核桃楸叶乙醇提取物对三种常见害虫的杀虫活性

吕 兵，王 卓，臧连生*，时东方，刘春明*

(1.吉林农业大学生物防治研究所/天敌昆虫应用技术工程研究中心，长春 130118;2.长春师范大学中心实验室，长春 130032)

核桃楸Juglans mandshurica Maxim.又名山核桃，属于胡桃科胡桃属落叶乔木，是东北红松林的重要伴生树种(孙墨珑等，2007)，其叶、外果皮及树皮均可以用来杀虫(时东方等，2013)。国内外学者已从核桃楸叶、皮和果中分离到胡桃醌、黄酮醇、槲皮苷等多种化合物(Lee et al.，2001;Li et al.，2003;石建辉等，2006;孙墨珑等，2007)，其中，胡桃醌是其中的主要毒性物质。已有学者研究表明，核桃楸叶乙醇提取物对舞毒蛾Lymantria dispar L.、甘蓝夜蛾Mamestra brassicae L.幼虫 (孙墨珑等，2007)以及双斑萤叶甲Monolepta hieroglyphica (Mots-chulsky)、菜青虫Pieris rapae L.和绿豆象Callosobruchus chinensis(L.)(时东方等，2013)等害虫具有一定的杀虫活性。温室白粉虱 Trialeurodes vaporariorum Westw.、蚜虫、小菜蛾Plutella xylostella (L.)幼虫是东北地区为害保护地和设施栽培蔬菜及观赏植物的重要害虫。目前，关于核桃楸提取物对这三种害虫的杀虫效果研究尚少。为此，笔者研究了核桃楸叶乙醇提取物对温室白粉虱、小菜蛾幼虫及蚜虫的杀虫活性，为充分利用本地核桃楸叶丰富自然资源，开发环境友好型植物源农药提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 供试植物材料

供试胡核桃楸叶2013年采于吉林省白山市江源县，自然阴干后，将叶粉碎过20-30 目筛备用。

1.2 供试昆虫

温室白粉虱、小菜蛾、豌豆蚜2012年采集自吉林农业大学蔬菜试验基地，在人工气候室(26±1℃，60%±5% RH，L 14∶10 D)条件下，分别用番茄、甘蓝和蚕豆进行续代繁殖。

1.3 杀虫活性物质的提取方法

称取50 g 核桃楸叶粉，用索氏提取器及95%乙醇回流提取4 h，旋转蒸发器减压浓缩，得醇提液浸膏，备用。具体操作方法参见时东方等(2013)。

1.4 提取物对温室白粉虱活性的测定

在预实验的基础上，将核桃楸叶乙醇提取物用蒸馏水稀 成 2.0395、1.6316、1.2237、0.8158、0.4079 g/L 五个浓度梯度，以蒸馏水做对照。核桃楸叶乙醇提取物对温室白粉虱的活性测定采用连叶浸渍法。将无虫番茄叶片在药液中浸渍约30 s，取出后晾干药液，将水培番茄叶片置于透明接虫杯内，并接入20 头粉虱成虫，48 h后，检查试虫存活数和死亡数。每个处理(浓度)重复10 次。

1.5 提取物对小菜蛾幼虫活性的测定

在预实验的基础上，将核桃楸叶乙醇提取物用蒸馏水稀 成 2.0395、1.6316、1.2237、0.8158、0.4079 g/L 五个浓度梯度，以蒸馏水做对照。用药方式为药液浸虫法。将试虫在供试核桃楸叶药液中浸渍5 s 后取出，吸去多余药液，移入培养皿中。供试小菜蛾幼虫饲喂新鲜的甘蓝叶片，48 h 后，检查试虫存活数和死亡数。每个处理提供5 头3-4 龄小菜蛾幼虫，每个处理重复10 次。

1.6 提取物对蚜虫活性的测定

在预实验的基础上，将核桃楸叶乙醇提取物用蒸馏水稀 成 1.9518、0.6798、0.4079、0.2719、0.1360 g/L 五个浓度梯度，以蒸馏水做对照。用药方式为浸虫浸叶法，将带有蚜虫的蚕豆叶片在供试药液中浸滞5 s 后取出，吸去试虫与叶片上多余药液，将试虫与叶片移入培养皿中，48 h 后，检查试虫存活数和死亡数。每个处理提供10 头蚜虫，每个处理重复11 次。

1.7 数据分析

以死亡率作为毒力指标，通过用药浓度-药效毒力回归评价核桃楸叶乙醇提取物的杀虫活性。校正死亡率计算公式:

