HPLC法测定苹果酸阿莫曲坦含量的研究

周唯兰，吴品江，周芯宇， 颜 欢， 李元波

(扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司，四川成都 611830)



HPLC法测定苹果酸阿莫曲坦含量的研究

周唯兰，吴品江，周芯宇， 颜 欢， 李元波

(扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司，四川成都 611830)

[目的]建立一种高效液相色谱法，测定苹果酸阿莫曲坦片的含量。[方法]采用高效液相色谱法(HPLC)，色谱柱为Agilent Zobax SB C8 column (250×4.6 mm，5 μm )；以缓冲液(取0.5 g辛烷磺酸钠与5 ml磷酸溶液，加水至1 000 ml，用5 mol/L氢氧化钠调节pH至3.0)-乙腈作为流动相，等度洗脱，流速1.0 ml/min，柱温30 ℃，检测波长230 nm，进样量10 μl。[结果]苹果酸阿莫曲坦的浓度在17.49～209.88 μg/ml范围内线性关系良好(Y=27.534X+9.693，r=0.999 9)，高、中、低 3 种浓度的平均回收率(n=3)为99.23% (RSD=0.95%)；中间精密度RSD=0.98%(n=6)，重复性和耐用性良好。[结论]该方法简便、灵敏、准确，可作为苹果酸阿莫曲坦片含量的检验方法。

苹果酸阿莫曲坦；含量测定；HPLC

苹果酸阿莫曲坦片由西班牙Almirall Prodesfarma公司原研，Almirall与Johnson & Johnson和Abbott等公司合作开发，于2000年9月首次在西班牙上市，2001年在美国、丹麦、芬兰、德国、新西兰等国家上市。适应症为有偏头痛病史的患者有或无先兆的偏头痛发作的急性治疗，耐受性好，不良反应轻微且短暂。该药物有望成为曲坦类药物的后起之秀，有着较广阔的市场前景[1]。为了临床安全和合理用药，笔者建立了HPLC法测定苹果酸阿莫曲坦含量，对其质量进行控制，方法可靠，结果准确。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂1100高效液相色谱仪(美国安捷伦，VWD紫外检测器)；BP61型Sartorius电子分析天平(上海精科仪器厂)；苹果酸阿莫曲坦对照品(批号：FOJ054，USP)；苹果酸阿莫曲坦片(自制：14110101，14110601，14110901)；乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。

1.2 色谱条件色谱柱：Agilent Zobax SB C8色谱柱(250×4.6 mm，5 μm )；流速1.0 ml/min，柱温30 ℃，检测波长230 nm，柱温30 ℃，进样量10 μl。以缓冲液(取0.5 g辛烷磺酸钠与5 ml磷酸溶液，加水至1 000 ml，用5 mol/L氢氧化钠调节pH至3.0)-乙腈(70∶30)作为流动相，按等度进行洗脱。

1.3 测定方法取本品适量(约相当于苹果酸阿莫曲坦17.5 mg)，精密称定，置50 ml棕色量瓶中，加流动相溶液溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置10 ml棕色量瓶中，用流动相溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取苹果酸阿莫曲坦对照品，精密称定，加流动相溶液溶解，并定量稀释制成约含苹果酸阿莫曲坦70 μg/ml的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

2 结果与分析

2.1 系统适应性试验取本品粉末，精密称定，加流动相溶液溶解，并定量稀释制成约含苹果酸阿莫曲坦70 μg/ml的溶液，作为系统适用性试验溶液。精密量取系统适用性试验溶液10 μl，注入高效液相色谱仪，连续进样6次，记录色谱图，峰面积和保留时间的RSD应小于2.0%，结果表明本品色谱条件下连续进样重复性良好。

2.2 空白干扰专属性试验取混合均匀的空白辅料适量(约相当于苹果酸阿莫曲坦17.5 mg)，精密称定，置250 ml量瓶中，加流动相溶液适量，超声使主药溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为空白辅料溶液。精密量取10 μl注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，辅料在与供试品主峰保留时间相同处无色谱峰出现，不干扰本品的含量的测定。

