肠腹宁颗粒止泻作用及其有效成分研究

赖岳晓，刘佩沂，田素英 ，陈文秀

(1.中山市黄圃人民医院，广东 中山 528429；2.广东药学院，广东 广州 510006；3.中山巿宝元制鞋厂职工医院，广东 中山 528463)



肠腹宁颗粒止泻作用及其有效成分研究

赖岳晓1，刘佩沂1，田素英2*，陈文秀3

(1.中山市黄圃人民医院，广东 中山 528429；2.广东药学院，广东 广州 510006；3.中山巿宝元制鞋厂职工医院，广东 中山 528463)

目的：研究肠腹宁颗粒组成药物白头翁、木槿花及其醇、水提取物的止泻作用，筛选其有效成分。方法：建立小鼠腹泻模型，通过观察小鼠小肠的推进作用研究肠腹宁颗粒、白头翁、木槿花及其提取物的止泻作用，筛选有效成分。结果：肠腹宁颗粒(中、高剂量)、白头翁、木槿花及其提取物均可明显抑制番泻叶引起的小鼠腹泻，且高剂量肠腹宁颗粒的止泻效果优于中剂量，醇提取物的止泻效果优于水提取物，肠腹宁颗粒的止泻效果优于白头翁、木槿花；肠腹宁颗粒、白头翁、木槿花及其提取物均可明显降低小肠推进率，且醇提取物抑制作用最强，肠腹宁颗粒的肠推进抑制作用优于白头翁、木槿花。结论：肠腹宁颗粒具有较好的止泻作用，且止泻效果与剂量呈正相关，白头翁与木槿花配伍止泻效果优于单味药，且醇提取物止泻效果优于水提物。

肠腹宁颗粒；醇提取物；止泻作用；有效成分

肠腹宁颗粒是由中山市黄圃人民医院根据名老中医的经验方和临床医疗需求自拟的医院制剂，主要由白头翁和木槿花等组成，临床上用于急慢性肠炎的治疗，尤其对慢性结肠炎有独特疗效[1]，但其有效成分尚不明确。方中主药白头翁可清热解毒、凉血止痢，木槿花可凉血活血、清热除烦，用于肠风下血、赤白下痢等症的治疗[2]。为此，本研究对肠腹宁颗粒、白头翁、木槿花及其不同溶剂提取物的止泻作用进行研究，分析其有效成分，现报道如下。

1 材料与试剂

1.1 药品与试剂

白头翁(玉林市华济中药饮片有限公司，批号：14020118)，木槿花(康圣医药有限公司，批号：20140321)，番泻叶(广西玉林市西草堂中药饮片有限公司，批号：20140201)，以上药材均经田素英副教授鉴定符合《中国药典2010版(一部)》规定。肠腹宁颗粒(中山黄圃人民医院，批号：20140319)，甲硫酸新斯的明(四川精尖动物药业有限公司，批号：20141028)，硫酸阿托品(天津药业集团新郑股份有限公司，批号：1403135)，盐酸小檗碱(东北制药集团沈阳第一制药有限公司，批号：140329)，95%乙醇(AR级，天津市富宇精细化工有限公司，批号：130110)。

醇提物[3-4]：称取白头翁-木槿花(1∶1)粉末45g，置于1 000mL锥形瓶众，加8倍量70%乙醇，在40℃ 40kHz下超声40min，滤液回收至无醇味，加蒸馏水定容至100mL，摇匀，得生药浓度为0.45g·mL-1的醇提液。

水提物：称取白头翁-木槿花(1∶1)粉末45g，加8倍蒸馏水，浸泡20min，煎煮40min，滤液加热浓缩至干，加蒸馏水定容至100mL，摇匀，得生药浓度为0.45g·mL-1的水提液。

白头翁和木槿花提取液的制备方法同水提物制备方法，生药浓度均为0.34g·mL-1。

1.2 动物与分组

昆明(KM)种小鼠，SPF级，由广东药学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK(粤) 2008-0002，体重18～22g，饲养环境温度为20～25℃，湿度为50%～70%。

将小鼠分为以下几组，具体用药方法为：水提物组(水提组，9.00g·kg-1)、醇提物组(醇提组，9.00g·kg-1)、肠腹宁颗粒高剂量组(高剂量，13.50g·kg-1)、肠腹宁颗粒中剂量组(中剂量，6.75g·kg-1)、肠腹宁颗粒低剂量组(低剂量，3.38g·kg-1)、白头翁组(6.80g·kg-1)、木槿花组(6.80g·kg-1)、盐酸小檗碱组(阳性组，0.15g·kg-1)、止泻模型组(番泻叶，6.00g·kg-1)、硫酸阿托品组(阳性组，0.01g·kg-1)、肠功能模型组(甲硫酸新斯的明，0.15mg·kg-1)，空白组(等体积生理盐水)。

