出血性膀胱炎患者尿中BK病毒的阳性率调查分析

周佳子 董萍5006江苏省苏州大学附属第一医院4300江苏省盐城市射阳县中医院

出血性膀胱炎患者尿中BK病毒的阳性率调查分析

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目的：探讨造血干细胞移植术后并发出血性膀胱炎患者中BK病毒的阳性率。方法：造血干细胞移植术后并发出血性膀胱炎患者30例作为观察组，30例健康成人为对照组，运用PCR检测技术检测尿中的BK病毒DNA。结果：观察组26例检测出BK病毒DNA，病毒尿持续阳性中位时间7周（2～14周），对照组均未检出BK病毒。结论：造血干细胞移植术后出血性膀胱炎是常见的并发症之一，在这些患者中病毒尿的发生率明显增高，BK病毒可能参与出血性膀胱炎的发病过程。

BK病毒；出血性膀胱炎；造血干细胞移植

BK病毒是多瘤病毒家族亚成员之一，系DNA病毒，BK病毒广泛感染人群，最新统计发病率7％～68％［1］。出现临床症状的患者常限于免疫功能缺陷的个体，当机体免疫功能受抑制时复活，大量复制而致病［2］。出血性膀胱炎是造血干细胞移植后常见的并发症之一［3］，严重影响移植后的生存率，导致多脏器的衰竭。除药物和排异因素外，病毒感染尤其是BK病毒所引起的作用也越来越引起人们的重视。

资料与方法

2011-2012年收治接受造血干细胞移植后合并出血性膀胱炎患者30例，作为观察组，同时选择正常健康人30例作为对照组。收集两组的尿液进行检测。出血性膀胱炎按临床检验结果分四个等级［4］：①Ⅰ级：镜下血尿；②Ⅱ级：肉眼血尿；③Ⅲ级：肉眼血尿伴随血凝块；④Ⅲ-Ⅳ级伴有尿道梗塞导致肾功能损伤的表现。30例出血性膀胱炎患者中镜下血尿9例、肉眼血尿18例、肉眼血尿伴随血凝块3例。

尿液DNA的PCR检测：高速离心（8 000r/min，3min）取尿液上清200μL，用病毒基因组DNA提取试剂盒（北京康为世纪产品）提取病毒DNA。PCR检测：正向引物：5'AGTCTTTAGGGTCTTCTACC3'，反向引物：5'GGTGCCAACCTATGCAACAG3'［5］；反应体系：总体积25μL，其中PCR-mixture 12.5μL（含0.1 U Taq酶，500μmol/L dNTP，3mmol/LMgCl2等），正向、反向引物各0.5μL，DNA模板5μL，灭菌双蒸水6.5μL。反应条件：94℃5min，94℃45 s，57℃30 s，72℃30 s，共40个循环，72℃10min。BK病毒PCR产物176bp大小，用2％琼脂糖凝胶电泳观察。每次扩增均以双蒸水为模板作为为阴性参照，BK病毒DNA为模板作为阳性参照。

统计学分析：应用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，采用χ2检验，t检验及方差分析等方法分析。P＜0.05为差异具有统计学意义。

结果

观察组26例检测出BK病毒DNA，病毒尿持续阳性中位时间7周（2～14周），对照组均未检出BK病毒。

讨论

虽然造血干细胞移植后BK病毒在患者尿中的检出率显著增高，但经统计学分析，病毒浓度与病毒尿的出现可能与年龄、供/受者CMV感染血清学状态、性别、基础疾病、预处理方案、供者来源、干细胞来源（骨髓/外周血）、移植后血液学重建速度、GVHD严重程度、GVHD预处理方案等临床因素不存在显著相关［6］。免疫功能低下的患者体内人类多瘤病毒被激活，近年来引发的相关疾病逐渐受到关注，如艾滋病合并JCV相关的进行性多灶性白质脑病（PML）。肾移植后患者并发BKV相关性肾病，导致暂时甚至永久性肾功能不全，是肾移植失败的原因之一［7-8］。BK病毒感染、巨细胞病毒感染等因素可共同促进出血性膀胱炎的发生。

本研究结果显示，观察组26例检测出BK病毒DNA，病毒尿持续阳性中位时间7周（2～14周），对照组均未检出BK病毒。因此，造血干细胞移植术后出血性膀胱炎是常见的并发症之一，在这些患者中病毒尿的发生率明显增高，BK病毒可能参与出血性膀胱炎的发病过程。

［1］Miodosky M，Abdul-Hai A，Tsirigotis P，et al.Treatment of post-hem atopoietic stem cell transplantation hemorrhagic cystitiswith intravesicular sodium hyaluronate［J］.Bone Marrow Transplant，2006，38（7）：507-511.

［2］Hirsch HH.BK virus：opportunity makes a pathogen［J］.Clin Infect Dis，2005，41：354-360.

［3］吴德沛，谢颖.造血干细胞移植术后出血性膀胱炎的研究进展［J］.国际输血及血液学杂志，2007，30：113-115.

［4］Bogdanovicg，Priftakis P，Giraudg，et al.Association between a high BK Virus Load in Urine Samples of Patients with Graft-Versus-Host Disease and Development of Hemorrhagic Cystitis after Hematopoietic Stem Cell Transplantation［J］.J Clin Microbiol，2004，42：5394-5396.

［5］Gorczynnska E，Turkiewicz D，Rybka k，et al.Incidence，clinical outcome，and management of virus-induced hemorrhagic cystitis in children and adolescents after allogeneic hematopoietic cell transplantation［J］.Biol Blood Marrow Transplant，2005，11：797-804.

［6］卢育洪，朱康儿，李扬秋，等.造血干细胞移植后检出人类多瘤病毒尿的临床分析［J］.肿瘤防治研究，2007，34：681-683.

［7］Hirsch HH.Polyomavirus BK nephropathy：a（re-）emerging complication in renal transplantation［J］.Am J Transplant，2002，2（1）：25-30.

［8］Nickeleit V，Singh HK，Mihatsch MJ.Polyomavirus nephropathy：morphology，pathophysiology，and clinical management［J］.Curr Opin Nephrol Hypertens，2003，12（6）：599-605.

Investigation and analysis of BK virus positive in the urine of patients with hem orrhagic cystitis

Zhou Jiazi1，Dong Ping2
The First Hospital Affiliated to Suzhou University，Jiangsu Province 2150061
The Traditional Chinese Medicine Hospital of Sheyang County in Yancheng City，Jiangsu Province 2243002

Objective：To explore the BK virus positive in the urine of patientswith hemorrhagic cystitis after hematopoietic stem cell transplantation.Methods：30 cases of hemorrhagic cystitis patients after hematopoietic stem cell transplantation were as the observation group，and 30 cases of healthy adults were as the controlgroup.The BK virus DNA in urinewere detected using PCR detection technology.Results：26 cases of the observation group had BK virus DNA detected.Themedian duration of positive virus urine was 7（2～14）weeks.The control group had no BK virus detected.Conclusion：Hemorrhagic cystitis is one of common complications after hematopoietic stem cell transplantation，in which the virus in the urine has significantly higher incidence，and BK virusmaybe involved in the pathogenesis of hemorrhagic cystitisprocess.

BK virus；Hemorrhagic cystitis；Hematopoietic stem cell transplantation

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.1.82