儿科痰培养肺炎链球菌的耐药性分析

王东妮

摘要：目的 分析儿科痰培养肺炎链球菌对常用抗生素的耐药性。方法 对我院982例肺炎患儿进行肺炎链球菌抗生素药物敏感性实验。结果 在对至少其他一种抗生素耐药方面：青霉素敏感组菌株占8.33%（5/60）、青霉素中度耐药组的76.9%（10/13）、青霉素高度耐药组的100%（6/6）。结论 肺炎链球菌对多种抗生素耐受，且随着对青霉素耐药性的升高肺炎链球菌对氯霉素、氧氟沙星、头孢克罗、头孢噻肟、头孢唑啉的耐药性也在升高。临床上抗生素的使用严格规范，针对每个患者的不同情况制定个体治疗方案，确保抗生素的使用有效合理。

关键词：痰培养；儿科；肺炎链球菌；耐药性

肺炎链球菌（streptococcus peeumonia，SP）是人体常见的一种感染性细菌，常引发肺炎、化脓性脑膜炎、中耳炎等感染性疾病。WHO的调查显示，全球每年因感染肺炎链球菌而死亡的儿童比例持续上升[1、2]。为分析肺炎链球菌的耐性情况，指导抗生素的合理选用，本研究对我院982例肺炎患儿进行痰培养和链球菌药物敏感性实验。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集我院2009年6月～2014年6月982例肺炎患儿的痰液标本，982例患儿中，男497例，女485例，年龄1个月～12岁，平均年龄（6.3±1.5）岁。患儿入院当天，经生理盐水清洗口腔后获取痰液标本，或采用低压吸痰器经由一次性吸痰管获取痰液标本，将982例标本置于消毒试管内。

1.2方法

1.2.1材料 肺炎链球菌的培养基选用Columbia基础培养基，外加脱纤维羊血（5%）。药敏培养基为：M-H琼脂，外加脱纤维羊血（5%）。药敏试验中所需的药敏纸片为5μg/片的OP纸片。所用抗生素包括：红霉素、氯霉素、克林霉素、万古霉素、氧氟沙星、四环素、头孢克罗、头孢唑啉、头孢噻肟。

1.2.2 试验方法 使用无菌吸痰器将痰液标本接种于培养基中，肺炎链球菌的分离、培养及鉴定操作依据《全国临床检验操作规程》[3]的相关规定，对于肺炎链球菌的疑似菌落，根据其具体特点选择α-溶血、奥酱托辛（OptocIlin）分离实验（抑菌环≥14mm） 、革兰氏染色或胆盐溶菌等方法对其进行鉴定。

药敏试验方法为K-B法，操作方法依据《NCCLS抗微生物试验标准》[4]，将982例标本接种于药敏培养基，检测其对红霉素、氯霉素、克林霉素、万古霉素、氧氟沙星、四环素、头孢克罗、头孢唑啉、头孢噻肟的敏感性。最低抑菌浓度（能抑制细菌生长的最低体外药物浓度，MIC）的测定采用Micro Sean药敏板进行，敏感：MIC≤0.064mg/L，中度耐药：MIC=0.12～1.0mg/L，高度耐药：MIC≥2mg/L。

1.3统计学方法 使用SPSS 19.0软件进行统计学分析。采用χ2检验进行差异性分析，若P<0.05则差异有统计学意义。

2 结果

2.1肺炎链球菌检出率 本组982例标本共检出79株肺炎链球菌，检出率8.1%，其中男43例（54.4%），女36例（45.6%），无显著差异（P>0.05）。79株肺炎链球菌中，60株对青霉素敏感，13株对青霉素中度耐药，6株对青霉素高度耐药。

2.2 抗生素耐药性 按青霉素耐药情况将79株肺炎链球菌分为敏感组、中度耐药组及高度耐药组。①青霉素敏感组的60株链球菌中，5株对至少一种其他抗生素耐药（其中1株对两种抗生素耐药）；②青霉素中度耐药组的13株链球菌中，10株（92.3%）对至少一种其他抗生素耐药（其中1株对2种抗生素耐药，1株对3种抗生素耐药）；③青霉素高度耐药组的所有6株链球菌均对至少一种其他抗生素耐药（1株对3种抗生素耐药，3株对4种抗生素耐药，2株对5种抗生素耐药）；简单归纳可知：79株肺炎链球菌中，21株对至少其他一种抗生素耐药，其中9株对多种抗生素耐药。

此外，青霉素耐药组的氯霉素、氧氟沙星、头孢克罗、头孢噻肟、头孢唑啉五种抗生素的耐药率高于青霉素敏感组，差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

肺炎链球菌是一种常见的呼吸道感染性病原菌，常定植于鼻咽部黏膜。由于婴幼儿机体功能尚未发育完全，对外部环境的抵抗力弱，故肺炎链球菌感染多发于免疫力低下的3岁以内婴幼儿，可能引起肺炎、中耳炎、脑膜炎、败血症等疾病，对婴幼儿的健康造成了极大的危害。近年来，随着抗生素的滥用，肺炎链球菌的药物耐药性不断增加，给疾病的临床治疗带来了相当的难度，导致全球每年因感染肺炎链球菌而死亡的儿童比例持续上升。因此，合理使用抗生素已经成为医学工作者的重要研究课题。肺炎链球菌的耐药机理为：肺炎链球菌结合其他耐药菌的DNA后，其细胞壁上控制抗生素作用靶点PBP发生变异，改变了青霉素结合蛋白编码的基因序列与结合位点，产生的西林结合蛋白可减弱肺炎链球菌对一内酰胺类抗生素的敏感性[2，5]。相应的，对青霉素产生耐药的细菌对其他的抗生素的敏感性也随之降低。

临床中常用的抗生索有青霉索类、头孢菌类、四环素类等药物，通过肺炎链球菌的耐性性试验可以看出，肺炎链球菌对多种抗生素均具有耐药性。79株肺炎链球菌中，21株对至少一种抗生素耐药，其中9株对多种抗生素耐药；青霉素耐药组的氯霉素、氧氟沙星、头孢克罗、头孢噻肟、头孢唑啉五种抗生素的耐药率高于青霉素敏感组，差异有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，肺炎链球菌对多种抗生素耐受，且随着对青霉素耐药性的升高肺炎链球菌对氯霉素、氧氟沙星、头孢克罗、头孢噻肟、头孢唑啉的耐药性也在升高。因此，抗生素的使用必须进行严格的规范与控制，建立抗生素使用监测网络，对肺炎链球菌的耐药性及其他抗菌药物的使用情况进行监测，总结其使用经验。同时，针对每个患者的不同情况制定个体治疗方案，有效合理的使用抗生素类药物。

参考文献：

[1]李自华，方玉蓉，胡振，等.520例小儿肺炎痰液病原菌分布及耐药性分析[J].临床肺科杂志，2013，18（8）：1441-1442.

[2]白琼，李芳，石瞾玲，等.儿科重症监护病房痰培养病原菌分布及耐药性分析[J].当代医学，2014，（10）：33-33.

[3]蒋圣灿.儿童社区获得性肺炎（CAP）病原构成及肺炎链球菌的耐药性分析[J].中国医药指南，2012，10（20）：487-488.

[4]Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing；Fifteenth informational supplement.CLSI/NCCLS document M100-S15[S].Clinical and Laboratoryn Standards Institute Wayne Pennsylvania，2005，25（1）：1-167.

[5]李树青，沈玲，徐风芝，等.小儿社区获得性肺炎的细菌学检测和耐药性分析[J].潍坊医学院学报，2013，（6）：428-431.

编辑/成森