2 方法

2.1 止泻实验

取小鼠100只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为10组(水提组、醇提组、高剂量、中剂量、低剂量、白头翁组、木槿花组、阳性组、空白组、模型组)，灌胃给予相应药物，1次/天，连续给药7 天，空白组和模型组小鼠予以等量生理盐水。末次给药前18h禁食不禁水，末次给药1h后，除空白组外，其他各组小鼠灌胃番泻叶水煎液，然后每笼放置1只小鼠，笼下铺中速滤纸进行湿粪计数(湿粪：颗粒湿润完整、成型、水样)，造模30min后，开始计时，每隔1h换1次滤纸，连续记录4h[5]。观察小鼠总便数、稀便数和稀便级，计算腹泻指数[6]。稀便级确定方法：粪便污迹直径<1cm为1；1～1.9cm为2；2～3cm为3；>3cm为4。腹泻指数为稀便率(每只动物所排稀便数/总便数)与稀便级的乘积，即腹泻指数=稀便率×平均直径。

2.2 对小鼠肠功能的影响[7]

2.2.1 对小鼠小肠推进作用的影响 取小鼠90只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为9组(水提组、醇提组、高剂量、中剂量、低剂量、白头翁组、木槿花组、阳性组、空白组)。灌胃给药，1次/天，连续给药7天，空白组、模型组小鼠予以等量生理盐水，末次给药前20h禁食不禁水，末次给药30min后，灌胃10%炭末悬浮液，0.4mL/只，30min后处死小鼠，打开腹腔，分离肠系膜，剪取自幽门至回盲部的小肠，测量小肠长度、推进距离(幽门到炭末推进前沿距离)。炭末推进率=(炭末推进距离∕小肠长度)×100%。

2.2.2 对甲硫酸新斯的明致小鼠小肠功能亢进的影响 取小鼠100只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为10组(水提组、醇提组、高剂量、中剂量、低剂量、白头翁组、木槿花组、阳性组、空白组、模型组)，灌胃给药，1次/天，连续给药7天。空白组、模型组小鼠予以等量生理盐水，末次给药前20h禁食不禁水，末次给药30min后，除空白组外，其余各组小鼠皮下注射甲硫酸新斯的明0.15mg·kg-1，20min后，按“2.2.1”项下方法测量计算炭末推进率。

2.3 统计学方法

3 结果

3.1 止泻实验

与模型组相比，各给药组小鼠腹泻指数均明显降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；阳性组、醇提物组小鼠止泻作用最强，但二者比较差异无统计学意义(P>0.05)；水提物组与肠腹宁颗粒中剂量组止泻作用相当，木槿花组第1小时止泻作用不明显;给药2h后，木槿花、白头翁组的止泻作用与肠腹宁颗粒低剂量组相当。结果见表1。

表1 肠腹宁颗粒、不同提取物及方中各药对小鼠腹泻的影响 ±s)

注：与模型组比较，*P<0.05，▼P<0.01；与醇提组比较，#P<0.05；与高剂量组比较，★P<0.05；与中剂量组比较，●P<0.05。

3.2 对小鼠小肠功能的作用

3.2.1 对正常小鼠小肠功能的作用 在小肠功能正常的情况下，水提组、醇提组、高剂量、中剂量、白头翁组、阳性组小鼠的小肠推进率与空白组比较差异具有统计学意义(P<0.05)，其中醇提组、高剂量组小鼠小肠推进率与空白组比较差异极显著(P<0.01)；木槿花组小鼠肠推进率与肠腹宁低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)；醇提组小鼠肠推进率与高剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05)；肠腹宁高剂量组小鼠肠推进率与中剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05)；肠腹宁高剂量、中剂量组小鼠肠推进率与白头翁组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表2。

表2 肠腹宁颗粒、不同提取物及方中各药对

注：与模型组比较，*P<0.05，▼P<0.01；与醇提组比较，#P<0.05；与高剂量组比较，★P<0.05；与中剂量组比较，●P<0.05。

3.2.2 对甲硫酸新斯的明致小鼠小肠功能亢进的影响 水提组、醇提组、高剂量、中剂量、阳性组药物对新斯的明导致的小鼠小肠亢进均有拮抗作用，但醇提组、肠腹宁高剂量组拮抗作用比较差异无统计学意义(P>0.05)，且二者作用均强于白头翁组、木槿花组、中剂量组、低剂量组。醇提组小鼠小肠拮抗作用与水提组比较差异具有统计学意义(P<0.05)，但白头翁组、木槿花组、低剂量组小鼠小肠拮抗作用比较差异无统计学意义(P>0.05)；肠腹宁高剂量组小鼠小肠拮抗作用与中剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表3。

表3 肠腹宁颗粒、不同提取物及方中各药对新斯

注：与模型组比较，*P<0.05，▼P<0.01；与醇提组比较，#P<0.05；与高剂量组比较，★P<0.05；与中剂量组比较，●P<0.05。

4 讨论

腹泻是急慢性肠炎、过敏性肠炎、溃疡性结肠炎的主要症状，可由多种原因引起。当胃肠腔内水分、电解质与肠上皮接触时间缩短时，可导致水分吸收减少，形成胃肠运动功能异常性腹泻。中医认为湿盛是导致腹泻的重要因素之一。我院自创的中成药肠腹宁颗粒中白头翁具有清热解毒、凉血止痢的功效[2]，主治湿热痢疾等症；木槿花具有清热凉血、解毒消肿的功效，主治痢疾、腹泻等症[3]，该药针对腹泻病机，疗效显著。

