数据库。以Full Scan/MSE进行定性筛查和定量检测。4种代谢物在10～2000 μg/L范围内和其它分析物在05～100 μg/L范围内，其基质匹配内标校准曲线呈现良好的线性（R2>0983）。氟喹诺酮的定量限为05～08 μg/kg，磺胺类药物及代谢物的定量限为05～130 μg/kg。在3个添加水平分析物的平均回收率（69%～92%） 在职业分析化学家协会（AOAC）提出的允许范围之内，相对标准偏差均小于15%。本方法快速而灵敏，成功用于乳制品中抗生素及其代谢物的筛查、确认和定量分析。所研究的每种药物及代谢物残留均低于有关的最高残留限量（MRLs）， 但某些乳制品中其总残留量已超过最高残留限量。

1引言

磺胺类（Sulfonamides，SAs）和氟喹诺酮类（Fluoroquinolones，FQs）同属合成抗菌药物，广泛用于畜牧业中。由于抗生素的联合用药，导致多种抗生素在动物组织、器官或可食性产品（如蛋、奶）中的残留和代谢。牛奶中抗生素及其代谢物的残留已引起人们的关注。SAs代谢物乙酰化磺胺在尿中溶解度低，析出结晶质对肾脏损害较大。FQs药物对人体也有一定副作用。许多国家和国际组织制定了SAs和FQs的最大允许残留限（Maximum residue limits，MRL） [1～3]。我国规定牛奶中磺胺二甲嘧啶不得超过0025 mg/kg[3]。但关于抗生素代谢物的残留问题还未引起足够重视。

食品中兽药残留检测已从单一化合物向多种类、多化合物及其代谢物的同时定性和定量分析发展[4]。测定动物性食品中SAs或FQs残留的液相色谱质谱分析方法[5～7]，已经不适用实际样品快速筛查的需要。超高效液相色谱，具有更强的分离能力、样品通量和灵敏度。电喷雾离子源高分辨飞行时间质谱在MassLynx软件的支持下，可以提供母离子和碎片离子的精确质量数，准确推算可能的分子式，从而进一步对化合物的结构和裂解规律加以确证。超高效液相色谱与高分辨四级杆飞行时间质谱联用，不仅提高了抗生素及其代谢物残留快速定性筛查的可靠性，同时可以获得较高灵敏度的定量结果[8，9]。目前采用该技术进行快速筛查的研究已有报道[10～12]，但关于牛奶中抗生素及其代谢物同时筛查及确认的研究报道较少。

本研究以8种FQs和5种SAs及其4种代谢物为对象，利用高分辨四级杆飞行时间质谱，旨在建立牛奶中FQs和SAs及其代谢物快速筛查的方法。

摘要：利用超高效液相色谱高分辨四级杆飞行时间质谱联用技术， 建立了一种快速筛查乳制品中8种氟喹诺酮5种磺胺类药物及其4种乙酰化代谢物的新方法。采用乙腈20%三氯乙酸溶液（100∶1， V/V， pH 20）作溶剂和Oasis HLB固相萃取载体作吸附剂，实现了牛奶样品中17种目标物的同时提取和有效净化。利用MassLynx Chromlynx软件建立了这17种分析物的数据库。以Full Scan/MSE进行定性筛查和定量检测。4种代谢物在10～2000 μg/L范围内和其它分析物在05～100 μg/L范围内，其基质匹配内标校准曲线呈现良好的线性（R2>0983）。氟喹诺酮的定量限为05～08 μg/kg，磺胺类药物及代谢物的定量限为05～130 μg/kg。在3个添加水平分析物的平均回收率（69%～92%） 在职业分析化学家协会（AOAC）提出的允许范围之内，相对标准偏差均小于15%。本方法快速而灵敏，成功用于乳制品中抗生素及其代谢物的筛查、确认和定量分析。所研究的每种药物及代谢物残留均低于有关的最高残留限量（MRLs）， 但某些乳制品中其总残留量已超过最高残留限量。

1引言

磺胺类（Sulfonamides，SAs）和氟喹诺酮类（Fluoroquinolones，FQs）同属合成抗菌药物，广泛用于畜牧业中。由于抗生素的联合用药，导致多种抗生素在动物组织、器官或可食性产品（如蛋、奶）中的残留和代谢。牛奶中抗生素及其代谢物的残留已引起人们的关注。SAs代谢物乙酰化磺胺在尿中溶解度低，析出结晶质对肾脏损害较大。FQs药物对人体也有一定副作用。许多国家和国际组织制定了SAs和FQs的最大允许残留限（Maximum residue limits，MRL） [1～3]。我国规定牛奶中磺胺二甲嘧啶不得超过0025 mg/kg[3]。但关于抗生素代谢物的残留问题还未引起足够重视。

食品中兽药残留检测已从单一化合物向多种类、多化合物及其代谢物的同时定性和定量分析发展[4]。测定动物性食品中SAs或FQs残留的液相色谱质谱分析方法[5～7]，已经不适用实际样品快速筛查的需要。超高效液相色谱，具有更强的分离能力、样品通量和灵敏度。电喷雾离子源高分辨飞行时间质谱在MassLynx软件的支持下，可以提供母离子和碎片离子的精确质量数，准确推算可能的分子式，从而进一步对化合物的结构和裂解规律加以确证。超高效液相色谱与高分辨四级杆飞行时间质谱联用，不仅提高了抗生素及其代谢物残留快速定性筛查的可靠性，同时可以获得较高灵敏度的定量结果[8，9]。目前采用该技术进行快速筛查的研究已有报道[10～12]，但关于牛奶中抗生素及其代谢物同时筛查及确认的研究报道较少。

本研究以8种FQs和5种SAs及其4种代谢物为对象，利用高分辨四级杆飞行时间质谱，旨在建立牛奶中FQs和SAs及其代谢物快速筛查的方法。