2.3 线性与范围取苹果酸阿莫曲坦对照品约17.5 mg，精密称定，置50 ml棕色量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液；精密量取贮备液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0 ml，分别置于10 ml棕色量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取上述溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积为纵坐标进行线性回归，回归方程为Y=27.534X+9.693(r=0.999 9)。苹果酸阿莫曲坦浓度在17.49～209.88 μg/ml范围内，呈良好的线性关系。

2.4 重复性试验取苹果酸阿莫曲坦样品，精密称定，加流动相溶液溶解，并且定量稀释制成约含苹果酸阿莫曲坦70 μg/ml的溶液，平行配制6份样品进行含量测定，考察该方法的重复性。研究表明，平行试验6份样品的含量测定结果RSD小于2%，方法重复性良好，适合含量测定。

2.5 中间精密度试验取本品，按上述方法，分别于不同时间、不同实验员、不同仪器试验按照上述测定方法测定，平行配制6份样品进行含量测定，将6次的测定结果与重复性试验结果做统计分析。由表1可知，2次测定结果基本一致，无明显不同，表明方法的精密度良好。

表1 苹果酸阿莫曲坦中间精密度试验 %

2.6 回收率试验取苹果酸阿莫曲坦对照品约17.5 mg，精密称定，置50 ml棕色量瓶中，加流动相溶液溶解，并且稀释至刻度，摇匀；精密量取2 ml，置10 ml棕色量瓶中，用流动相溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别称取苹果酸阿莫曲坦原料约280、350、420 mg，各3份，按20片处方配比，分别加适量辅料压片，各取1片按照含量测定项下检查法制备供试品溶液。精密量取上述溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。由表2可知，回收率良好。

表2 回收率试验

2.7 溶液稳定性试验取供试品溶液，于棕色量瓶中室温放置10 h，分别在0、1、2、4、6、8和10 h精密量取10 μl注入液相色谱仪，记录色谱图，考察含量的变化。研究表明，含量测定溶液于棕色量瓶中室温放置10 h，峰面积无明显变化，可知该溶液稳定良好。

2.8 耐用性试验通过将色谱条件的流动相初始比例、pH、流速、柱温及色谱柱更换进行微小的变动，考察该色谱条件的耐用性。由表3可知，对色谱条件进行微小变动，各变异条件下对本品含量检测无明显影响，可知该方法耐用性良好。

表3 含量测定耐用性考察综合结果

2.9 样品测定按照“1.3”项下测定方法测定苹果酸阿莫曲坦片14110101、14110601、14110901批的含量结果分别为99.23%、99.96%、100.23%。

3 讨论

目前国内尚无苹果酸阿莫曲坦含量测定的相关报道，笔者建立了一种采用HPLC法测定苹果酸阿莫曲坦含量的方法，其准备度高，方便快捷，能有效控制苹果酸阿莫曲坦的质量。

[1] 王鹏,高永鑫,廖福广.抗偏头痛新药阿莫曲坦[J].中国新药杂志,2006(2):152-154.

Determination of Almotriptan Malate Tablets by HPLC

ZHOU Wei-lan, WU Pin-jiang, ZHOU Xin-yu et al

(Yangtze River Pharmaceutical Group Sichuan Eron Pharmaceutical Company Limited, Chengdu, Sichuan 611830)

[Objecive] To establish a HPLC method for the determination of almotriptan malate tablets.[Method] Using high-performance liquid chromatography, chromatographic column of Agilent zobax SB C8 column (250×4.6 mm, 5 μm); With a mixture of octane sulfonate buffer (adjusted pH to 3.0 with phosphoric acid) and acetonitrile as mobile phase, isocratic elution method, flow rate 1.0 ml/min, temperature 30°C, detection wavelength 230 nm, injection 10 μl.[Result] Almotriptan malate concentration in the range of 17.49 to 209.88 μg/ml has a good linear relationship (Y= 27.534X+ 9.693,r= 0.999 9), the average recovery of high, middle, low, 3 kinds of concentration ratio (n=3 ) 99.23%(RSD=0.95%); intermediate precisionRSD=0.98% (n=6), Repeatability and durability is good.[Conclusion] The method is simple, sensitive, accurate, reproducible, which is suitable for the determination of almotriptan malate.

Almotriptan malate; Content determination; HPLC

周唯兰(1973-)，女，重庆人，工程师，从事药物制剂与分析方面的研究。

2015-01-26

S 854.5+3

A

0517-6611(2015)08-007-02