本研究结果表明，醇提液的止泻效果优于水提液，可能是由于70%乙醇更有利于生物碱和苷类的溶出[9-10]，而水提液中则含有较多的糖类成分。高剂量肠腹宁的止泻效果弱于醇提液，主要是由于肠腹宁颗粒是由水提物制备而成。

本研究结果表明，肠腹宁颗粒(中、高剂量)、白头翁、木槿花及其提取物均可明显抑制番泻叶引起的小鼠腹泻，且高剂量肠腹宁颗粒止泻效果优于中剂量，醇提取物止泻效果优于水提取物，肠腹宁颗粒止泻效果优于白头翁、木槿花；肠腹宁颗粒、白头翁、木槿花及其提取物均可明显降低小肠推进率，且醇提取物抑制作用最强，肠腹宁颗粒的肠推进抑制作用优于白头翁、木槿花。水提组、醇提组、高剂量、中剂量、阳性组药物对新斯的明导致的小鼠小肠亢进均有拮抗作用。肠腹宁颗粒具有较好的止泻作用，且止泻效果与剂量呈正相关，白头翁与木槿花配伍止泻效果优于单味药，且醇提取物止泻效果优于水提物。

综上所述，肠腹宁颗粒是治疗急慢性结肠炎的有效药物，其含有的白头翁和木槿花均具有较好的止泻作用，但其分子作用机制仍需进一步深入研究。

[1] 刘佩沂,赖岳晓,田素英.肠腹宁颗粒及其主要成分总皂苷体外抗菌实验研究[J].亚太传统医药,2011,7(4):13-14.

[2] 赖岳晓,刘佩沂,田素英,等.木槿花研究概况及存在问题[J].海峡药学,2010,22(1):78-80.

[3] 刘佩沂,赖岳晓,田素英.肠腹宁颗粒中总黄酮的最佳提取工艺[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(11):39-40.

[4] 吕惠卿,吴晓莉.木槿花总黄酮超声提取工艺的优化[J].中国中医药科技,2009,16(6):461-463.

[5] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2000:332.

[6] 曹玲芝,马利芹,王丽叶,等.建立动物腹泻模型的研究进展[J].安徽农业科学,2008,36(26):11383-11385.

[7] 茹丽,郭起岳,许常辉.保济丸粉对小鼠腹泻及肠运动的影响[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(4):235-237.

[8] 赖岳晓,刘佩沂,王嵩,等.肠腹宁颗粒及其主要成分总皂苷镇痛与止泻作用研究[J].中国中医药咨讯,2011(10):52-53.

[9] 丁秀娟.中药白头翁化学成分研究[D].苏州:苏州大学,2010.

[10] 莫少红.白头翁的化学成分及药理作用研究进展[J].中药材,2001,24(5):385-387.

(责任编辑：尹晨茹)

Study on the Anti-Diarrhea of Changfuning Granules and Effective Part

Lai Yuexiao1,Liu Peiyi1,Tian Suying2*,Chen Wenxiu3

(1.Guangdong Zhongshan Huangpu People’s Hospital，Zhongshan，Guangdong 528429,China;2.Dept. of Pharmacy,Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou，Guangdong 510006,China;3.Workers' Hospital of Baoyuan Shoe Factory of Zhongshan,Zhongshan 528463,China)

Objective:Objective:Study the Anti-Diarrhea effects of Changfuning Granules(CFNG),and it,s Radix Pulsatillae(RP),Flos Hibiscus(FH),the different extracts(water,alcohol),Screening effective parts.Methods:Diarrhea in mice model was established，observed the small intestine propulsion,so study the Anti-Diarrhea effects about CFNG,RP,FH and the extracts.Results:CFNG(middle and high doses),RP,FH and the extracts inhibited significantly the mice diarrhea caused by senna leaf，the high dose is better than the mi-ddle dose，the alcohol extract is better than the water extract，CFNG is better than RP and FH.CFNG,RP,FH and the extracts lo-wer significantly rate of small intestine propulsion，the alcohol extract is best,CFNG is better than RP and FH.Conclusion:CFNG has good anti-diarrhea effect，the effect is proportional to the dosage，the effect of the compatibility is better than that of sing-le medicine，the alcohol extract is best.

Changfuning Granules;Extract;Anti-diarrhea;Effective Component

2015-02-02

广东省中山市科技局科研项目( 20122A162)

赖岳晓(1976-)，男，广东省中山市黄圃人民医院副主任中药师，研究方向为医院药剂学。

田素英(1968-)，女，广东药学院副教授，研究方向为中药开发应用。E-mail:zsxqtsy@126.com

R285

A

1673-2197(2015)06-0009-03

10.11954/ytctyy.201506004