百合更年安颗粒长期毒性研究

北京中研同仁堂医药研发有限公司 中药复方新药开发国家工程研究中心（100079）翟建英 杨海润 张思玉 朱晓光 陈会丛

北京同仁堂科技发展股份有限公司（100079）李晋生△

百合更年安颗粒是同仁堂的经验方[1]，由百合、枸杞子、阿胶珠、南沙参、牡蛎、钩藤、莲子心、远志、浮小麦、陈皮组成，具有滋养肝肾、宁心安神的功效，临床多用于更年期综合症，阴虚肝旺型，症见烘热汗出，头晕耳鸣，失眠多梦，五心烦热，腰背酸痛，大便干燥，心烦易怒等症，疗效肯定。为给临床用药提供安全依据，本文从安全性角度对百合更年安颗粒进行了大鼠180天给药长期毒性研究，报告如下。

1 实验材料

1.1 受试物 百合更年安颗粒干膏粉，批号1111567，北京同仁堂科技发展股份有限公司提供。

1.2 试验动物 SD大鼠，SPF级，雌雄各半，体重100～110g；动物合格证号：SCXK（京）2006—0008, 由北京大学医学部实验动物科学部提供。

1.3 仪器 CD3700全自动血球计录仪（美国）；XL-300全自动生化分析仪（德国）；EasyLyte PLUS型 钠/钾/氯分析仪（美国）；德国科宝100型尿液检测仪（德国）；LG-PABER-I型血小板聚集凝血因子分析仪（中国）；OLYMPUS BH-2型显微镜及图像分析系统（日本）。

1.4 试剂 血液生化试剂盒：测定所用12项试剂盒（尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、总胆固醇（T-CHO）、总胆红素（T-Bil）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（ALP）、）天门冬氨酸氨基转换酶（AST）、丙氨酸氨基转换酶（ALT）、肌酐（Crea）、甘油三脂（TG））均购自中生北控生物科技股份有限公司生产。血球稀释液、溶血剂、鞘液、血球清洗液、酶清洗液：雅培生产。尿十一项试纸条：德国科宝公司生产。凝血酶和凝血酶原试剂：购自北京中勤世帝科学仪器有限公司。

2 方法

2.1 大鼠长期毒性试验[3][4][5][6]100～110g SPF级SD大鼠160只，雌雄各半，适应性喂养一周后随机分为4组，每组40只，雌雄各半，试验分为空白对照组和百合更年安颗粒高（35.784生药/kg/日）、中（17.892 g生药/kg/日）、低（8.946 g生药/kg/日）剂量组，分别相当于成人临床日用量的57、28.5、14倍。高、中、低3个剂量组，大鼠按每100g体重1.5ml的体积灌胃给药，对照组灌胃给予等体积蒸馏水。每日上午9∶00～11∶00灌胃一次，间隔4h后第二次给药，每周给药6天，周日停药1天。连续灌胃给药26周，停药恢复4周。每日观察动物的外观体征、精神状态、行为活动、腺体分泌、呼吸、饮水和二便、毛发等情况；每周称体重1次，计算饲料消耗量、计算体重增长值及进食量（进食量100g/只/天），并根据体重调整给药量。分别于给药后13周、给药后26周和停药4周，各给药组分别取动物10只（13周）、20只（26周）和各组剩余动物10只（停药4周），对动物一般行为、体重增长、食量消耗、血液学、血液生化检查、尿常规检查、系统解剖及组织病理学进行检测。

3 结果

3.1 对大鼠一般状况、体重及摄食量的影响 百合更年安颗粒高、中、低剂量组连续灌胃给药26周及恢复4周期间，各组动物一般状况良好，未见动物死亡。皮毛光泽，一般活动以及二便均未见异常，口、鼻、眼无异常分泌物，未见呼吸困难等异常改变，动物未见恶心、呕吐等胃肠道反应。各给药组体重变化与空白对照组比较偶有差异，但无量效和时效关系。

3.2 对大鼠血液学指标的影响 雌鼠给药13周时，中剂量组HGB与空白对照组比较显著降低（P<0.05），给药26周及停药4周后与空白对照组比较无显著差异。余未见异常。

雄鼠给药26周时，大剂量组MPV与空白对照组比较，显著降低（P<0.01），给药13周及停药4周后与空白对照组比较无显著差异。其余指标与对照组比较无明显差异。（实验数据备查）

3.3 对大鼠凝血时间的影响 同空白对照组比较，给药26周时，雌鼠中、低剂量组PT显著降低（P<0.05），APTT显著增高（P<0.01）。30周时各给药组与空白对照组比较未见明显差异。

同空白对照组比较，30周时，雄鼠高、中、低剂量组PT显著降低（P<0.01），余未见异常。（试验数据备查）

3.4 对大鼠血液生化学指标的影响 雌鼠：给药13周时，同空白对照组比较，高、低剂量组GLU显著升高（P<0.01）；给药26 周时，中剂量与低剂量组G L U升高，与空白对照组比较有显著差异（P<0.05），停药4周后，各组GLU与空白对照组比较无明显差异。其余指标，与空白对照组比较未见异常。