校正死亡率=(处理死亡率-对照死亡率)/ (1-对照死亡率)×100 %。

数据用DPS 14.10 软件进行分析，以药剂质量浓度值的常用对数值为自变量，校正死亡率几率值为因变量，进行回归分析，求出供试昆虫对药剂反应的回归方程、LC50。不同处理间的死亡率进行方差分析，采用Duncan 氏新复极差法进行平均数的多重比较。

2 结果与分析

2.1 核桃楸叶乙醇提取物对温室白粉虱的毒杀作用

核桃楸叶乙醇提取物对白粉虱具有较强的胃毒作用(表1)。取食浸渍不同稀释浓度药液番茄叶片48 h 后，温室白粉虱的死亡率存在明显差异(F5，54=94.87，P＜0.0001)，随着药液浓度的增大，对于白粉虱的毒杀作用越强(见表1)。取食浸渍2.0395 g/L 番茄叶片48 h 后，白粉虱的校正死亡率高达94.48%。根据毒力测定结果，以质量浓度(对数)-校正死亡率(几率)建立毒力回归方程:Y=5.2645 +2.1140x，r=0.8297。当死亡率为50%时，LC50=0.7527 g/L。

2.2 核桃楸叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫的毒杀作用

核桃楸叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫具有较强的触杀作用(表1)。浸渍不同稀释浓度药液48 h 后，小菜蛾幼虫的死亡率存在明显差异 (F5，54=47.967，P＜0.0001)，随着药液浓度的增大，对于小菜蛾幼虫的毒杀作用越强。浸渍2.0395 g/L药液48 h 后，小菜蛾幼虫的校正死亡率高达98.00%。根据毒力测定结果，以质量浓度 (对数)-校正死亡率(几率)建立毒力回归方程:Y=5.2971+2.9402x，r=0.8786，当死亡率为50%时，LC50=0.7924 g/L。

表1 核桃楸叶乙醇提取物对温室白粉虱和小菜蛾48 h 的毒杀作用Table 1 Toxicity of alcohol extracts from Juglans mandshurica leaves on Trialeurodes vaporariorum and Plutella xylostella in 48 h

2.3 核桃楸叶乙醇提取物对蚜虫的毒杀作用

核桃楸叶乙醇提取物对蚜虫也有更强的触杀作用(表2)。浸渍不同稀释浓度药液48 h 后，豌豆蚜的死亡率存在明显差异(F5，60=29.285，P＜0.0001)，随着药液浓度的增大，对于蚜虫的毒杀作用越强。浸渍0.9518 g/L 药液48 h 后，豌豆蚜的校正死亡率高达89.35%。根据毒力测定结果，以质量浓度(对数)-校正死亡率(几率)建立毒力回归方程:Y=6.2442 +1.8476x，r=0.9893，当死亡率为50%时，LC50=0.2121 g/L。

表2 核桃楸叶乙醇提取物对蚜虫48 h 的毒杀作用Table 2 Toxicity of alcohol extracts from Juglans mandshurica leaves on Aphis craccivora in 48 h

3 结论与讨论

本研究结果表明，核桃楸叶乙醇提取物对东北地区三种常见害虫温室白粉虱、小菜蛾和豌豆蚜均有较好的毒杀作用。提取物对白粉虱成虫具有一定的胃毒作用，致死中浓度为0.7527 g/L，对小菜蛾幼虫和蚜虫则具有较强的触杀作用，致死中浓度分别为0.7924 和0.2121 g/L。

孙墨珑等(2007)研究表明，核桃楸叶乙醇提取物对舞毒蛾和甘蓝夜蛾幼虫具有杀虫活性，致死中浓度分别为3.9 和6.0 g/L，其报道数值高于本研究对三种昆虫的测试结果，可能与其选择测试的种类不同以及昆虫个体较大有关。苏秀等(2010)测试的山核桃Carya cathayensis Sarg.外果皮甲醇提取物对蚜虫的致死中浓度为42.8 g/L，其毒杀作用远低于本研究核桃楸叶乙醇提取物测定结果，这可能与提取工艺以及不同测试植物种类有关。此外，核桃楸叶提取物对双斑萤叶甲、菜青虫和绿豆象等害虫也表现出一定的杀虫活性(时东方等，2013)。本研究首次发现核桃楸叶提取物对粉虱类害虫也表现出较强的毒杀作用。有研究结果表明，核桃楸提取物具有广谱的杀虫活性，是否对瓢虫和寄生蜂等天敌昆虫具有杀虫活性有待进一步研究。

References)

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