雄鼠：给药13周时，各给药组AST同空白对照组比较均显著降低（P<0.05），高剂量组CK显著升高（P<0.05），其他各项指标与对照组比较无显著差异。给药26周时，中剂量组CHO、低剂量组CK显著降低，与空白对照组比较均有显著差异（均P<0.01），高、中、低剂量组TP与空白对照组比较降低（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。停药4周后，高、低剂量组CRE与空白对照组比较有显著降低（P<0.05，P<0.01），中低剂量组Cl-、Na+显著升高，与空白对照组比较有显著差异。其余各项指标各给药组与空白对照组比较未见统计学差异。（实验数据备查）

对高校教师来说，最重要的便是职称的评定。但现阶段民办高校和公办高校一样，都是根据科研、课题、教材编写和获奖情况来作为对教师评价的标准。但对教学质量这一部分并没有一个严格的评定标准，仅是在课时量上有一点限制。这样的现状造成了高校教师在向“双师型”教师转型的过程中没有积极性和动力，认为即使变成“双师型”教师依然没有任何优势。即使学校为其创造了去企业实习实训的机会和环境，部分教师依然表现出消极态度，认为是浪费时间。这样的错误观念导致了现如今高校教师转型困难，内在动力不足。

这些指标数值的的变化未见到与药物相关的规律性的变化，数值在正常范围内波动，数值的升高或者降低仅仅有统计学意义，没有生物学意义。结果提示，大鼠灌胃给予百合更年安颗粒丸连续26周和停药4周对血液生化各项指标没有明显的影响。

3.5 大鼠系统解剖检查结果 百合更年安颗粒三个剂量组给药13周、26周以及停药4周，各组动物的体表检查未见明显异常，各脏器外观完整、色泽正常；脏器大小、形状、外表切面、质地均未见明显异常，未见水肿、淤血和坏死等改变，腹腔、胸腔未见渗液和粘连，脏器组织未见明显的肉眼可见的病理变化。

3.6 对大鼠脏器指数的影响 雌鼠，给药13周时，中剂量组子宫显著升高，与空白对照组比较有明显差异（P<0.05）。给药26周时，高、中、低剂量组肺脏与空白对照组比较显著降低（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。停药4周时，高剂量组心脏显著增大，与空白对照组比较有明显差异（P<0.01）；高、中、低剂量组肺脏显著降低，与空白对照组比较有明显差异（P<0.01，P<0.01，P<0.05）。其余各组脏器系数与空白对照组比较未见明显差异。

雄鼠，给药13周时，同空白对照组比较，高剂量组脑显著增大（P<0.01），高、低剂量组肾显著增大（P<0.01，P<0.05），高剂量组肾上腺显著增大（P<0.05）。给药26周时，与空白对照组比较，各给药组肺脏系数显著降低（P<0.01，P<0.05，P<0.01），低剂量组肾上腺显著降低（P<0.05）。停药4周时，与空白对照组比较，中低剂量组肺脏系数显著降低（P<0.05，P<0.01）；高剂量组肾上腺显著增大（P<0.05）。（实验数据备查）

结果表明，各脏器系数未发现规律性变化，大体解剖未见明显异常，考虑这些变化可能与动物体重差异有关，仅有统计学意义，无生物学意义。

3.8 病理学检测 连续给药13周、26周及停药4周时，剖检观察及病理学镜检未见毒副作用引起的病理组织学改变。百合更年安颗粒对大鼠经口给药13周、26周及停药4周后，高剂量组动物的各脏器组织未见与受试药毒性有关的病变。

4 讨论及结论

百合更年安颗粒应用于更年期综合症疗效确切，基础研究表明本药对垂体-卵巢轴具有兴奋作用，并有调节生殖内分泌系统和改善人体性腺功能[7]，抗交感神经兴奋的作用[2]。其安全性研究报道较少。

本研究结果显示，连续给予百合更年安颗粒丸26周后，实验期间各组动物均未出现死亡，同空白对照组比较3个剂量组动物的一般状况、活动、行为、饮食、二便等均无明显异常。给药26周时，大剂量MPV，与空白对照组比较显著下降，但血小板未见异常，骨髓细胞检查也未见明显异常，其意义有待进一步研究。给药26周时，雌鼠中低剂量组PT下降与APTT升高，提示可能对内外源性凝血有影响，改变在恢复期恢复。雄鼠恢复期PT下降，但量效关系不明显，其意义有待进一步研究。雌鼠高低剂量组GLU在给药13周时升高，26周时中低剂量组GLU升高，高剂量组与空白对照组比较未见差异，量效时效关系不明显，恢复期后各组GLU与空白对照组比较无明显差异，提示药物可能对血糖有一定影响，但病理检查未见对胰脏有明显影响，其意义有待进一步研究。其余血清生化学指标均在正常值范围波动，无量效和时效关系，未见与药物相关的规律性变化。给药13周时，中剂量组子宫指数增高，但高低剂量组，以及给药26周及停药后未见明显异常。因此，认为各时期各项指标的变动应属于动物的个体改变，有统计学意义无生理学意义，故无明确毒理学意义。

综上所述，百合更年安颗粒丸以35.784、17.892、8.946g生药/kg/日的剂量（相当于人日用剂量的57、28.5、14倍）给大鼠连续灌胃给药26周，未见明显的毒副作用。停药观察4周，未发现对大鼠产生明显的迟发性毒性反应，故认为百合更年安颗粒在临床剂量范围内服用安全性较高。